Nitric oxide regulates adhesiveness, invasiveness, and migration of anoikis-resistant endothelial cells

Anoikis is a type of apoptosis that occurs in response to the loss of adhesion to the extracellular matrix (ECM). Anoikis resistance is a critical mechanism in cancer and contributes to tumor metastasis. Nitric oxide (NO) is frequently upregulated in the tumor area and is considered an important player in cancer metastasis. The aim of this study was to evaluate the effect of NO on adhesiveness, invasiveness, and migration of anoikis-resistant endothelial cells. Here, we report that anoikis-resistant endothelial cells overexpress endothelial nitric oxide synthase. The inhibition of NO release in anoikis-resistant endothelial cells was able to decrease adhesiveness to fibronectin, laminin, and collagen IV. This was accompanied by an increase in cell invasiveness and migration. Furthermore, anoikis-resistant cell lines displayed a decrease in fibronectin and collagen IV protein expression after L-NAME treatment. These alterations in adhesiveness and invasiveness were the consequence of MMP-2 up-regulation observed after NO release inhibition. The decrease in NO levels was able to down-regulate the activating transcription factor 3 (ATF3) protein expression. ATF3 represses MMP-2 gene expression by antagonizing p53-dependent trans-activation of the MMP-2 promoter. We speculate that the increased release of NO by anoikis-resistant endothelial cells acted as a response to restrict the MMP-2 action, interfering in MMP-2 gene expression via ATF3 regulation. The up-regulation of nitric oxide by anoikis-resistant endothelial cells is an important response to restrict tumorigenic behavior. Without this mechanism, invasiveness and migration potential would be even higher, as shown after L-NAME treatment.

Silicon as an attenuator of drought stress in plants of Oryza sativa L. treated with dietholate / Silício como atenuador de estresse hídrico em plantas de Oryza sativa L. tratadas com dietholate

Abstract Silicon (Si) is an element that can improve the growth and development of rice plants in water-deficient environments because it is an enzymatic stimulant, signaling for production of antioxidant compounds. Therefore, the aim of this study was to examine the relationship between water deficiency and the effect of Si on two rice cultivars whose seeds were treated with dietholate. The experimental design was fully randomized with three replicates, and treatments were organized in a 3x2x2x4 factorial arrangement: three water soil conditions (50% and 100% of soil water retention capacity (WRC) and complete submergence in a water blade of 5.0 cm); two cultivars (IRGA 424 RI and Guri INTA CL); two sources of Si (sodium metasilicate and potassium metasilicate); and four rates of Si (0; 4.0; 8.0 and 16 g L-1). Chlorophyll a and b, leaf area and shoot and root dry weight increased at higher rates of Si under the three soil water regimes. There was an increase in superoxide dismutase and guaiacol peroxidase enzyme activity in the cultivars at higher rates of Si, reducing lipid peroxidation caused by water deficiency. Therefore, Si did indeed attenuate water deficiency stress in rice plants emerging from seeds treated with dietholate.

Resumo O silício (Si) é um elemento que pode proporcionar melhor crescimento e desenvolvimento às plantas de arroz cultivadas em ambientes com deficiência hídrica, por ser um estimulador enzimático, promovendo sinalização para produção de compostos antioxidantes. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar a relação entre deficiência hídrica e o efeito do Si em duas cultivares de arroz tratadas com dietholate. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com três repetições e os tratamentos arranjados em esquema fatorial 3x2x2x4, sendo os fatores: três condições hídricas do solo (50%, 100% da capacidade de retenção de água no solo (CRA) e lâmina d'água de 5,0 cm), duas cultivares (IRGA 424 RI e Guri INTA CL), duas fontes de Si (metassilicato de sódio e metassilicato de potássio) e quatro doses de Si (0; 4,0; 8,0 e 16 g L-1). O índice de clorofila a e b, a área foliar e o teor de massa seca da parte aérea e raiz aumentaram com o aumento das doses de Si nas três condições hídricas do solo. Houve um aumento na atividade das enzimas superóxido dismutase e guaiacol peroxidase nas cultivares estudadas à medida que as doses de Si aumentaram, diminuindo a peroxidação de lipídios, causada pela restrição hídrica. Portanto, o Si atenua o estresse por déficit hídrico em plantas de arroz emergentes de sementes tratadas com dietholate.

Light quality and dormancy overcoming in seed germination of Echium plantagineum L. (Boraginaceae) / Qualidade da luz e superação de dormência na germinação de sementes de Echium plantagineum L. (Boraginaceae)

Abstract Light is considered a factor that influences the seed germination of many weed species, and it can signal whether the environmental conditions are favorable or are not favorable for germination. We aimed to study if there is an influence of light quality and dormancy overcoming in seed germination of Echium plantagineum L. We carried out a 2 x 6 factorial experiment, with and without dormancy overcoming with potassium nitrate followed by immersion in gibberellic acid; six light qualities, obtained through the light filters: blue, green, red, far-red, white light and absence of light. The evaluations performed were germination speed index (GSI), average germination time (AGT), germination at the four and 14 days after seeding (DAS), accumulated germination and relative frequency of germination. We observed significant interaction among the light qualities and seed dormancy overcoming or not for the studied variables. There was no significant effect of light qualities, in the evaluated variables, when performing dormancy overcoming, presenting germination above 90% in all the light qualities. However, without dormancy overcoming, we observed greater GSI, germination at four and 14 DAS for the red light filter with 5, 4, 29 and 45%, respectively. When the seeds were submitted to the absence of light, and without dormancy overcoming, there was only 7% of germination at 14 DAS. The seeds of E. plantagineum presented greater germination under incidence of red light, without dormancy overcoming, being classified as preferably positively photoblastics, provided that the dormancy is not overcome.

Resumo A luz é considerada um fator que influencia a germinação das sementes de muitas espécies de plantas daninhas, podendo sinalizar se as condições ambientais são favoráveis ou não para a germinação. Objetivou-se estudar se há influência da qualidade da luz e superação de dormência na germinação de sementes de Echium plantagineum L. Realizou-se um experimento fatorial 2 x 6, com e sem superação de dormência com nitrato de potássio seguido pela imersão em ácido giberélico; seis qualidades de luz, obtidas através de filtros de luz: azul, verde, vermelho, vermelho-distante, luz branca e ausência de luz. As avaliações realizadas foram índice de velocidade de germinação (IVG), tempo médio de germinação (TMG), germinação aos quatro e 14 dias após a semeadura (DAS), germinação acumulada e frequência relativa de germinação. Observou-se interação significativa entre as qualidades de luz e a superação ou não de dormência das sementes para as variáveis estudadas. Não houve efeito significativo das qualidades de luz, nas variáveis avaliadas, ao realizar superação de dormência, apresentando germinação acima de 90% em todas as qualidades de luz. Todavia, sem superação de dormência, observou-se maior IVG, germinação aos quatro e 14 DAS para o filtro de luz vermelha com 5,4, 29 e 45%, respectivamente. Quando as sementes foram submetidas à ausência de luz, e sem superação de dormência, houve apenas 7% de germinação aos 14 DAS. As sementes de E. plantagineum apresentam maior germinação sob incidência de luz vermelha, sem superação de dormência, sendo classificadas como fotoblásticas positivas preferenciais, desde que não seja superada a dormência.

Eficiência de duas técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães e avaliação seminal pós-criopreservação / [Efficiency of two techniques for recovering epididymal spermatozoids from dogs and seminal evaluation post cryopreservation]

O objetivo deste trabalho foi avaliar a recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, utilizando as técnicas de fluxo retrógrado (FR) e flutuação (FL) em diluidor Tris-gema, antes e após a criopreservação. Foram coletados 30 complexos testículo-epididímos (CTE), sendo 15 para FR e 15 para FL, e, logo após a recuperação dos espermatozoides, foram analisadas as alterações morfológicas nessas células espermáticas. Após a adição do diluidor, foram avaliados os parâmetros de motilidade total (MOT) e vigor (V) espermáticos. O sêmen pós-criopreservado foi submetido ao teste de termorresistência nos tempos T0, T30, T60 e T90 minutos, além da avaliação das membranas plasmática e acrossomal por sondas fluorescentes. Não houve diferença estatística entre as técnicas quanto à MOT e ao vigor no sêmen diluído (FR-MOT: 82,3% e V: 3,4; FL-MOT: 79,6% e V: 3,2) e pós-criopreservado (FR-MOT: 34% e V: 2,8; FL-MOT: 30% e V: 2,7). A partir do T30, houve diferença significativa quanto à MOT e ao vigor nas técnicas utilizadas, e o tempo também prejudicou o acrossoma espermático a partir do T30. Conclui-se que as técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, testadas neste trabalho, podem ser utilizadas para refrigeração e criopreservação de sêmen.(AU)

The objective of this work was to evaluate the recovery of epididymal spermatozoa from castrated dogs using retrograde flow (FL) and flotation (FL) techniques in Tris-egg yolk diluent, before and after cryopreservation. Thirty testicle-epididymal complexes (CTE) were collected, 15 for FR and 15 for FL and soon after spermatozoid recovery, morphological changes in these spermatic cells were analyzed. After addition of the diluent, the parameters of total motility (MOT) and vigor (V) were evaluated. The post-cryopreserved semen was submitted to thermoresistance (TTR) test at T0, T30, T60 and T90 minutes, as well as the plasma and acrosomal membrane evaluation by fluorescent probes. There was no statistically significant difference between techniques tested for MOT and vigor in the diluted semen (FR-MOT: 82.3% and V: 3.4, FL-MOT: 79.6% and V: 3.2) and post-cryopreserved (FR-MOT: 34% and V: 2.8, FL-MOT: 30% and V: 2.7). From the T30 there was a significant difference regarding MOT and vigor in the used techniques, and the time also damaged the spermatic acrosome from the T30. It is concluded that the epididymal spermatozoa recovering techniques from castrated dogs, tested in this study, can be used for semen refrigeration and cryopreservation.(AU)

Light quality and dormancy overcoming in seed germination of Echium plantagineum L. (Boraginaceae)

Abstract Light is considered a factor that influences the seed germination of many weed species, and it can signal whether the environmental conditions are favorable or are not favorable for germination. We aimed to study if there is an influence of light quality and dormancy overcoming in seed germination of Echium plantagineum L. We carried out a 2 x 6 factorial experiment, with and without dormancy overcoming with potassium nitrate followed by immersion in gibberellic acid; six light qualities, obtained through the light filters: blue, green, red, far-red, white light and absence of light. The evaluations performed were germination speed index (GSI), average germination time (AGT), germination at the four and 14 days after seeding (DAS), accumulated germination and relative frequency of germination. We observed significant interaction among the light qualities and seed dormancy overcoming or not for the studied variables. There was no significant effect of light qualities, in the evaluated variables, when performing dormancy overcoming, presenting germination above 90% in all the light qualities. However, without dormancy overcoming, we observed greater GSI, germination at four and 14 DAS for the red light filter with 5, 4, 29 and 45%, respectively. When the seeds were submitted to the absence of light, and without dormancy overcoming, there was only 7% of germination at 14 DAS. The seeds of E. plantagineum presented greater germination under incidence of red light, without dormancy overcoming, being classified as preferably positively photoblastics, provided that the dormancy is not overcome.

Resumo A luz é considerada um fator que influencia a germinação das sementes de muitas espécies de plantas daninhas, podendo sinalizar se as condições ambientais são favoráveis ou não para a germinação. Objetivou-se estudar se há influência da qualidade da luz e superação de dormência na germinação de sementes de Echium plantagineum L. Realizou-se um experimento fatorial 2 x 6, com e sem superação de dormência com nitrato de potássio seguido pela imersão em ácido giberélico; seis qualidades de luz, obtidas através de filtros de luz: azul, verde, vermelho, vermelho-distante, luz branca e ausência de luz. As avaliações realizadas foram índice de velocidade de germinação (IVG), tempo médio de germinação (TMG), germinação aos quatro e 14 dias após a semeadura (DAS), germinação acumulada e frequência relativa de germinação. Observou-se interação significativa entre as qualidades de luz e a superação ou não de dormência das sementes para as variáveis estudadas. Não houve efeito significativo das qualidades de luz, nas variáveis avaliadas, ao realizar superação de dormência, apresentando germinação acima de 90% em todas as qualidades de luz. Todavia, sem superação de dormência, observou-se maior IVG, germinação aos quatro e 14 DAS para o filtro de luz vermelha com 5,4, 29 e 45%, respectivamente. Quando as sementes foram submetidas à ausência de luz, e sem superação de dormência, houve apenas 7% de germinação aos 14 DAS. As sementes de E. plantagineum apresentam maior germinação sob incidência de luz vermelha, sem superação de dormência, sendo classificadas como fotoblásticas positivas preferenciais, desde que não seja superada a dormência.

Silicon as an attenuator of drought stress in plants of Oryza sativa L. treated with dietholate

Abstract Silicon (Si) is an element that can improve the growth and development of rice plants in water-deficient environments because it is an enzymatic stimulant, signaling for production of antioxidant compounds. Therefore, the aim of this study was to examine the relationship between water deficiency and the effect of Si on two rice cultivars whose seeds were treated with dietholate. The experimental design was fully randomized with three replicates, and treatments were organized in a 3x2x2x4 factorial arrangement: three water soil conditions (50% and 100% of soil water retention capacity (WRC) and complete submergence in a water blade of 5.0 cm); two cultivars (IRGA 424 RI and Guri INTA CL); two sources of Si (sodium metasilicate and potassium metasilicate); and four rates of Si (0; 4.0; 8.0 and 16 g L-1). Chlorophyll a and b, leaf area and shoot and root dry weight increased at higher rates of Si under the three soil water regimes. There was an increase in superoxide dismutase and guaiacol peroxidase enzyme activity in the cultivars at higher rates of Si, reducing lipid peroxidation caused by water deficiency. Therefore, Si did indeed attenuate water deficiency stress in rice plants emerging from seeds treated with dietholate.

Resumo O silício (Si) é um elemento que pode proporcionar melhor crescimento e desenvolvimento às plantas de arroz cultivadas em ambientes com deficiência hídrica, por ser um estimulador enzimático, promovendo sinalização para produção de compostos antioxidantes. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar a relação entre deficiência hídrica e o efeito do Si em duas cultivares de arroz tratadas com dietholate. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com três repetições e os tratamentos arranjados em esquema fatorial 3x2x2x4, sendo os fatores: três condições hídricas do solo (50%, 100% da capacidade de retenção de água no solo (CRA) e lâmina dágua de 5,0 cm), duas cultivares (IRGA 424 RI e Guri INTA CL), duas fontes de Si (metassilicato de sódio e metassilicato de potássio) e quatro doses de Si (0; 4,0; 8,0 e 16 g L-1). O índice de clorofila a e b, a área foliar e o teor de massa seca da parte aérea e raiz aumentaram com o aumento das doses de Si nas três condições hídricas do solo. Houve um aumento na atividade das enzimas superóxido dismutase e guaiacol peroxidase nas cultivares estudadas à medida que as doses de Si aumentaram, diminuindo a peroxidação de lipídios, causada pela restrição hídrica. Portanto, o Si atenua o estresse por déficit hídrico em plantas de arroz emergentes de sementes tratadas com dietholate.

Cytokine profile and lymphocyte subsets in type 2 diabetes

Type 2 diabetes mellitus (T2D) is a metabolic disease with inflammation as an important pathogenic background. However, the pattern of immune cell subsets and the cytokine profile associated with development of T2D are unclear. The objective of this study was to evaluate different components of the immune system in T2D patients' peripheral blood by quantifying the frequency of lymphocyte subsets and intracellular pro- and anti-inflammatory cytokine production by T cells. Clinical data and blood samples were collected from 22 men (51.6±6.3 years old) with T2D and 20 nonsmoking men (49.4±7.6 years old) who were matched for age and sex as control subjects. Glycated hemoglobin, high-sensitivity C-reactive protein concentrations, and the lipid profile were measured by a commercially available automated system. Frequencies of lymphocyte subsets in peripheral blood and intracellular production of interleukin (IL)-4, IL-10, IL-17, tumor necrosis factor-α, and interferon-γ cytokines by CD3+ T cells were assessed by flow cytometry. No differences were observed in the frequency of CD19+ B cells, CD3+CD8+ and CD3+CD4+ T cells, CD16+56+ NK cells, and CD4+CD25+Foxp3+ T regulatory cells in patients with T2D compared with controls. The numbers of IL-10- and IL-17-producing CD3+ T cells were significantly higher in patients with T2D than in controls (P<0.05). The frequency of interferon-γ-producing CD3+ T cells was positively correlated with body mass index (r=0.59; P=0.01). In conclusion, this study shows increased numbers of circulating IL-10- and IL-17-producing CD3+ T cells in patients with T2D, suggesting that these cytokines are involved in the immune pathology of this disease.

Functional leaf traits of understory species: strategies to different disturbance severities / Traços funcionais foliares de espécies de sub-bosque: estratégias às diferentes intensidades de perturbação

The specific leaf area (SLA) has been related to environmental disturbances, showing a positive correlation between the disturbances intensities and SLA in a plant community. These studies, however, assessed the responses of plant community as a whole, neglecting species attributes, such as the position in the vertical stratum of forests. Considering the importance of SLA to understand forest ecological processes, this study aimed to determine the influence of the disturbance regime on the SLA of understory species, considering that, unlike for communities as a whole, an increase in the disturbance intensity implies a decrease in SLA of understory species. This study was conducted in nine understories of seasonal forests in Brazil. The most abundant species were selected and their SLA were evaluated. The variability of SLA among populations in different forests was analyzed by Student’s t-tests. The SLA of the understories (SLAU) was also compared by an adaptation of the Community-weighted mean index. The comparison of species SLA showed significant differences among the populations of understories under different disturbance regime, showing a decrease in SLA with an increase in the disturbance intensity. Similar results were found for the SLA of understories communities (SLAU), corroborating our hypothesis. The correlation between a reduction in species SLA and in SLA of understory with an increase in disturbance intensity, contradicted the trend observed in the literature for the community as a whole. This study highlights the importance of the evaluation of SLA in understories, as an indicator of the successional stage of communities.

A área foliar específica (SLA) tem sido relacionada a distúrbios ambientais, apresentando uma correlação positiva entre a intensidade de perturbação e a SLA da comunidade vegetal. Estes estudos, no entanto, avaliaram as respostas da comunidade vegetal como um todo, negligenciando os atributos por espécies, tais como a posição vertical no estrato florestal. Considerando a importância da SLA para entender os processos ecológicos das florestas, este estudo teve como objetivo determinar a influência do regime de perturbação na SLA de espécies de sub-bosque, cuja hipótese é que, ao contrário de comunidades como um todo, um aumento na intensidade de perturbação implica na diminuição da SLA de espécies de sub-bosque. Este estudo foi realizado em nove sub-bosque de florestas estacionais no Brasil. As espécies mais abundantes foram selecionados e suas SLA foram avaliadas. A variabilidade de SLA entre as populações em diferentes florestas foi analisada pelo teste t de Student. O SLA dos sub-bosque (SLAu) também foi comparado por uma adaptação do índice de média ponderada da comunidade. A comparação de SLA das espécies mostraram diferenças significativas entre as populações de sub-bosque sob um regime de distúrbios diferentes, mostrando um decréscimo na SLA com um aumento na intensidade de perturbação. Resultados semelhantes foram encontrados para o SLA dos sub-bosque (SLAu), corroborando nossa hipótese. A correlação entre a redução no SLA espécies e SLA do sub-bosque com um aumento na intensidade de perturbação contradiz a tendência observada na literatura para a comunidade como um todo. Este estudo destaca a importância da avaliação de SLA em sub-bosque, como um indicador do estágio sucessional das comunidades.

Células-tronco mononucleares associadas ao plasma rico em plaquetas na consolidação de falha óssea no cão. Estudo piloto / Mononuclear stem cells associated with platelet-rich plasma in the consolidation of bone defects in dogs. A pilot study

A padronização de técnicas e o teste da associação do Plasma Rico em Plaquetas (PRP) e das Células-Tronco Mononucleares (CTMs) na consolidação de falhas ósseas corticais, por meio de avaliação clínica, biomecânica, radiológica e histológica, é avaliada em um estudo piloto. Foram utilizados seis cães adultos, fêmeas, sem raça definida, pesando entre 5 e 10kg, separados por sorteio aleatório em seis tratamentos. Foi confeccionada uma falha elíptica de 1,0x0,4cm na cortical medial diafisária da tíbia direita de cada animal, sendo preenchida de acordo com o tratamento proposto. No cão I, a falha foi preenchida com solução fisiológica (SF); no II, com o PRP; no III, com a fração total das células mononucleares (FTCM); no IV, com a fração vascular estromal (FVE); no V, com o PRP associado à FTCM; no VI, com a associação PRP e FVE. Foram realizadas avaliações: clínicas, diariamente; dos graus de claudicação, semanalmente; radiológica e perimetria da coxa, antes, no pós-operatório imediato, aos 7, 14, 21 e 30 dias; biomecânica, antes do procedimento, aos 10, 20 e 30 dias; e biópsias, aos 15 e 30 dias. A FTCM obteve uma contagem e viabilidade média de 2,0x108cél. e 90%, respectivamente, enquanto a FVE obteve 3x106cél. e 50%. O PRP concentrou, em média, sete vezes o número inicial de plaquetas do sangue total, de 250.000 µl-1 plaquetas no sangue total para 1.750.000 µl-1 plaquetas no PRP. Obteve-se padronização adequada de técnicas, possibilitando o teste da associação entre as células-tronco mononucleares (CTMs) e o plasma rico em plaquetas (PRP), assim como seu uso isolado, no reparo de falhas ósseas corticais, indicando a possibilidade de a associação FTCM e PRP ser o melhor tratamento...

The standardization of techniques and tests of the association of Platelet Rich Plasma (PRP) and Mononuclear Stem Cells (MSCs) in the consolidation of cortical bone defects by clinical, biomechanical, radiological, and histological analysis is evaluated in a pilot study. Six adult female dogs of mixed breed, weighing between 5 and 10kg, separated by random draw in six treatments were used. An elliptical failure of 1.0 x0.4cm was done in the medial diaphyseal cortical of the right tibia of each animal, that was filled according with the proposed treatment. In dog I, the failure was filled with saline (S), in dog II with PRP, in dog III with total mononuclear cell fraction (TMCF), in dog IV with stromal vascular fraction (SVF), in dog V with association of PRP and TMCF, and in dog VI with an association of PRP and SVF. Daily clinical evaluation, weekly degrees of lameness, radiological and girth before, immediate postoperative, 7, 14, 21 and 30 days, biomechanics before the procedure, at 10, 20 and 30 days, and biopsies at 15 and 30 days were performed. The TMCF got a count and viability of 2,0x108cells and 90% respectively, while for SVF it was 3x106cells and 50%, respectively. The PRP concentrated on average seven times the original number of platelets from whole blood, platelets from whole blood 250.000 μl-1 to 1.750.000 μl-1 platelets in PRP. This afforded adequate standardization of techniques, enabling the test of association between mononuclear stem cells (MSCs) and platelet-rich plasma(PRP), as well as their separate use to repair cortical bone defects, indicating the possibility of the association between FTCM and PRP to be the best treatment...

Cardiorespiratory fitness, pulmonary function and C-reactive protein levels in nonsmoking individuals with diabetes

The objective of this study was to evaluate cardiorespiratory fitness and pulmonary function and the relationship with metabolic variables and C-reactive protein (CRP) plasma levels in individuals with diabetes mellitus (DM). Nineteen men with diabetes and 19 age- and gender-matched control subjects were studied. All individuals were given incremental cardiopulmonary exercise and pulmonary function tests. In the exercise test, maximal workload (158.3±22.3 vs 135.1±25.2, P=0.005), peak heart rate (HRpeak: 149±12 vs 139±10, P=0.009), peak oxygen uptake (VO2peak: 24.2±3.2 vs 18.9±2.8, P<0.001), and anaerobic threshold (VO2VT: 14.1±3.4 vs 12.2±2.2, P=0.04) were significantly lower in individuals with diabetes than in control subjects. Pulmonary function test parameters, blood pressure, lipid profile (triglycerides, HDL, LDL, and total cholesterol), and CRP plasma levels were not different in control subjects and individuals with DM. No correlations were observed between hemoglobin A1C (HbA1c), CRP and pulmonary function test and cardiopulmonary exercise test performance. In conclusion, the results demonstrate that nonsmoking individuals with DM have decreased cardiorespiratory fitness that is not correlated with resting pulmonary function parameters, HbA1c, and CRP plasma levels.

Fração total de células mononucleares intra-articular em cães submetidos à reconstrução do ligamento cruzado / Total fraction of mononuclear intra-articular cells in dogs undergoing cruciate ligament reconstruction

Avaliou-sea ação da fração total de células mononucleares autógenas da medula óssea (FCMO) por aplicação intra-articular, após a correção cirúrgica do ligamento cruzado rompido. Foram utilizados 20 cães, os quais sofreram desmotomia do ligamento cruzado cranial e caudal unilaterais, 21 dias antes do reparo cirúrgico. Dez animais receberam as células autógenas no momento da correção. As avaliações se deram por estudo radiográfico, exames clínicos e biópsias aos 50 e 90 dias pós-operatórios. O grupo que recebeu a FCMO apresentou crescimento ósseo intra-articular ao estudo radiográfico, contudo os 20 animais apresentaram célulasCD34 positivas em suas amostras biopsiadas, indicando haver presença de células-tronco em ambos os grupos. Conclui-se que,para o modelo experimental proposto, não se recomenda o uso da fração total de células mononucleares e que trabalhos experimentais com o uso de células-tronco nas articulações devem evitar modelos cujo foco de lesão mantenha contato direto com a medula óssea.

This study was performed to evaluate the action of the fraction of total mononuclear cells from the bone marrow (FCMO) applied intra-articularly after the surgical repair of an experimentally ruptured cruciate ligament. Twenty dogs which suffered one-sided cruciate desmotomy of the cranial and caudal cruciate ligament 21 days before the correction were used. Ten animals received the FCMO at the time of correction. The assessments were done through X-ray and clinical examinations, and biopsies at 50 and 90 days postoperatively. It was concluded that there was no clinical difference between the two groups until 90 days of evaluation. The group that received FCMO grew intra-articular bone shown on the X-ray study. All twenty animals, however, presented cells marked with CD34 antibodies on their biopsy samples, indicating the presence of stem cells in both groups. It is concluded thatfor theexperimental model, it is not recommended to use the mononuclear cell fraction,andin experimental studies with the use of stem cells in the joints models whose focus of injury keep direct contact with the bone marrow should be avoided.

Cardiac autonomic modulation during progressive upper limb exercise by patients with coronary artery disease

The purpose of this study was to investigate the behavior of heart rate (HR) and HR variability (HRV) during different loads of resistance exercise (incline bench press) in patients with coronary artery disease (CAD) and healthy sedentary controls. Ten healthy men (65 ± 1.2 years, control group, CG) and 10 men with clinically stable CAD (66 ± 2.4 years, CADG) were recruited. A discontinuous progressive protocol was applied with an initial load of 10 percent of the maximum load achieved in the 1RM (1 repetition maximum) with increases of 10 percent until 30 percent 1RM was reached, which was followed by subsequent increases of 5 percent 1RM until exhaustion. HRV was analyzed by linear and non-linear methods. There was a significant reduction in rMSSD (CG: 20 ± 2 to 11 ± 3 ms; CADG: 19 ± 3 to 9 ± 1 ms) and SD1 indexes (CG: 14 ± 2 to 8 ± 1 ms; CADG: 14 ± 2 to 7 ± 1 ms). An increase in HR (CG: 69 ± 5 to 90 ± 5 bpm; CADG: 62 ± 4 to 75 ± 4 bpm) and in systolic blood pressure (CG: 124 ± 3 to 138 ± 3 mmHg; CADG: 122 ± 6 to 126 ± 9 bpm) were observed (P < 0.05) when comparing pre-effort rest and 40 percent 1RM in both groups. Furthermore, an increase in RMSM index was also observed (CG: 28 ± 3 to 45 ± 9 ms; CADG: 22 ± 2 to 79 ± 33 ms), with higher values in CADG. We conclude that loads up to 30 percent 1RM during incline bench press result in depressed vagal modulation in both groups, although only stable CAD patients presented sympathetic overactivity at 20 percent 1RM upper limb exercise.

Peroxidação lipídica em ratos tratados com sulfato de vincristina e decanoato de nandrolona / Lipid peroxidation in rats treated with vincristine sulphate and nandrolone decanoate

Brain and serum lipid peroxidation was studied in rats treated with vincristine sulphate and different doses of nandrolone decanoate. Thirty rats were distributed into six groups (n=5). The treatments were applied once a week for two weeks. Sample collection was performed in the third week. Treatments during the first week were: G1 (control) - physiologic solution, G2 - vincristine sulphate (4mg/m²), G3 - physiologic solution, G4 - physiologic solution, G5- vincristine sulphate (4mg/m²), and G6 - vincristine sulphate (4mg/m²). In the second week, they were: G1 (control) - physiologic solution, G2- physiologic solution, G3 - nandrolone decanoate (1.8mg/kg-1), G4 - nandrolone decanoate (10mg/kg-1), G5 - nandrolone decanoate (1.8mg/kg-1), and G6 - nandrolone decanoate (10mg/kg-1). Lipid peroxidation increased with the isolated use of vincristine and nandrolone decanoate, and with vincristine associated to the highest dose of the ester as well. These results suggest that vincristine sulphate and nandrolone decanoate increase free radical production. Therapeutic dose of nandrolone decanoate when associated with vincristine sulphate proved to be beneficial, as it was able to protect the organism from damaging processes involved in free radical production.

Este estudo teve por objetivo detectar a peroxidação lipídica presente no cérebro e no soro de ratos tratados com sulfato de vincristina e diferentes doses de decanoato de nandrolona. Trinta ratos foram distribuídos em seis grupos (n=5). Os tratamentos foram aplicados uma vez por semana, durante duas semanas, e a coleta de amostras foi realizada na terceira semana. Na primeira semana, os tratamentos consistiram de: G1(controle) - solução fisiológica; G2 - sulfato de vincristina (4mg/m 2 ); G3 - solução fisiológica; G4 - solução fisiológica; G5 - sulfato de vincristina (4mg/m 2 ) e G6 - sulfato de vincristina (4mg/m 2 ). Na segunda semana: G1(controle) - solução fisiológica; G2 - solução fisiológica; G3 - decanoato de nandrolona (1.8mg/kg-1 ); G4 - decanoato de nandrolona (10mg/kg-1 ); G5 - decanoato de nandrolona (1.8mg/kg-1 ) e G6 - decanoato de nandrolona (10mg/kg-1 ). A peroxidação lipídica aumentou com o uso isolado tanto da vincristina quanto do decanoato de nandrolona e com a associação da vincristina à dose mais alta do éster. Estes resultados sugerem que o sulfato de vincristina e o decanoato de nandrolona aumentam a produção de radicais livres. A dose terapêutica do decanoato de nandrolona, quando associada ao sulfato de vincristina, provou ser benéfica, já que foi capaz de proteger o organismo dos processos prejudiciais induzidos pela produção de radicais livres.

Ocorrência de anticorpos anti-neospora spp. em cavalos de carroça e equinos da raça crioula no estado do Rio Grande do Sul / Occurrence of antibodies anti-neospora spp. in cart horses and crioula breed horses from Rio Grande do Sul state

O objetivo deste estudo foi avaliar a frequência de detecção de anticorpos contra Neospora spp. em cavalos de carroça e em cavalos da raça Crioula. Para tal, 214 amostras de soro foram coletadas e analisadas pela técnica de imunofluorescência indireta, das quais 91 eram de cavalos de carroça e 123 de cavalos da raça Crioula, todas provenientes da região central do Rio Grande do Sul. As frequências de anticorpos detectadas foram: 15,9 por cento (34/214) na população total estudada, 15,4 por cento (14/91) nos cavalos de carroça e 16,3 por cento (20/123) nos cavalos da raça Crioula. Estes resultados sugerem que a infecção por Neospora spp. está presente igualmente nas duas populaç ões. Assim, devido à importância e ao padrão da patogênese da neosporose em equinos, Neospora spp. deve ser incluído no diagnóstico de problemas reprodutivos em éguas e em casos de problemas neurológicos em equinos.

Ostrich (Struthio camelus) gastric diseases in Minas Gerais, Brazil, from 1997 to 2009 / Doenças gástricas de avestruzes em Minas Gerais

Descrevem-se as doenças gástricas de avestruzes diagnosticadas em um Laboratório de Doenças das Aves, Belo Horizonte-MG, entre 1997 e 2009. As afecções gástricas corresponderam a 46,2% de todos os casos de doença, com quadros que incluíram impactação (83,3%), infecções e parasitoses (16,7%). As impactações foram causadas por material não alimentar diversificado e as infecções e parasitoses incluíram o fungo Macrorhabdus ornithogaster (megabacteria) e o nematódeo Libyostrongylus douglassii.

Flora fúngica no ambiente da Unidade de Terapia Intensiva Pediátrica e Neonatal em hospital terciário / Environmental fungal flora in Pediatric and Neonatal Intensive Care Units at a tertiary hospital

OBJETIVO: As infecções nosocomiais são responsáveis por morbidade e mortalidade significativas no período neonatal. Considerando-se a preocupação com a qualidade do ar de áreas críticas como Unidades de Terapia Intensiva (UTI), foi realizado um levantamento da flora fúngica das UTI Pediátrica e Neonatal do Hospital das Clínicas Samuel Libânio, Pouso Alegre (MG), com a finalidade de identificar a presença de fungos potencialmente patogênicos e oportunistas. MÉTODOS: Foram realizadas 30 coletas, que incluíram leitos, incubadoras, janelas, aparelhos de ar condicionado, telefone, estetoscópios, portas e maçanetas. Placas de Agar Sabouraud Dextrose com o material das coletas foram incubadas em temperatura ambiente por 15 dias. A identificação foi baseada nas características macroscópicas no exame direto e em microcultivos. RESULTADOS: Fungos potencialmente patogênicos e toxigênicos foram isolados. A análise quantitativa das colônias revelou a presença de 11 gêneros. Verificou-se que mais de 40 por cento das colônias correspondem ao gênero Penicillium spp, seguido por Cladosporium spp e Chrysosporium spp. CONCLUSÕES: Os fungos encontrados podem apresentar grande potencial de patogenicidade, principalmente em imunodeprimidos. É importante adotar medidas de controle ambiental, como assepsia dos equipamentos, controle da presença de visitantes, lavagem das mãos pelos funcionários e troca de filtros de ar condicionado.

OBJECTIVE: Nosocomial infections lead to significant morbidity and mortality in the neonatal period. Considering the concern regarding air quality in critical hospital areas, such as Intensive Care Units (ICU), this study aims to identify the presence of potentially pathological fungi in the Pediatric and Neonatal Intensive Care Unit of the Samuel Libânio Hospital in Pouso Alegre, Minas Gerais, Brazil. METHODS: Thirty samples were collected in the following areas: surface of beds, incubators, windows, air conditioning, telephones, stethoscopes, doors and door knobs. Petri dishes of Sabouraud Dextrose Agar with the collected samples were incubated at air temperature for 15 days. The identification was based on macroscopic and microscopic characteristics and subcultures. RESULTS: Potentially pathological and toxigenic fungi were isolated in the studied areas. The quantitative analysis revealed the presence of 11 genera: 40 percent of the colonies were Penicillium spp., followed by Cladosporium spp. and Chrysosporium spp. CONCLUSIONS: The fungi found may present a great pathogenic potential, mainly in immunocompromised patients. It is important to adopt some measures in order to reduce nosocomial infection in ICU, such as the strict control regarding equipment cleansing, control of visitors, hand washing and periodic cleansing and renewal of air conditioning filters.

Influência da frequência estimulatória envolvida nos efeitos analgésicos induzidos por eletroacupuntura em cervicalgia tensional / Influence of the stimulating frequency involved in analgesic effects induced by electroacupuncture for neck pain due to muscular tension

Objetivo: Avaliar a influência da frequência estimulatória envolvida na analgesia induzida por eletroacupuntura em cervicalgia. Métodos: Comparou-se o desempenho da analgesia produzida em 2Hz, 100Hz, 1000Hz, 2500Hz e um grupo só com acupuntura, sem estímulo elétrico, avaliado por meio de algometria de pressão, Escala Visual Analógica (EVA) e frequência cardíaca. Utilizou-se um estimulador elétrico microprocessado, com forma de pulso em padrão pulsado, monofásico, retangular, balanceado assimétrico, comfase secundária em exponencial decrescente, com período de estimulação de 4 segundos e repouso de 3 segundos. A amostra contou com 66 voluntários com cervicalgia tensional, idade média de 33,67±9,97 anos, 89,5% do gênero feminino e 10,5% do masculino. Resultados: Não houve diferenças entre os grupos para as variáveis nota atribuída à dor pela EVA e frequência cardíaca, sendo que em todos os grupos houve melhoras analgésicas. No entanto, quando comparado o comportamento antes-depois, por meio da algometria de pressão, para um mesmo indivíduo, dentro de seu próprio grupo, houve vantagens analgésicas para o uso de 2500Hz (p=0,006 para a base da região occiptal; p=0,003 para o trapézio direito; e p=0,013 para o trapézio esquerdo), seguido de 100Hz(p=0,035, p=0,016 e p=0,038, para as mesmas regiões, respectivamente). Conclusão: Recomenda-se preferencialmente a aplicação de 2500Hz e 100Hz em eletroacupuntura para analgesia em cervicalgia tensional.

Objective: To assess the influence of the stimulating frequency involved in analgesia induced by electroacupuncture for neck pain. Methods: The performance of the analgesia produced by 2Hz, 100Hz, 1000Hz and 2500Hz was compared with a group withacupuncture alone (without electrical stimulation), by means of pressure algometry, a visual analog scale (VAS) and heart rate. We used an electrical stimulator with a microprocessor yielding standard, single-phase, rectangular and asymmetrical balanced pulsed waveforms with a secondary phase decreasing exponentially. Stimulation periods were 4s, and resting periods were 3s. The sample included 66 volunteers with neck pain due to muscular tension, mean age 33.67±9.97 years, 89.5% female and 10.5% male. Results: There were no differences between the groups regarding the variables of degree of pain (according to the VAS) and heart rate, and all groups presented analgesic improvement. However, when comparing pressure algometry findings for the same individual before and after the treatment, within the same group, we found analgesic advantages in using 2500Hz (p=0.006 for the base of the occipital region, p=0.003 for the right trapezius and p=0.013 for the left trapezius), followed by 100Hz (p=0.035, p=0.016 and p=0.038 for thesame regions, respectively). Conclusion: We preferentially recommend 2500Hz and 100Hz applications of electroacupuncture for analgesia of neck pain due to muscular tension.

Membranas de látex natural na herniorrafia diafragmática experimental em cães / Natural latex membranes in experimental diaphragmatic hernioplasty in dogs

Utilizaram-se membranas de látex para o reparo de defeitos diafragmáticos em 12 cães, distribuídos em três grupos: no G1 utilizou-se membrana comercial e no G2, membrana experimental. O G3 foi usado como controle. Foi feito um defeito retangular no músculo diafragma, com 4cm de comprimento por 3cm de largura, que nos grupos G1 e G2 foi substituído pelo implante da membrana de látex correspondente. Os animais foram avaliados por estudo radiográfico, hemograma, videocirurgia e análise histológica. Os resultados mostraram que a membrana de látex do grupo 2 foi eficiente na correção de defeito no diafragma, promovendo a reparação e neovascularização tecidual local, sem causar rejeição durante o período de avaliação.

Latex membranes were experimentally used to repair diaphragmatic defects in 12 dogs, distributed in 3 groups. In group 1, a commercial membrane was used, and in group 2, an experimental membrane. Group 3, animals were used as control. A rectangular defect (4cm in length and 3cm in width) was surgically performed in the diaphragm muscle, which was substituted, in group 1 and 2, by the implantation of corresponding latex membrane. The animals were evaluated by radiography, blood count, video-surgery, and histologic study. Results showed that the latex membrane of group 2, were efficient in the correction of the defect in the diaphragm, promoting the repairing and local neovascularization, without causing rejection during the evaluated period.

A new species of pentastomida infecting Tropidurus hispidus (Squamata: Tropiduridae) from Caatinga in Northeastern Brazil

This article describes a new species of Brazilian Raillietiella Sambon, 1910 from lungs of Tropidurus hispidus (Spix, 1825). Between July and October 2005 eighteen specimens of T. hispidus were actively captured with elastic rubber slings in granite outcrops (lajeiros) (06° 59’ S and 39° 31’ W) from caatinga formations in the municipality of Farias Brito, State of Ceará, Northeastern Brazil. One female and one male of T. hispidus had lungs infected by Raillietiella mottae sp. nov. (prevalence 11.1 percent and mean intensity of infection 6.0 ± 1.4, range 5-7). The parasite’s main diagnostic characteristics include the dimensions of sharp hooks and strongly curved or "C-shaped" male copulatory spicules with knob-like posterior projection from the base towards the inner curvature of the spicule.

Este artigo descreve uma nova espécie de Raillietiella Sambon, 1910 a partir dos pulmões de Tropidurus hispidus (Spix, 1825). Entre julho a outubro de 2005, dezoito espécimes de T. hispidus foram coletados ativamente usando-se estilingues em formações rochosas (lajeiros) (06° 59’S e 39° 31’W) no domínio da caatinga no município de Farias Brito, estado do Ceará, nordeste do Brasil. Uma fêmea e um macho de T. hispidus tinham seus pulmões infectados por Raillietiella mottae sp. nov. (prevalência 11,1 por cento e intensidade média de infecção 6,0 ± 1,4, amplitude 5-7). As principais características diagnósticas dos parasitas incluem as dimensões dos ganchos com ponta aguda e as espículas copulatórias curvadas ou "em forma de C", com base posterior em forma de maçaneta, cuja parte distal é direcionada para o interior da curvatura da espícula.

Estimulação elétrica neuromuscular em cães com atrofia muscular induzida / Neuromuscular electric stimulation in dogs with induced muscle atrophy

Empregou-se a estimulação elétrica neuromuscular (EENM) de baixa freqüência no músculo quadríceps femoral de cães com atrofia induzida e avaliou-se a ocorrência de ganho de massa nessa musculatura. Foram utilizados oito cães com pesos entre 15 e 30kg, distribuídos aleatoriamente em dois grupos denominados de I ou controle e II ou tratado. A articulação femorotibiopatelar esquerda foi imobilizada por 30 dias pelo método de transfixação percutânea tipo II, com retirada de aparelho de imobilização após esse período. Decorridas 48 horas da remoção, foi realizada a EENM nos cães do grupo II, cinco vezes por semana, com intervalo de 24 horas cada sessão, pelo período de 60 dias. Foram avaliadas a circunferência da coxa, a goniometria do joelho, a análise clínica da marcha, as enzimas creatina-quinase (CK) e aspartato-amino-transferase (AST) e a morfometria das fibras musculares em cortes transversais do músculo vasto lateral colhido mediante biópsia muscular. A EENM foi empregada no músculo quadríceps femoral na freqüência de 50Hz, duração de pulso de 300 milisegundos e relação de tempo on/off de 1:2. Quanto à morfometria das fibras do músculo vasto lateral, no grupo tratado houve aumento significativo (P<0,05) da área transversal aos 90 dias em relação ao dia zero. A EENM de baixa freqüência ocasiona hipertrofia do músculo vasto lateral em cães após a imobilização rígida temporária da articulação do joelho.

Low frequency neuromuscular electrical stimulation (NMES) was used on the femoral quadriceps of dogs with induced muscular atrophy and the occurrence of gain in mass in these muscles was evaluated. Eight dogs from 15 to 30kg were randomly distributed in two groups named I, or control; and II, or treated. For the induction of muscular atrophy, the left femoral-tibial-patellar joint was immobilized for 30 days by percutaneous transfixation type II. After 30 days, the immobilization device was removed. The NMES treatment began 48 hours after the removal of the immobilization device of the dogs of group II, and it was carried out five times per week with an interval of 24 hours between each session, for 60 days. The following parameters were measured: thigh circumference, goniometry of the knee, clinical gait analysis, creatine kinase (CK) and aspartate aminotransferase (AST) enzymes, and morphometry of the muscular fibers in transversal cuts of the vastus lateralis muscle collected through muscular biopsy. The NMES was applied on the femoral quadriceps at a frequency of 50 Hz, with pulse duration of 300 milliseconds, and the on/off time was at a proportion of 1:2. Regarding the morphometry of the vastus lateralis fibers, a significant increase (P<0.05) in the transversal area of the treated group at 90 days was observed when compared with that identified at the time of immobilization. Thus, it can be concluded that low frequency NMES brings about hypertrophy of the vastus lateralis muscle in dogs after temporary rigid immobilization of the knee joint.