Produção de interleucina-10 na gestação reduz a taxa de replicação do HIV-1 em culturas de linfócitos maternos / Interleukin-10 production during pregnancy reduces HIV-1 replicaction in cultures of maternal lymphocytes

OBJETIVO: avaliar a proliferação de células T e a produção de citocinas em gestantes infectadas pelo HIV-1 e seu impacto na replicação viral in vitro. MÉTODOS: sangue periférico de 12 gestantes infectadas pelo HIV-1 e de seus neonatos, bem como de 10 gestantes HIV-1 negativas, foi colhido e a quantidade de linfócitos TCD4+ e TCD8+ periféricos foi avaliada por citometria de fluxo. Para obter plasma ou células mononucleares periféricas (PBMC), as amostras foram centrifugadas na ausência ou presença de um gradiente de Ficoll-Hypaque, respectivamente. As PBMC foram mantidas em cultura por sete dias na presença de fito-hemaglutinina mais IL-2 recombinante e a resposta linfoproliferativa de células T foi analisada pelo método de exclusão em azul de Trypan. Em alguns experimentos, as culturas foram mantidas na presença adicional de anticorpo anti-IL-10. Os plasmas e sobrenadantes das culturas de PBMC ativadas foram submetidos à análise da produção de citocinas, pelo método ELISA indireto, e a carga viral, detectada pelo RT-PCR. RESULTADOS: independente da carga viral plasmática, a resposta linfoproliferativa em culturas de células obtidas de gestantes infectadas pelo HIV foi inferior às amostras normais [4,2±0,37 vs 2,4±0,56 (x 10(6)) células/mL; p<0.005]. Tanto em gestantes normais quanto em pacientes com cargas virais baixas, os níveis de IL-10 foram mais elevados que os das gestantes com elevada replicação viral (9.790±3.224 vs 1.256±350 pg/mL; p=0.002). Níveis elevados de TNF-alfa no soro (7.200±2.440 vs 510±476 pg/mL) e nas culturas de células (21.350±15.230 vs 1.256±350 pg/mL) correlacionaram-se à carga viral plasmática elevada e a infecção neonatal. O bloqueio da IL-10 endógena com anticorpos anti-IL-10 aumentou a replicação do HIV-1 em cultura de células. CONCLUSAO: nossos resultados sugerem que a IL-10 exerce influência negativa na replicação viral, o que provavelmente contribui para reduzir o risco de infecção vertical.

Reavaliaçåo por testes de 2a. geraçåo da prevalência de anticorpos antivírus da Hepatite C (soro e extrato sérico de papel de filtro) em uma unidade de transplante renal / Further evaluation of HCV antibody reactivities in serum and serum extracted from filter paper of patients and health workers in a renal transplant unit using 2nd generation tests

Objetivos: Reavaliar com testes de 2a. geraçåo a prevalência de anticorpos para o HCV em pacientes e equipe de saúde de uma unidade de transplante renal. Validar o uso de papel de filtro embebido em soro na pesquisa de anticorpos para o HCV. Método: Na classificaçåo dos pacientes quanto à presença ou nåo de hepatite foram utilizados dados clínicos e laboratoriais. A prevalência dos anticorpos para o HCV foi determinada em 79 transplantados renais e 63 profissionais da equipe de saúde por 3 testes ELISA de 2a. geraçåo (Ortho, UBI, Innogenetics). Utilizou-se o seguinte critério quanto às reatividades: positivo - repetidamente reativo nos 3 testes; negativo - nåo reativo nos 3 testes; indeterminado - reatividades discordantes. Para validar o uso de extrato sérico de papel de filtro, compararam-se os resultados obtidos em 46 pares de soro - correspondente extrato sérico. Resultados: Dados clínicos e/ou laboratoriais de hepatite, resolvida ou crônica, foram encontrados em 42 pacientes(53,16 por cento), enquanto que 29 (36,71 por cento) nåo tiveram ou nåo tem hepatite e 8 (10,13 por cento) nåo puderam ser definitivamente classificados. Os testes de 2a. geraçåo foram positivos em 40 pacientes (50,63 por cento) e indeterminados em 7 (8,86 por cento), em contraste com os resultados do teste de 1a. geraçåo (ABBOTT), positivo em 23 casos (29,11 por cento) e limitrofe em 5 (6,33 por cento). Dentre os profissionais da equipe de saúde, para os testes de 2a. geraçåo, houve 1 positivo (1,59 por cento) e indeterminados (3,17 por cento), enquanto que para o teste de 1a. geraçåo havia apenas um caso limítrofe. A prevalência global do HCV (anti-HCV)e HBV (HBsAg) nos pacientes foi de 77,22 por cento e na equipe de saúde 30,16 por cento (27,0 por cento neste último grupo positivo somente para anti-HBcAg). A concordância das reatividades nos 46 pares de soro-extrato sérico foi de 91,3 por cento. Conclusöes: Os testes de 2a. geraçåo classificaram 77,42 por cento (24/31) dos pacientes com hepatite NANB em contraste com os 61 por cento classificados anteriormente. Mesmo com o uso destes testes mais sensíveis, a prevalência do HCV na equipe de saúde foi bem mais baixa que a encontrada para o HBV. O alto índice de concordância dos resultados nos pares soro-extrato sérico sugere ser possível a utilizaçåo de papel de filtro embebido em soro ou sangue total nos levantamentos da prevalência de anticorpos para o HCV

Marcadores virais (vírus B and virus C) em uma unidade de transplante renal / Hepatitis viral markers (virus B and virus C) in a renal transplant unit

Estudamos os marcadores virais para o vírus B (HBsAg) e o vírus C (anti-HCV) em 81 pacientes transplantados renais e 63 indivíduos da equipe de saúde (anti-HBcAg). Dos 81 pacientes, 42 (51,8 por cento) tiveram ou têm hepatite a vírus HBsAg+= 9 (21,4 por cento) anti-HCV+ = 19 (45,2 por cento); ambos = 2 (4,8 por cento); anti-HCV = 1 (2,4 por cento)), 30 näo apresentaram sinais clínicos e laboratoriais de hepatite (anti-HCV+ = 1 (3,3 por cento); anti-HCV = 2(6,7 por cento)) e nove näo puderam ser classificados clínica ou laboratorialmente quanto a hepatite (anti-HCV+= 2 (22,2 por cento); anti-HCV + 2 (22,2 por cento)). A presença de hepatite e de seus marcadores (HBsAg e anti-HCV) correlacionou-se positivamente com o tempo de hemodiálise e o número de transfusöes. O anti-HCV foi capaz de classificar 19 (61,3 por cento) dos 31 pacientes com hepatite NANB e pelo menos 2 (2,22 por cento) do pacientes näo classificados quanto a hepatite. O anti-HCV foi mais frequente nos pacientes com hepatite em atividade do que nos com hepatite resolvida, e nos com hepatite crônica do que nos com hepatite aguda. Dos 63 indivíduos da equipe de saúde, 17 (27 por cento) foram positivos para anti-HBcAg e nenhum para anti-HCV. A idade e principalmente o tempo de trabalho correlacionaram-se positivamente com a presença do anti-HBcAg. Um indiíduo da equipe de saúde, portador de uma hepatite NANB aguda, foi inconclusivo (anti-HCV) para hepatite C

Contribuiçäo ao estudo das doenças sexualmente transmitidas: sífilis, clamídea e HTLV-III/LAV na rotina de laboratório privado no Rio de Janeiro / Sexually transmitted diseases: syphilis, Chlamydia and HTLV-III/LAV in routine of private laboratory in Rio de Janeiro

A análise dos resultados da rotina de diagnóstico imunológico de sífilis, clamídea e HTLV-III/LAV em laboratório privado é apresentada como contribuiçäo ao melhor conhecimento das D.S.T. no Brasil, particularmente no Rio de Janeiro. Procura-se analisar a freqüência destas infecçöes, o possível aumento em sua incidência e comentar as metodologias empregadas e sua interpretaçäo. O acompanhamento mensal dos exames revelou crescimento significativo de infecçöes por clamídea e por HTLV-III/LAV, ambas pesquisadas por ELISA. Com relaçäo à sífilis, näo se constatou variaçäo. A freqüência de sífilis na populaçäo examinada foi estimada em 6,2%, empregando-se o VDRL, modificado para automaçäo em fluxo contínuo, e o FTA-ABS IgG. De 1547 soros avaliados por ambos os métodos encontrou-se sífilis em atividade em 35% e falsos positivos biológicos em 1,9%. A sensibilidade (99,2%), especificidade (98,7%), VP + (35%) e VP - (98,1%) foram determinadas para o FTA-ABS IgG, demonstrando-se a necessidade do VDRL quantitativo para a avaliaçäo de atividade da doença. Resultados negativos, no entanto, excluem a infecçäo. Considerando-se a elevada freqüência de reaçöes falso-positivas nos testes para anti-HTLV-III/LAV e na atual impossibilidade de se fazer o Western-Blot na rotina, procurou-se analisar a relaçäo absorbância/cut-off. Dos 110 soros positivos encontrados, 23,6% têm relaçäo superior a 5, considerada como de alta probabilidade para resultados verdadeiros no método