Protective Effect of Indomethacin-loaded Polymeric Nanoparticles Against Oxidative Stress-Induced Cytotoxicity in Human Breast Adenocarcinoma Cell Model / Efeito Protetor de Nanopartículas Poliméricas com Indometacina contra Citotoxicidade Induzida por Estresse Oxidativo em Modelo Celular de Adenocarcinoma de Mama Humano / Efecto Protector de Nanopartículas Poliméricas con Indometacina contra la Citotoxicidad Inducida por Estrés Oxidativo en Modelo de Células de Adenocarcinoma de Mama Humano

Anti-inflammatory drugs are being utilized to treat cancer because of its inflammatory microenvironment. Objective: The objective of this study is to investigate the antioxidant potential of indomethacin and its genotoxicity, since free or loaded in polymeric nanocapsules using MCF-7 (human breast cancer) cells as an in vitro model. Method: Development of indomethacin-loaded polyepsilon-caprolactone (PCL) nanocapsules by interfacial deposition method. It is characterized by pH determination by potentiometer, mean diameter and polydispersity index by dynamic light scattering; zeta potential by electrophoretic mobility; encapsulation efficacy by high performance liquid chromatography method; corona effect formation; 2',7'-dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA) method by spectrofluorimetric assay; nitric oxide (NO) determination by spectrophotometric and genotoxicity assay by plasmid DNA cleavage method. Results: The results showed a mild acidic pH (4.78 ± 0.10), sizes around 200 nm and PDI PDI<0.2 with a zeta potential around -20 mV and encapsulation efficiency of 99% (1 mg mL-1), showing a dose-dependent corona formation profile in 24h incubation. Conclusion: DCFH-DA assay showed no production of reactive oxygen species (ROS) while NO determination showed that Ind-OH-NC from 26.7 to 100 µM increased reactive nitrogen species (RNS), demonstrating antioxidant potential against MCF-7 cells. No sample at the concentrations evaluated induced DNA cleavage, being considered a safe treatment

Introdução: Anti-inflamatórios estão sendo empregados para tratamento de câncer por causa do seu ambiente inflamado. Objetivo: Investigar o potencial antioxidante da indometacina e sua genotoxicidade, livre ou carreada em nanocápsulas poliméricas, usando como modelo in vitro células MCF-7 (câncer de mama humano). Método: Desenvolvimento de nanocápsulas de poliepsilon-caprolactona (PCL) por método de deposição interfacial, caracterizada por determinação de pH por potenciômetro; diâmetro médio e índice de polidispersão por espalhamento dinâmico de luz; potencial zeta por mobilidade eletroforética; eficiência de encapsulação por cromatografia líquida de alta eficiência; formação de efeito corona; método de 2',7'-diclorofluoresceína diacetato (DCFH-DA) por ensaio espectrofluorimétrico; determinação de óxido nítrico (NO) por espectrometria e ensaio de genotoxicidade por método de clivagem do DNA plasmidial. Resultados: Os resultados mostraram leve pH ácido (4,78 ± 0,10), tamanhos em torno de 200 nm e PDI<0,2 com potencial zeta em torno de -20 mV e eficiência de encapsulação de 99% (1 mg mL-1), apresentando perfil de formação de corona dose-dependente em 24 horas de incubação. Conclusão: O ensaio DCFH-DA mostrou que não há produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), enquanto a determinação de NO mostrou que Ind-OH-NC de 26,7 a 100 µM aumentou as espécies reativas de nitrogênio (RNS), demonstrando potencial antioxidante contra MCF-7. Nenhuma amostra nas concentrações avaliadas induziu clivagem do DNA, sendo considerado um tratamento seguro

Introducción: Se están utilizando antiinflamatorios para tratamiento de cáncer debido a su entorno inflamado. Objetivo: Investigar el potencial antioxidante de la indometacina y su genotoxicidad, libre o acarreada en nanocápsulas poliméricas utilizando como modelo in vitro células MCF7 (cáncer de mama humano). Método: Desarrollo de nanocápsulas de poli epsilon-caprolactona (PCL) por método de deposición interfacial, caracterizada por determinación de pH por potenciómetro; diámetro medio e índice de polidispersión por esparcimiento dinámico de luz; potencial zeta por movilidad electroforética; eficiencia de encapsulación por cromatografía líquida de alta eficiencia; formación de efecto corona; método de 2',7'-diclorofluoresceína diacetato (DCFH-DA) por ensayo espectrofluorímetro; determinación de óxido nítrico (NO) por espectrometría y ensayo de genotoxicidad por método de clivaje del ADN plasmídico. Resultados: Los resultados mostraron ligero pH ácido (4,78 ± 0,10), tamaños alrededor de 200 nm y PDI<0,2 con potencial zeta alrededor de -20 mV y eficiencia de encapsulación de 99% (1 mg mL-1), presentando perfil de formación de corona dosis-dependiente en 24h de incubación. Conclusión: El ensayo DCFDA mostró que no hay producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) mientras que la determinación de NO mostró que Ind-OH-NC de 26,7 a 100 µM aumentó las especies reactivas de nitrógeno (RNS), demostrando potencial antioxidante contra MCF-7. Ninguna muestra en las concentraciones evaluadas indujo clivaje del ADN, siendo considerado un tratamiento seguro

Protective Effect of Indomethacin-loaded Polymeric Nanoparticles Against Oxidative Stress-Induced Cytotoxicity in Human Breast Adenocarcinoma Cell Model / Efeito Protetor de Nanopartículas Poliméricas com Indometacina contra Citotoxicidade Induzida por Estresse Oxidativo em Modelo Celular de Adenocarcinoma de Mama Humano / Efecto Protector de Nanopartículas Poliméricas con Indometacina contra la Citotoxicidad Inducida por Estrés Oxidativo en Modelo de Células de Adenocarcinoma de Mama Humano

Introduction: Anti-inflammatory drugs are being utilized to treat cancer because of its inflammatory microenvironment. Objective: The objective of this study is to investigate the antioxidant potential of indomethacin and its genotoxicity, since free or loaded in polymeric nanocapsules using MCF-7 (human breast cancer) cells as an in vitro model. Method: Development of indomethacin-loaded polyepsilon-caprolactone (PCL) nanocapsules by interfacial deposition method. It is characterized by pH determination by potentiometer, mean diameter and polydispersity index by dynamic light scattering; zeta potential by electrophoretic mobility; encapsulation efficacy by high performance liquid chromatography method; corona effect formation; 2',7'-dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA) method by spectrofluorimetric assay; nitric oxide (NO) determination by spectrophotometric and genotoxicity assay by plasmid DNA cleavage method. Results: The results showed a mild acidic pH (4.78 ± 0.10), sizes around 200 nm and PDI<0.2 with a zeta potential around -20 mV and encapsulation efficiency of 99% (1 mg mL-1), showing a dose-dependent corona formation profile in 24h incubation. Conclusion: DCFH-DA assay showed no production of reactive oxygen species (ROS) while NO determination showed that Ind-OH-NC from 26.7 to 100 µM increased reactive nitrogen species (RNS), demonstrating antioxidant potential against MCF-7 cells. No sample at the concentrations evaluated induced DNA cleavage, being considered a safe treatment

Introdução: Anti-inflamatórios estão sendo empregados para tratamento de câncer por causa do seu ambiente inflamado. Objetivo: Investigar o potencial antioxidante da indometacina e sua genotoxicidade, livre ou carreada em nanocápsulas poliméricas, usando como modelo in vitrocélulas MCF-7 (câncer de mama humano). Método: Desenvolvimento de nanocápsulas de poliepsilon-caprolactona (PCL) por método de deposição interfacial, caracterizada por determinação de pH por potenciômetro; diâmetro médio e índice de polidispersão por espalhamento dinâmico de luz; potencial zeta por mobilidade eletroforética; eficiência de encapsulação por cromatografia líquida de alta eficiência; formação de efeito corona; método de 2',7'-diclorofluoresceína diacetato (DCFH-DA) por ensaio espectrofluorimétrico; determinação de óxido nítrico (NO) por espectrometria e ensaio de genotoxicidade por método de clivagem do DNA plasmidial. Resultados: Os resultados mostraram leve pH ácido (4,78 ± 0,10), tamanhos em torno de 200 nm e PDI<0,2 com potencial zeta em torno de -20 mV e eficiência de encapsulação de 99% (1 mg mL-1), apresentando perfil de formação de corona dose-dependente em 24 horas de incubação. Conclusão: O ensaio DCFH-DA mostrou que não há produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), enquanto a determinação de NO mostrou que Ind-OH-NC de 26,7 a 100 µM aumentou as espécies reativas de nitrogênio (RNS), demonstrando potencial antioxidante contra MCF-7. Nenhuma amostra nas concentrações avaliadas induziu clivagem do DNA, sendo considerado um tratamento seguro

Introducción: Se están utilizando antiinflamatorios para tratamiento de cáncer debido a su entorno inflamado. Objetivo: Investigar el potencial antioxidante de la indometacina y su genotoxicidad, libre o acarreada en nanocápsulas poliméricas utilizando como modelo in vitro células MCF-7 (cáncer de mama humano). Método: Desarrollo de nanocápsulas de poli epsilon-caprolactona (PCL) por método de deposición interfacial, caracterizada por determinación de pH por potenciómetro; diámetro medio e índice de polidispersión por esparcimiento dinámico de luz; potencial zeta por movilidad electroforética; eficiencia de encapsulación por cromatografía líquida de alta eficiencia; formación de efecto corona; método de 2',7'-diclorofluoresceína diacetato (DCFH-DA) por ensayo espectrofluorímetro; determinación de óxido nítrico (NO) por espectrometría y ensayo de genotoxicidad por método de clivaje del ADN plasmídico. Resultados: Los resultados mostraron ligero pH ácido (4,78 ± 0,10), tamaños alrededor de 200 nm y PDI<0,2 con potencial zeta alrededor de -20 mV y eficiencia de encapsulación de 99% (1 mg mL-1), presentando perfil de formación de corona dosis-dependiente en 24h de incubación. Conclusión: El ensayo DCFDA mostró que no hay producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) mientras que la determinación de NO mostró que Ind-OH-NC de 26,7 a 100 µM aumentó las especies reactivas de nitrógeno (RNS), demostrando potencial antioxidante contra MCF-7. Ninguna muestra en las concentraciones evaluadas indujo clivaje del ADN, siendo considerado un tratamiento seguro

Perfil bioquímico de pacientes diabéticos de um laboratório privado da região sul do Brasil / Biochemical profile of diabetic patients in a private laboratory in southern Brazil

O diabetes é uma doença crônica decorrente de hiperglicemia permanente. A hemoglobina glicada (HbA1c) resulta da ligação não enzimática entre a hemoglobina e a glicose. A dosagem da mesma é o principal determinante para avaliação do controle glicêmico em pacientes diabéticos. Este estudo objetivou correlacionar idade, perfil glicêmico e lipídico em uma amostra de prontuários de portadores de Diabetes Melito (DM), em um laboratório privado da região sul do Brasil. Foram analisados 776 prontuários no período entre janeiro a março de 2018, sendo que os prontuários foram obtidos a partir de registros dos meses entre março de 2016 a março de 2018. Analisamos HbA1c, glicose, triglicerídeos, colesterol total, LDL-colesterol e HDL-colesterol. Nossos resultados mostram predominância de mulheres idosas (61%), não havendo variação de idade entre os gêneros, em ambos foi possível observar correlação negativa e significativa entre idade e LDL-C. Não houve clara associação entre HbA1c e perfil lipídico na amostra estudada. Os resultados demonstraram aumento nos níveis de HbA1c e redução no colesterol total e LDL-C nos pacientes acima de 60 anos. Encontramos uma forte correlação positiva entre os parâmetros HbA1c e glicose, em ambos os gêneros. As correlações entre idade e demais variáveis foram fracas, entre ambos.

Diabetes is a chronic disease characterized by the presence of permanent hyperglycemia. Glycated Hemoglobin (HbA1c) is formed through the non-enzymatic binding of hemoglobin and glucose. Its dosage in blood is one of the most relevant factors in the evaluation of the glycemic control. The aim of this study is to correlate age, glycemic and lipid profiles in a sample of 776 patients diagnosed with Diabetes Mellitus (DM), from a laboratory in southern Brazil. A total of 776 medical records were analyzed between January and March 2018, and the records were obtained from the records of the months between March 2016 and March 2018. HbA1c, glucose, triglyceride, total cholesterol, LDL-cholesterol and HDL-cholesterol values were analyzed. Our results show a predominance of elderly women (61%), with no age variation between genders, in both it was possible to observe negative and significant correlation between age and LDL-C. There was no clear association between HbA1c and lipid profile. The results showed increased levels of HbA1c and a reduction in total cholesterol and LDL-C in patients over 60 years. A strong positive correlation was found between HbA1c and glucose parameters in both genders. The correlations between age and other variables were weak between both.

Perfil bioquímico de pacientes diabéticos de um laboratório privado da região sul do Brasil / Biochemical profile of diabetic patients in a private laboratory in southern Brazil

O diabetes é uma doença crônica decorrente de hiperglicemia permanente. A hemoglobina glicada (HbA1c) resulta da ligação não enzimática entre a hemoglobina e a glicose. A dosagem da mesma é o principal determinante para avaliação do controle glicêmico em pacientes diabéticos. Este estudo objetivou correlacionar idade, perfil glicêmico e lipídico em uma amostra de prontuários de portadores de Diabetes Melito (DM), em um laboratório privado da região sul do Brasil. Foram analisados 776 prontuários no período entre janeiro a março de 2018, sendo que os prontuários foram obtidos a partir de registros dos meses entre março de 2016 a março de 2018. Analisamos HbA1c, glicose, triglicerídeos, colesterol total, LDL-colesterol e HDL-colesterol. Nossos resultados mostram predominância de mulheres idosas (61%), não havendo variação de idade entre os gêneros, em ambos foi possível observar correlação negativa e significativa entre idade e LDL-C. Não houve clara associação entre HbA1c e perfil lipídico na amostra estudada. Os resultados demonstraram aumento nos níveis de HbA1c e redução no colesterol total e LDL-C nos pacientes acima de 60 anos. Encontramos uma forte correlação positiva entre os parâmetros HbA1c e glicose, em ambos os gêneros. As correlações entre idade e demais variáveis foram fracas, entre ambos. (AU)

Diabetes is a chronic disease characterized by the presence of permanent hyperglycemia. Glycated Hemoglobin (HbA1c) is formed through the non-enzymatic binding of hemoglobin and glucose. Its dosage in blood is one of the most relevant factors in the evaluation of the glycemic control. The aim of this study is to correlate age, glycemic and lipid profiles in a sample of 776 patients diagnosed with Diabetes Mellitus (DM), from a laboratory in southern Brazil. A total of 776 medical records were analyzed between January and March 2018, and the records were obtained from the records of the months between March 2016 and March 2018. HbA1c, glucose, triglyceride, total cholesterol, LDL-cholesterol and HDL-cholesterol values were analyzed. Our results show a predominance of elderly women (61%), with no age variation between genders, in both it was possible to observe negative and significant correlation between age and LDL-C. There was no clear association between HbA1c and lipid profile. The results showed increased levels of HbA1c and a reduction in total cholesterol and LDL-C in patients over 60 years. A strong positive correlation was found between HbA1c and glucose parameters in both genders. The correlations between age and other variables were weak between both. (AU)

Comparison of the effects of triamcinolone acetonide or platelet-rich plasma on expression of extracellular matrix-related genes in equine healthy chondrocytes in vitro / Comparação dos efeitos do acetonido de triancinolona ou plasma rico em plaquetas na expressão de genes relacionados à matriz extracelular de condrócitos in vitro de equinos adultos

ABSTRACT: In healthy cartilage, chondrocytes maintain an expression of collagens and proteoglycans and are sensitive to growth factors and cytokines that either enhance or reduce type II collagen synthesis. In osteoarthritis, pro-inflammatory cytokines, such as IL-6, induce overexpression of metalloproteinases (MMP) and decreasing synthesis of aggrecan. Use of chondroprotectors agents, such as Platelet-Rich Plasma (PRP) and triamcinolone (TA) are alternatives to reduce the progression of joint damage. In this study, we used chondrocytes extracted from metacarpophalangeal joints of healthy horses as the experimental model. Cells were treated in vitro with PRP or TA. No differences were observed between these treatments in comparison to the control group when the expressions of MMP9, MMP13, IL-6 and ACAN genes were evaluated (P<0.05). With these results, we can suggest that the treatments were not deleterious to equine cultured chondrocyte, once they did not stimulate MMPs and IL-6 synthesis or caused changes in ACAN.

RESUMO: Na cartilagem saudável, os condrócitos mantêm a expressão de colágenos e proteoglicanos, sendo sensíveis a fatores de crescimento e citocinas que aumentam ou reduzem a síntese de colágeno tipo II. Na osteoartrite, citocinas pró-inflamatórias, como a IL-6, estimulam a expressão de metaloproteinases (MMP) e reduzem a síntese de agrecano. O uso de condroprotetores, como o Plasma Rico em Plaquetas (PRP) e triancinolona (TA) é uma alternativa para se reduzir a progressão do dano articular. Neste estudo foram usados condrócitos extraídos das articulações metacarpofalangeanas de equinos saudáveis. As células foram tratadas in vitro com TA ou PRP. Não foram observadas diferenças entre os tratamentos comparando-se com o grupo controle quanto à expressão genética de MMP-9, MMP-13, IL-6 e ACAN (p<0,05). Assim, pode-se sugerir que os tratamentos não foram deletérios ao cultivo de condrócitos, uma vez que não estimularam a síntese de MMP e IL-6 e nem causaram alterações no ACAN.

Can Triamcinolone acetonide, platelet-rich plasma, and pentosan polysulfate sodium induce oxidative stress in cultured equine chondrocytes? / Acetonido de triancinolona, plasma rico em plaquetas e pentosano polissulfato sódico podem ocasionar estresse oxidativo em cultivo de condrócitos de equinos?

ABSTRACT: Progressive deterioration and loss of articular cartilage are the final degenerative events common to osteoarthritis (OA). Reactive oxygen species (ROS) play an important role in this chondrocyte catabolic activity, leading to cell death and matrix components breakdown. Intra-articular corticosteroid injections such as triamcinolone acetonide have been used to control pain and inflammation associated with OA. New treatments for OA, platelet-rich plasma and pentosan polysulphate sodium have also been used and further investigations are necessary to determine their safety in joint cells. In this in vitro study, the use of these three substances (triamcinolone acetonide, platelet-rich plasma, and pentosan polysulphate sodium) in healthy chondrocytes did not alter the antioxidant status when compared to control groups, indicating that they could be considered safe in healthy conditions.

RESUMO: A deterioração progressiva e perda da cartilagem articular são os eventos finais da osteoartrite (OA). Espécies reativas de oxigênio (ROS) têm papel importante na atividade catabólica de condrócitos, levando a morte celular e quebra dos componentes da matriz. Injeções intra-articulares de corticosteroides, como com o acetonido de triancinolona, são usadas para controle da dor e inflamação associadas à OA. Novos tratamentos para a OA, como o plasma rico em plaquetas e o pentosano polissulfato sódico, também tem sido utilizados e necessitam de maiores investigações para determinar sua segurança para as células articulares de equinos. Neste estudo in vitro, o uso destas três substâncias (acetonido de triancinolona, pentosan polissulfato de sódio de plasma rico em plaquetas) em condrócitos saudáveis de equinos não alterou o status antioxidante quando comparado aos grupos controle, indicando que puderam ser considerados seguros em condições saudáveis.

Expectativas de escolares de uma comunidade vulnerável: qualidade de vida e esperança sobre profissionais/governantes / Expectations of students of a vulnerable community: quality of life and hope in professional/rulers

Objetivou-se conhecer as expectativas/anseios de escolares sobre mudanças pessoais que possibilitariam melhorias na sua qualidade de vida e o que esperam dos profissionais da saúde e governantes. Estudo transversal, realizado com 435 escolares, de dez anos ou mais, matriculados do quinto ano do ensino fundamental até o último ano do ensino médio. Utilizou-se um questionário com questões fechadas e após a análise estatística descritiva. 45,3% dos pesquisados responderam que gostariam de estudar mais; 26,7%, de valorizar mais os pais. Praticamente metade dos sujeitos gostaria que os profissionais de saúde lhes dessem mais atenção e orientações. Destes, 19,7% consideravam importante o profissional de saúde na escola. 40% dos estudantes esperam honestidade dos governantes e 34,9%, que estes pensem mais no povo. Os escolares têm noção dos seus direitos de cidadania, expressam de forma consciente as expectativas/anseios em relação às mudanças pessoais e o que esperam de profissionais da saúde e governantes.

This study aimed to describe students’ expectations about personal changes that would bring improvements to their quality of life and also about their hope in health professionals and governments. Cross-sectional study, conducted with 435 students, ten years old or more, enrolled in the fifth year of elementary school to the last year of high school. We used a questionnaire with closed questions and after the descriptive statistical analysis. 45.3% of respondents said they would like to study more; 26.7% would like to give parents more value. Nearly half of the subjects would like health professionals to give them more attention and guidance. Among them, 19.7% considered important the presence of health professional in school. 40% of students expect honesty from rulers and 34.9% expect they think more in people. The students are aware of their rights of citizenship, they have conscience to express the expectations / aspirations regarding personal changes and what they expect from health professionals and government.

Este estudio tuvo como objetivo conocer expectativas/aspiraciones de estudiantes acerca de los cambios personales que permitan la mejora de su calidad de vida y lo que esperan de los profesionales de la salud y responsables políticos. Estudio transversal con 435 estudiantes, de diez años de edad o más, en el quinto año de la escuela primaria hasta el último año de la escuela secundaria. Se utilizó un cuestionario con preguntas cerradas y después del análisis estadístico descriptivo. El 45,3% de los encuestados dijo que les gustaría estudiar más; el 26,7% de dar más valor a los padres. A casi la mitad de los sujetos les gustaría que profesionales de la salud les dieran más atención y orientación. De éstos, el 19,7% considera que es importante tener en la escuela el profesional de la salud. El 40% de los estudiantes espera honestidad de los gobernantes y el 34,9% espera que pensaran más en las personas. Los estudiantes son conscientes de sus derechos de ciudadanía, expresan conscientemente expectativas/aspiraciones con respecto a los cambios personales y lo que esperan de los profesionales de la salud y responsables políticos.