Two approaches to discovering and developing new drugs for Chagas disease

This review will focus on two general approaches carried out at the Sandler Center, University of California, San Francisco, to address the challenge of developing new drugs for the treatment of Chagas disease. The first approach is target-based drug discovery, and two specific targets, cytochrome P450 CYP51 and cruzain (aka cruzipain), are discussed. A "proof of concept" molecule, the vinyl sulfone inhibitor K777, is now a clinical candidate. The preclinical assessment compliance for filing as an Investigational New Drug with the United States Food and Drug Administration (FDA) is presented, and an outline of potential clinical trials is given. The second approach to identifying new drug leads is parasite phenotypic screens in culture. The development of an assay allowing high throughput screening of Trypanosoma cruzi amastigotes in skeletal muscle cells is presented. This screen has the advantage of not requiring specific strains of parasites, so it could be used with field isolates, drug resistant strains or laboratory strains. It is optimized for robotic liquid handling and has been validated through a screen of a library of FDA-approved drugs identifying 65 hits.

Paracoccidioidomycoses: a sequential histopathologic study of lesions in experimentally infected rats

Foram utilizados ratos albinos, fêmeas, para o estudo histopatológico sequencial da paracoccidioidomicose experimental. Os animais foram inoculados intraperitonealmente com uma cepa de Paracoccidioides brasiliensis na fase leveduriforme e sacrificados, em determinados intervalos, a partir de 1 a 168 dias pós-infecçäo;cada animal recebeu um inóculo de 4 x 10 células em 0,8 ml de salina. Os animais controles receberam salina contendo raspado do meio de cultura. Foram estudados tecidos correspondentes à área de inoculaçäo. Analisou-se pela microscopia óptica o processo inflamatório granulomatoo em todo o seu conjunto, estudando a populaçäo celular, a matriz extracellular e apresença e características do fungo. Os resultados possibilitaram desmembrar a cinética da resposta inflamatória em três fases: 1) neutrofílica ou macrofágica-neutrofílica; 2) pré-granulomatosa; 3) granulomatosa. A síntese de matriz extracelular iniciou=se pela deposiçäo de material fibrinóide, intensificando-se de modo gradativo com depósito de colágeno, de proteoglicanos e glicoproteínas. Os parasitos estavam presentes em todas as fases estudadas. Períodos de reativaçäo da doença eram nitidamente evidenciados através da concomitância de granulomas recém-formados com granulomas mais antigos, indicando que o processo granulomatoso neste modelo näo resolve a doença, nem täao pouco consegue limitar a disseminaçäo do fungo por um período prolongado

Intrinsic vascularization of granuloma in experimental paracoccidioidomycosis

Rats infected with Paracoccidioides brasiliensis exhibited vascularized granulomas during the granulomatous stage, with more intensity on the 49 th day after infection. These data change the classical belief that the granuloma is always an avascular structure. The authors suggest that the granuloma is under the balanced influence of angiogenic or angiostatic factors, with the usual predominance of the latter, with the consequent advantage of limited antigen diffusion to the vascular system

Avaliacao do efeito de stress na evolucao de paracoccidioidomicose experimental. / Evaluation of the effects of stress in the course of experimental paracoccidioidomycosis

Os Autores aplicaram uma forma de stress em ratos inoculados intraperitonealmente com uma amostra leveduriforme de Paraccoccidioides brasiliensis, numa tentativa de alterar a resistencia dos animais e assim interferir na evolucao natural da doenca. Contudo, as lesoes observadas nestes animais foram iguais as encontradas nas do grupo controle, sem stress, levando os Autores a concluirem que as alteracoes provocadas pelo stress, ou nao foram suficientemente intensas, ou nao tiveram uma natureza significativa a ponto de modificar o curso da molestia