Detección de ADN de Trypanosoma cruzi en la placenta y fetos de ratones con infecciones chagásica aguda / Deteccion of Trypanosoma cruzi DNA in the placenta and fetuses of mice with chagasic acute infection

El objetivo del presente estudio consistió en detectar la presencia de ADN de Trypanosoma cruzi en la placenta y tejidos de fetos provenientes de ratones (Mus musculus) NMRI inoculadas con 22 × 103 tripomastigotes metacíclicos de la cepa M/HOM/BRA/53/Y por vía intraperitoneal. Los ratones hembras fueron preñadas durante la fase aguda de la infección. El curso de la parasitemia patente por T. cruzi fue evaluada antes del apareamiento y durante el periodo de gestación. A los veinte días de gestación los animales fueron sacrificados y los fetos con sus placentas fueron removidos para evaluar la infección por T. cruzi. Las muestras de placenta, corazón y músculo esquelético fetal fueron fijadas en formalina neutra al 10%, incluidas en parafina y coloreadas con hematoxilina y eosina (HE). El estudio histopatológico de los tejidos fetales reveló la presencia de infiltrado inflamatorio de células mononucleares y polimorfonucleares y sin parasitismo tisular. La amplificación del ADN de T. cruzi por la reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) demostró reacción positiva en el 18% de las placentas de los ratones hembras infectadas preñadas. Las muestras de corazón y músculo esquelético de los fetos provenientes de madres infectadas con T. cruzi no mostraron la presencia de ADN del parásito. Los cortes de placenta y de músculo esquelético analizados por inmunotinción con Peroxidasa anti Peroxidasa mostraron antígeno de T. cruzi en esos tejidos. Los resultados obtenidos por PCR en los tejidos fetales pudieran relacionarse con la virulencia y tropismo asociados con las características biológicas y genética de la cepa de T. cruzi, utilizada en la infección experimental de los ratones hembras.

The objective of the present study was to detect the presence of Trypanosoma cruzi DNA in the placenta and fetal tissues of NMRI mice (Mus musculus) inoculated with 22 × 103 trypomastigotes metacyclic of the M/HOM/BRA/53/Y strain by intraperitoneal route. Mice were pregnant in the acute phase of the infection. The course of patent parasitemia by T. cruzi was evaluated before mating and during pregnancy. At day twenty of gestation, animals were sacrificed and the fetuses and their placentas were removed to evaluate T. cruzi infection. Samples of fetal placenta, heart and skeletal muscle were fixed in 10%, formalin, included in paraffin and stained with hematoxilin and eosin (HE). The histopathological study of sections of fetal tissues revealed inflammatory infiltrates with mononuclear and polymorphonuclear cells and without parasitism in these tissues. The amplification of T. cruzi DNA by Polymerase Chain Reaction (PCR) showed a positive reaction in 18% of placental tissue of pregnant infected mice. The samples of heart and skeletal muscle of the fetuses of mothers infected with T. cruzi did not show the presence T. cruzi DNA. The placenta and skeletal muscle of the fetuses analyzed by Peroxidase anti Peroxidase inmunostaining showed T. cruzi antigens in those tissues. Negative results by PCR in fetal tissues might be related with the virulence and tropism associated with the biological and genetic characteristic Of the T. cruzi strain used in the experimental infection of female mice.

Transmisión vertical de Trypanosoma cruzi en ratas wistar durante la fase aguda de la infección / Vertical transmision of trypanosoma cruzi in wistar rats during the acute phase of infection

Ratas Wistar fueron inoculadas antes del apareamiento con 1x10 a la 4 tripomastigotes metacílclicos de las cepas de T.cruzi perro (Pr) y humano (YBM). La infección de las madres y crías fue evaluada mediante un estudio parasitológico, inmunológico e histopatológico. Como controles se utilizaron ratas sanas gestantes. Las ratas madres desarrollaron parasitemias entre los 18 y 45 días post-inoculación (pi), y cuatro machos (9,1 por ciento) de madres infectadas con la cepa Pr mostraron altas parasitemias (432 y 240 trips/mm³ de sangre) a los 30 y 40 días de nacidas. Las 40 restantes y las 52 crías de ratas infectadas con la cepa YBM resultaron negativas al examen de sangre, hemocultivos y xenodiagnósticos. Los niveles de anticuerpos anto-T.cruzi en lso sueros de las madres fueron siempre mayores que los detectados en las 44/92 (47,8 por ciento) crías. En las muestras de líquido amniótico, no se observaron tripomastigotes. El estudio histopatológico del corazon y músculo esquelético de madres infectadas y crías con infección congénita reveló establecimiento de una miocarditis y miositis aguda de variable intestinal y extensión, caracterizada por abundante infiltrado linfoplasmohistiocitario asociado en algunos casos con nidos de amastigotes. Las placentas presentaron un moderado infiltrado celular sin parásitos en el estroma vascular. Las crías de madres chagasicas reinoculadas mostraron niveles de parasitemia significativamente menores (p<0,05) que las detectadas en las crías infectadas de madres sanas; a los 60 días pi se evidenció en ambos grupos una miocarditis y miositis con características de cronicidad. Los resultados demuestran de manera evidente que T.cruzi es transmitido verticalmente en la rata Wistar a un número reducido de crías; que los anticuerpos maternos anti-T.cruzi pueden pasar de la madre y modular la respuesta inmunológica de la progenie; que la patogenicidad de las cepas de T.cruzi juega un papel importante en la transmisión congénita, independientemente del origen y de la región geográfica.

Detección de leishmania (viannia) braziliensis en el endotelio vascular de lesiones de pacientes con leishmaniasis cutánea localizada / Detection of leishmania (viannia) braziliensis in vascular endothelium lesions of patients with localized cutaneous leishmaniasis

En el presente estudio se analizaron las lesiones dérmicas de 8 pacientes con leishmaniasis cutánea (LC), procedentes de caseríos ubicados en las cercanías de las cuencas de los ríos Chama-Mocotíes del estado Mérida, Venezuela. Las lesiones de los pacientes fueron diagnósticadas de acuerdo al criterio clínico, parasitológico e inmunoquímico. Los parásitos de las lesiones cutáneas fueron identificados por la reacción por cadena de la polimerasa (PGR) como Leishmania (Viannia) braziliensis. Histopatológicamente, las lesiones mostraron infiltrado inflamatorio de células mononucleares y polimorfonucleares. En la dermis se observaron reacciones granulomatosas y amastigotos. Los cortes histológicos de una de las lesiones del paciente N°5 mostraron vasos sanguíneos morfológicamente afectados con antígeno de Leishmania en la superficie endotetial, vasos dilatados con parásitos en su luz y células mononucleares. El frotis de la misma lesión cutánea mostró amastigotos en el citoplasma de neutrófilos. Las reacciones de inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoperoxidasa indirecta (PAP) realizadas sobre estas lesiones, revelaron amastigotos y material antigénico adsorbido sobre las paredes de los vasos sanguíneos, así como amastigoto libres en la luz de los vasos sanguíneos dérmicos. Basados en estos resultados, se concluye que en la piel de algunas lesiones cutáneas, es posible reconocer la presencia de los parásitos tanto intracelulares como extracelulares, en estrecho contacto con los vasos sanguíneos dérmicos y libres en la luz capilar, lo que favorecería el desplazamiento del parásito por vía sanguínea. Este proceso determinaría la posibilidad de producir infecciones secundarias y la propagación de la infección en las áreas endérmicas de Leishmaniasis, donde el parásito circula los reservorios domésticos y silvestres, los insectos vectores y el hombre que viven en esas áreas

Dilatación del tracto digestivo de ratones infectados con trypanosoma cruzi / Digestive tract dilatation of mice infected with trypanosoma cruzi

En este trabajo, analizamos las alteraciones del tracto digestivo (TD) de ratones con infección chagásica crónica, producida por trypanosoma cruzi de diferente orígen. El examen radiológico del TD de 18 ratones infectados con T. cruzi y de 6 ratones controles no infectados, fue analizado después de la ingestión de una solución acuosa de sulfato de bario durante 6 horas. A los 120 días post-infección (pi), las radiografías del TD de los 5 ratones del grupo 1A infectados con tripanosomas del aislado DmI provenientes de didelphis marsupialis, y 4 ratones del grupo 2A infectados con el aislado EP de un paciente con enfermedad de chagas aguda, mostraron dilatación del estómago y del colon (C). A los 180 días pi las radiografías del TD de los 5 ratones del grupo 1B infectados con el aislado DmI y de los 4 ratones del grupo 2B infectados con el aislado EP mostraron una mayor dilatación del C. El análisis histológico del TD de todos los ratones infectados, reveló apreciable alteración en las capas musculares intestinales, tales como adelgazamiento de las capas musculares y mucosa, la pérdida de los pliegues y de los plexos mioentéricos. Basados en estos resultados podemos concluir que dos poblaciones de T. cruzi produjeron severas alteraciones digestivas en el modelo murino experimental utlizado y por otro lado, es posible que tales alteraciones pudieran presentarse en los órganos del sistema digestivo de casos humanos, especialmente en aquellos que viven en las diferentes áreas endémicas, donde tales alteraciones no han sido reportadas

Effect of intralesional treatment with lidocaine and glucantime in hamsters infected with leishmania (viannia) braziliensis

Se estudia comparativamente el efec por vía intralesional de la lidocaina y el glucantime sobre lesionesde hámsteres experimentalmente infectados con leishmania (viannia) braziliensis. Los resultados revelan que todos los fármacos ensayado reducen significativamente (p<0,001) los tamaños promedios de las lesiones de los animales experimentales en comparac