Nuevo método de evaluación del efecto antiparasitario en modelos in vitro e in vivo, a través de la visualización de Trypanosoma cruzi-GFP / New method of evaluation of the antiparasitic effect models in in vitro and in vivo, through the viewing of Trypanosoma cruzi-GFP

Los tratamientos de primera línea para la enfermedad de Chagas generan importantes efectos adversos que acentúan el deterioro de la salud en los pacientes. La necesidad de generar fármacos alternativos ha permitido desarrollar estudios donde se emplean parásitos capaces de expresar una proteína fluorescente, a fin de correlacionar fluorescencia con población de protozoarios. En este sentido, ideamos una metodología para el seguimiento de la proliferación de Trypanosoma cruzi-GFP (Green Fluorescent Protein) en modelos in vitro e in vivo, empleando el equipo iBox- UVP. Los ensayos in vitro se iniciaron con una curva de calibración usando concentraciones entre 5x105 y 5x107 parásitos/mL. Seguidamente, con una curva de proliferación evidenciamos a través de la fluorescencia la susceptibilidad de los parásitos frente a la droga comercial Benznidazol (IC50= 5,3±1,3 μM). En el ensayo in vivo se corroboró cualitativamente el efecto quimioterapéutico del Benznidazol (100 mg/kg/día) en ratones C57BL/6, partiendo de un inóculo de 2,5x105 parásitos, haciendo captura de imágenes de fluorescencia cada dos días a partir del día 1, e inicio del tratamiento por vía oral el sexto día. El coeficiente de correlación cercano a 1 obtenido en la curva de calibración habla de un método de cuantificación parasitario sencillo y robusto; también los ensayos en modelos in vitro e in vivo permitieron monitorear el efecto dosis-dependiente de Benznidazol sobre T. cruzi-GFP. En síntesis, elaboramos una metodología novedosa, rápida, no invasiva y que sigue en tiempo real la respuesta quimioterapéutica de drogas anti-T. cruzi.

The first-line treatments for Chagas disease generate significant adverse effects that accentuate the health deterioration in patients. The need to generate alternative drugs has led to the development of studies in which parasites will express a fluorescent protein, and correlate this expression with protozoan population. We devised a methodology for monitoring the proliferation of Trypanosoma cruzi- GFP (Green Fluorescent Protein) in models in vitro and in vivo, using the equipment iBox-UVP. In vitro assays were initiated with a calibration curve using concentrations between 5x105 and 5x107 parasites/mL. Subsequently, with a proliferation curve, through fluorescence we determined the susceptibility of the parasites against the commercial drug Benznidazol (IC50= 5,3±1,3 μM). In vivo assays corroborated qualitatively the chemotherapeutic effect of Benznidazol (100 mg/kg/day) in C57BL/6 mice, starting from an inoculum of 2.5x105 parasites, making capture of fluorescence imaging every two days from day 1, and starting oral treatment on the sixth day. The correlation coefficient close to 1 obtained in the calibration curve showed that this quantification method of parasites is simple and robust; assays in vitro and in vivo allowed monitoring dose-dependent effects of Benznidazol agains T. cruzi-GFP. We have produced an innovative, rapid, non-invasive method that monitors in real time the chemotherapeutic response of anti-T. cruzi drugs.

La imagenologia médica en el laboratorio de morfología: iconografía / Medical imaging laboratory Morphology: iconography of bicéfalo fetus / A imagiologia médica no laboratório de morfologia: iconografia do feto bicéfalo

El nacimiento de gemelos siameses es un fenómeno extraño en las salas de parto de todo el mundo, son producto de un mismo óvulo que por alguna extraña razón no llegó a dividirse; se presenta 1/50.000 o 1/120.000 nacimientos; se estima que el 50% nace muerto y el 35% muere el primer día de vida; y el 70% son de génerofemenino. Un feto bicéfalo es un producto desarrollado con dos cabezas que se unen entre sí por medio de sus porciones temporo-parietales mediales, estando conectados vascularmente y compartiendo o no órganos entre sí; son de tipo monocigóticos y producidos por la separación anormal o incompleta de la porción axial del disco germinativo bilaminar en etapas avanzadas del desarrollo embrionario. En el presente trabajo se expone un caso de siameses bicéfalo de sexo femenino, cuyo espécimen hacía parte de las colecciones de embriología del Laboratorio de Morfología de la Universidad Tecnológica de Pereira, el cual por registro de Historia Clínica y Consentimiento Informado de la madre, quien lo entregó a la Universidad, fue sometido a descripción anatomopatológica con el fin de exponer aspectos relacionados con las posibles causas que los originaron, así como el diagnóstico prenatal de estos defectos congénitos y su diagnóstico Imagineológico postmortem.

The birth of conjoined twins is a strange phenomenon in the delivery rooms around the world, are the product of a single egg that for some reason did not divide; is presenta1 / 50,000 or 1 / 120,000 births; is estimated that 50% stillborn and 35% die on the first day of life; and 70% are female. A two-headed fetus is a product developed with two heads that are joined together through their temporoparietal medial portions being connected vascularized organs and sharing with each other or not; are monozygotic type and produced by abnormal or incomplete separation of the axial portion of the bilaminar germ disc in advanced stages of embryonic development. In this paper a case of two-headed Siamese female, whose specimen was part of the collections of Morphology Embryology Laboratory of the Technological University of Pereira, who for record medical history and informed consent of the mother who is exposed delivered to the University underwent pathological description to explain aspects of the possible causes of these accidents and the prenatal diagnosis of these congenital defects and postmortem imaging diagnosis.

O nascimento de gêmeos siameses é um fenômeno estranho nas salas de parto de todo o mundo. São produto de um mesmo óvulo, que por alguma estranha razão não chegou a dividir-se; se apresenta em 1/50.000 ou 1/120.000 nascimentos. Estima-se que 50% nascem mortos e 35% morre ao primeiro dia de vida; e 70% são do gênero feminino.Um feto bicéfalo é um produto desenvolvido com duas cabeças que se unem entre si por meio de suas porções temporão-parietais mediais, estando conectados vascular-mente e compartilham ou não órgãos entre si; são de tipo monozigóticos e produzi-dos pela separação anormal ou incompleta da porção axial do disco germinativo bi laminar em etapas avançadas do desenvolvimento embrionário. Neste trabalho se expõe o caso de siamesas bicéfalas do sexo feminino, cujo espéci-men fazem parte das coleções de embriologia do Laboratório de Morfologia da Uni-versidade Tecnológica de Pereira, que por registro de Historia Clínica e Consenti-mento Informado da mãe, que o entregou à Universidade, foi submetido a descrição anatomopatológica com o fim de expor aspectos relacionados às possíveis causas que os originaram, assim como o diagnóstico pré-natal destes defeitos congênitos e seu diagnóstico Imagiológico post-mortem.

Incomodidad en niños hospitalizados de siete a catorce años: factores propios de los hospitales / Discomfort in hospitalized children from seven to fourteen. Hospital-specific factors

Se realizó un estudio descriptivo, transversal con el objetivo de identificar varios factores causantes deincomodidad en niños, en seis hospitales de Medellin. La muestra estuvo constituida por 65 niños de ambos sexos con edades entre siete y catorce años, durante los meses de marzo y abril de 2004. Se excluyeron los niños enfermos graves, con deterioro de conciencia o retardo mental. La información se obtuvo a través de una encuesta que tomó datos de la historia y otros que se indagaron en el niño. Las variables analizadas fueron: edad, sexo, estrato socioeconómico, diagnóstico, tiempo depermanencia, ruidos, temperatura ambiental, planta fisica, vestido, comportamiento del personal ycompañíadurante la hospitalización. Los resultados indicaron que la mayoría penenecía al estrato dos, de sexo masculino, con un promedio de 9.6 años, con buenos niveles de escolaridad y hospitalizados durante un promedio de 4.4 días. Los problemas médicos encontrados con mayor frecuencia fueron quirúrgicos, enfermedad médica general y enfermedades infecciosas.Les incomodaba e! ruido proveniente de las personas, el calor de la habitación, la falta de espacio para el acompañante, la carencia de un sitio para guardar pertenencias. Les disgustaba el malgenio y los regaños de los funcionarios, que no les explicaban los procedimientos y que hicieran salir a los padres. Prefirieron lacompañía de los papás durante la hospitalización, las batas blancas del personal de salud y las tocas de lasenfenneras.

A descriptive transverse srudy /Vas performed in order to identify several factors that may cause discomfortto hospitalized children, in six hospitals ofMedellin. The sample included 65 children, both male and female, between seven and fourteen years old, during themonths ofMarch and April of2004. Children in a critical condition, with impaired leve! ofconsciousness or mental retardation were excludedfrom the srudy. The information was collected through a survey applied to the medical chart and through an interview with the child. The analyzed variables were: age, gender, socioeconomic leve!, diagnosis, days of hospitalization, noises,room temperarure, facilities and location, outfits, behavior and company ofthe staffduring the hospitalization. The results indicated that most of the children belong to a low socioeconomic leve!, most of them were boys, aged 9.6 years in average, and attended to school.The average time ofhospitalization /Vas 4.4 dayso The medical isslles most freqllently found were surgical,general medical illness and infectious illness. They were bothered by noise coming from variolls people in other rooms, by their own room heat, the lackof space for the fan1ily companion and the absence of a place to keep their belongings. They disliked the irritability and the scolding from the staff, the absence ofexplanation about the proceedings and the fact of asking their parents to leave the room. They prefer the company of their parents during hospitalization, as well as the staff's white robes and the nurses' hato.