Primer aislamiento de enterobacteria productora de carbapenemasa tipo-NDM en un hospital público de Rosario, Argentina PDF / First isolation of a NDM-like carbapenemase-producing Enterobacteriaceae in a public hospital in Rosario, Argentina

Introducción: La emergencia de enterobacterias productoras de carbapenemasas en el ámbito hospitalario representa un verdadero problema de salud pública mundial. Las carbapenemasas son enzimas que producen resistencia a los antibióticos carbapenémicos, teniendo un directo impacto en la disponibilidad de alternativas terapéuticas. En Argentina, a partir de 2013 han emergido carbapenemasas tipo-NDM (Nueva Delhi Metalo-ß-lactamasa, MßL), que constituyen una resistencia emergente a nivel global. Objetivo: Reportar el primer aislamiento clínico de enterobacteria portadora de NDM en nuestra institución. Materiales y métodos: El aislamiento estudiado fue recuperado de una muestra ósea de un paciente adulto. La identificación bacteriana y los ensayos de susceptibilidad antibiótica se realizaron mediante metodología manual y sistema automatizado Vitek 2C (Biomérieux). La detección y caracterización de carbapenemasas se efectuó por ensayos fenotípicos y moleculares. Resultados: Los ensayos revelaron que el aislamiento, tipificado como Citrobacter freundii, es productor de carbapenemasa tipo NDM. Resultó sensible a aztreonam, colistina y fosfomicina. No se detectó fenotípicamente la presencia de beta lactamasas de espectro extendido. Discusión: Se reporta el primer aislamiento de enterobacteria productor de MßL tipo-NDM en nuestro nosocomio, siendo multirresistente, con escasas alternativas terapéuticas. Dado que la presencia de este tipo de aislamiento es considerado de alto riesgo, se requiere un monitoreo activo de este mecanismo de resistencia y la instauración de medidas de control adecuadas para hacer frente a la amenaza que suponen

Introduction: the emergence of carbapenemase-producing Enterobaceriaceae in the hospital environment represents a major challenge for health care worldwide. Carbapene-mases are carbapenem-hydrolysing enzymes that confer resistance to these "last-line" antibiotics having a direct im-pact on the limited treatment options available. In Argentina, carbapenemases NDM-like (New DelhiMetallo-ß-lactamase, MßL) have emerged in 2013. This resistance has increased in frequency and it has disseminated around the world at unprecedented levels.Objective:report the first isolation of a NDM-producing En-terobacteriaceae in our hospital.Materials and methods: the isolate analysed in this study was recovered from a bone biopsy belonging to an adult patient. The bacterial identification and antimicrobial sus-ceptibility testings were performed using conventional methods and the automated system Vitek 2C (Biomérieux). Phenotypic and molecular techniques were carried out for the detection and characterization of carbapenemases.Results: it was confirmed that the isolate, identified as Citro-bacter freundii, produces the NDM enzyme. It showed sensi-bility to aztreonam, colistin and fosfomicyn. Extended-spec-trum beta-lactamases were not detected.Discussion: in this study we report the first isolation of NDM-like MßL in our institution, a multirresistant pathogen associ-ated with a lack of effective antimicrobial treatment options. Given the high risk of these infections, an active search of mechanisms of resistance is mandatory. In addition, the establishment of accurate control measures is a must to attempt to overcome this formidable threat

Criterios de ensayo, interpretación e informe de las pruebas de sensibilidad a los antibióticos en los bacilos gram negativos no fermentadores de importancia clínica: recomendaciones de la Subcomisión de Antimicrobianos de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas, Asociación Argentina de Microbiología / Antimicrobial susceptibility testing in clinically relevant non-fermenting gram-negative bacilli: recommendations from the Antimicrobial Agents Subcommittee of the Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas, Asociación Argentina de Microbiología

En este documento se dan a conocer una serie de recomendaciones para el ensayo, la lectura, la interpretación y el informe de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos para los bacilos gram negativos no fermentadores (BGNNF) que se aíslan en humanos. Se adoptaron como base las recomendaciones internacionales, las de la Subcomisión de Antimicrobianos de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas y las de un grupo de expertos invitados. Se incluye, además, la nomenclatura actualizada de los BGNNF y la descripción de algunas de sus características individuales, de sus resistencias naturales o habituales a los antimicrobianos de uso clínico y de los mecanismos responsables de tales resistencias. También se indican los agentes antimicrobianos que se deberían ensayar frente a las distintas especies, con la especificación de cuáles deberían ser informados, y su ubicación estratégica en las placas de cultivo para poder detectar los mecanismos de resistencia más frecuentes y relevantes. Por último, se detallan los métodos de detección y de confirmación fenotípica de la presencia de b-lactamasas emergentes en Argentina, como las carbapenemasas clases A y B.

This document contains the recommendations for antimicrobial susceptibility testing of the clinically relevant non-fermenting gram-negative bacilli (NFGNB), adopted after conforming those from international committees to the experience of the Antimicrobial Agents Subcommittee members and invited experts. This document includes an update on NFGNB classification and description, as well as some specific descriptions regarding natural or frequent antimicrobial resistance and a brief account of associated resistance mechanisms. These recommendations not only suggest the antimicrobial drugs to be evaluated in each case, but also provide an optimization of the disk diffusion layout and a selection of results to be reported. Finally, this document also includes a summary of the different methodological approaches that may be used for detection and confirmation of emerging b-lactamases, such as class A and B carbapenemases.

Evaluation of phenotypic and genotypic markers for clinical strains of acinetobacter baumannii

Acinetobacter baumannii es un importante patógeno oportunista. Este microorganismo adquiere con facilidad resistencia a antimicrobianos, involucrándose en infecciones nosocomiales generalmente graves. Estas características promueven el análisis epidemiológico de las infecciones provocadas por el mismo. Sin embargo, no hay aún un esquema de tipificación generalmente aceptado para este patógeno. Hemos evaluado en este trabajo diferentes procedimientos fenotípicos y genotípicos para la caracterización de aislamientos clínicos de A. baumannil aislados en un Hospital Público de Rosario (Hospital de Emergencias Clemente Alvarez, HECA), durante un período de cuatro años. Estos incluyeron PCR con oligonucleótidos degenerados (OD-PCR), PCR empleando cebadores homólogos a secuenciais palindrómicas extragénicas repetitivas (REP-PCR), electroforesis en geles de agarosa con campo pulsado (PFGE) y ensayo de susceptibilidad a antimicrobianos. OD-OCR y PFGE, entre los métodos individuales, fueron los métodos de mayor poder discriminatorio (índice discriminatorio, D, de 0.98 y 0.96; respectivamente). Por otra parte, el antibiotipo y REP-PCR presentaron menor discriminacíon (D: 0.86 y 0.77; respectivamente). La combinación de antibiotipo con cada uno de los procedimientos genotípicos mencionados originó un aumento importante en los índices discriminatorios de cada método. En particular, la combinación de OD-PCR y antibiotipo constituvó la mejor metodología para el estudio epidemiológico de A.baumannii. Así, la combinación de los procedimientos feno- y genotípicos mencionados permitó inferir las relaciones genéticas y la diseminación de clones de A.baumannii multirresistentes en el HECA en el período 1994-99. Una cepa particular, sensible a imipenem, estuvo ampliamente diseminada en el hospital durante 1994-1996. Por otra parte, un clon diferente, con resistencia adicional a carbapenemes, se diseminó rapidamente en el hospital en 1997, en coincidencia con la introducción de imipenem como terapia antibiótica.

Caracterización de Streptococcus causantes de mastitis bovina en Argentina, mediante métodos fenotípicos y genotípicos / Characterisation of streptococcus causing bovine mastitis in Argentina using genotypic and phenotypic methods

En este trabajo se han caracterizado aislamientos de Streptococcus de leche de vacas con mastitis de la cuenca lechera de Santa Fe y Córdoba, Argentina. Se recuperaron 30 aislamientos de 169 muestras de leche, que fueron identificados bioquímica y serológicamente como Streptococcus agalactiae (22 aislamientos), S. dysgalactiae (seis aislamientos) y S. uberis (dos aislamientos). El análisis genotípico por RAPD mostró cuatro cepas distintas en la población de S. agalactiae, seis en la de S. dysgalactiae y dos en S. uberis. Cada uno de los cuatro rodeos analizados se mostró colonizado por una única cepa de S. agalactiae, mientras que cepas diferentes de S. dysgalactiae coexistieron en un rodeo. Se identificó un fragmento de ADN común a todos los aislamientos de S. agalactiae estudiados, ausente en las otras especies. Estos resultados indican que las metodologías empleadas constituyen una herramienta eficaz para el diagnóstico y la investigación epidemiológica de estreptococos en ganado bovino.

Phenotypic and getotypic study of Streptococcus agalactiae in vagina of pregnant women in Argentina

Streptococcus agalactiae (GBS) is a leading cause of serious neonatal infection. In this study we determine the prevalence, serotype distribution and genomic diversity of GBS in vagina of pregnant women.Vaginal swabs of 531 pregnant women were cultured on Columbia Agar Base Blood, GBS Agar Base and Todd Hewitt Broth. GBS were characterized by group and type-specific agglutination. Genomic polymorphism was studied by random amplification of DNA (RAPD). Seventeen patients (3.2 percent) were positive for GBS, resulting serotype III the most frequent. RAPD detected 16 different RAPD profiles from 21 GBS studied, revealing a good discriminatory power. In this sense, this method showed different genotype from GBS serotype III recovered from successive samples of two patients, suggesting reinfection. In conclusion, the combination of RAPD and serotyping appear promising for epidemiological studies. Finally, findings of reinfection after therapy during pregnancy, led us to suggest performing prenatal GBS screening and intrapartum prophylaxis in order to reduce neonatal risk.

Prevención de la transmisión materno-neonatal de Sptreptococcus agalactiae resistente al tratamiento: analisis de un caso / Prevention of the maternal-neonatal transmission of streptococcus agalactiae resistent to the treatment. Analysis of a case

Se presenta el caso de una paciente gestante con antecedente de un embarazo previo, que concluyó en sepsis neonatal de evolución falta. La colonización por Streptococcus agalactiae (serotipo III) tanto en heces como en sangre del neonato fallecido, en los loquios materno, así como en sucesivos aislamientos provenientes de exudades vaginales posteriores al parto, fue verificada mediante metolodolgía fenotípica (biotipificación y serotipificación)

Characterization of clinical isolates of Streptococcus agalactiae by random amplified polymorphic DNA using degenerate oligonucleotides

Epidemioiogicai studies of Streptococcus agalactiae strains have been limited by the lack of sensitive and discriminatory methods for comparing clinical isolates. Serotyping, albeit a widely used methodology, has been shown to possess low capability to distinguish between epidemiologically related and unrelated isolates. We have employed here a random amplification of polymorphic DNA (RAPD) assay, using degenerate oligonucleotides as primers, to characterize S. agalactiae isolates from related or unrelated clinical samples. Epidemioiogically-related isolates (mother-infant pairs) showed identical profiles by this methodology. On the contrary, 12 epidemioiogically-unrelated isolates (ciassified into 5 different serotypes) resulted in ll distinct RAPD patterns. This suggests that the proposed modified RAPD assay provides a highly discriminatory tool for the analysis of genomic diversity among isolates from pathogenic organisms.