Simultaneous determination of mycotoxins in peruvian purple maize / Determinação simultânea de micotoxinas em milho roxo peruano

ABSTRACT: Purple maize is an important foodstuff for the Peruvian people. Its unique nutritional and antioxidant characteristics makes it widely exported to other countries. However, when contaminated by fungi, it can trigger numerous health problems in the consumers. This study aimed to evaluate the presence of 27 mycotoxins in 63 samples of purple maize collected in Peru. Frequency of occurrence and mean concentration of the following mycotoxins were determined: alternariolmetileter (AME), alternariol (AOH), tentoxin, neosolaniol, nivalenol, wortmannin, deoxynivalenol, 3-acetyl deoxynivalenol, 15-acetyl deoxynivalenol, zearalenone, aflatoxin B1, aflatoxin B2, aflatoxin G1, aflatoxin G2, fumonisin B1, fumonisin B2, fumonisin B3, ochratoxin A, ochratoxin α, T-2 toxin, HT-2 toxin, fusarenon x, cyclopiazonic acid, gliotoxin, agroclavin and citreoviridin. The main mycotoxins reported in purple maize were AME and AOH, with a frequency of occurrence of 14.3 and 7.9%, and mean concentration of 23.3% and 1.8%, respectively. AME and AOH do not have guidance levels in the Brazilian legislation. Contrastingly, levels of mycotoxins which are within the standards of the country's regulations were below the limit of quantification. The present results suggested that purple maize is a raw material with a great potential for the production and industrialization of special products.

RESUMO: O milho roxo é um alimento importante para o povo peruano. Suas características nutricionais e antioxidantes únicas fazem com que seja amplamente exportado para outros países. No entanto, quando contaminado por fungos, pode desencadear inúmeros problemas de saúde nos consumidores. Este estudo teve como objetivo avaliar a presença de 27 micotoxinas em 63 amostras de milho roxo coletadas no Peru. A frequência de ocorrência e a concentração média das seguintes micotoxinas foram determinadas: alternariolmetileter (AME), alternariol (AOH), tentoxina, neosolaniol, nivalenol, wortmanina, desoxinivalenol, 3-acetil desoxinivalenol, 15-acetil desoxinivalenol, zearalenona, aflatoxina B1, aflatoxina B2 , aflatoxina G1, aflatoxina G2, fumonisina B1, fumonisina B2, fumonisina B3, ocratoxina A, ocratoxina, toxina T-2, toxina HT-2, fusarenona x, ácido ciclopiazonico, gliotoxina, agroclavina e citreoviridina. As principais micotoxinas encontradas no milho roxo foram AME e AOH, com frequência de ocorrência de 14,3% e 7,9% e concentração média de 23,3% e 1,8%, respectivamente. AME e AOH não possuem níveis de orientação na legislação brasileira. Contrastantemente, os níveis de micotoxinas que estão dentro dos padrões das regulamentações do país estavam abaixo do limite de quantificação. Os presentes resultados sugerem que o milho roxo é uma matéria-prima com grande potencial para a produção e industrialização de produtos especiais.

Mycological quality of pecan nuts from Brazil: absence of aflatoxigenic fungi and aflatoxins / Qualidade micológica de nozes pecan do Brasil: ausência de fungos aflatoxigênicos e aflatoxinas

ABSTRACT: In recent years, Brazil has encouraged the cultivation of pecans to meet both demands of domestic and international market of nuts. New genetic varieties of pecans have been selected in recent years, but available scientific information on the occurrence of fungi and aflatoxins in the international literature is out of date. Therefore, the present study aimed to quantify and identify fungal microbiota and the presence of aflatoxins in pecan nuts cultivated in southern Brazil. Fifty-two pecan nut lots (Barton variety) were obtained from producers from 19 cities of Rio Grande do Sul State and analyzed by direct plating in Agar Dichloran Glycerol 18% (DG18) and Aspergillus Flavus and Parasiticus Agar (AFPA), following incubation at 25 °C for 7 days. Aflatoxins analyses were carried out using HPLC coupled with a mass spectrometer. Results revealed at least 10 different genera of fungi. Aspergillus, Penicillium, Fusarium, and Cladosporium were predominant. Xerophilic species of Aspergillus (A. wentii, A. ruber, A. pseudoglaucus, and A. chevalieri) were commonly reported in the samples. No potential aflatoxin-producing species was isolated and no aflatoxins were detected (LOQ=1 μg/kg and LOD=0.1 μg/kg for AFB1 and AFB2, and 0.3 μg/kg for AFG1 and AFG2) in the evaluated samples. The absence of this carcinogenic group of mycotoxins is highly positive and could boost the investments in the sector, as well as stimulate the commercialization and consumption of this variety of nut.

RESUMO: Nos últimos anos, o Brasil tem incentivado o cultivo de pecãs para atender a demanda do mercado nacional e internacional de nozes. Novas variedades genéticas de pecãs foram selecionadas nos últimos anos, mas informações científicas disponíveis sobre a ocorrência de fungos e aflatoxinas na literatura internacional estão desatualizadas. Portanto, o presente estudo objetivou quantificar e identificar a microbiota fúngica e a presença de aflatoxinas em nozes cultivadas no sul do Brasil. Cinquenta e dois lotes de nozes (variedade Barton) foram obtidos de produtores de 19 municípios do Estado do Rio Grande do Sul e analisados ​​por meio de Ágar Dicloran Glicerol 18% (DG18) e Aspergillus Flavus e Parasiticus Agar (AFPA), após incubação em 25 °C durante 7 dias. Análises de aflatoxinas foram realizadas usando HPLC acoplado a um espectrômetro de massa. Os resultados revelaram pelo menos 10 gêneros diferentes de fungos. Aspergillus, Penicillium, Fusarium e Cladosporium foram predominantes. Espécies xerofílicas de Aspergillus (A. wentii, A. ruber, A. pseudoglaucus e A. chevalieri) foram comumente encontradas nas amostras. Nenhuma espécie potencial produtora de aflatoxinas foi isolada e nenhuma aflatoxina foi detectada (LOQ=1 μg/kg e LOD=0,1 μg/kg para AFB1 e AFB2; e 0,3 μg/kg para AFG1 e AFG2) nas amostras avaliadas. A ausência desse grupo carcinogênico de micotoxinas é altamente positiva e pode impulsionar os investimentos no setor, além de estimular a comercialização e o consumo dessa variedade de nozes.

Effect of Bacillus spp. on Aspergillus westerdijkiae growth, sporulation and ochratoxin A production in green-coffee medium

Abstract Aspergillus westerdijkiae is one of the most important spoilage and toxigenic fungi contaminating coffee beans and may produce ochratoxin A (OTA), a mycotoxin that characterize a health risk to the coffee consumers. Biological control strategies can be used for prevention of fungal invasion and decrease mycotoxin exposure. The aims of this study were to evaluate the in vitro effect of three Bacillus sp. biocontrol candidates on A. westerdijkiae mycelial growth, spore counts and OTA production. A green-coffee based medium was inoculated with A. westerdijkiae and Bacillus spp. (B. safensis RF69, B. amyloliquefaciens RP103 and B. subtilis RP242) and after incubation, the fungal growth, sporulation and mycotoxin production was evaluated. Mycelial growth rate was reduced in a range between 76-95% and conidial production was also significantly decreased. All isolates were capable of reducing OTA production in a range between 62-96%. The results showed that the biocontrol candidates may be an effective control method for A. westerdijkiae and OTA in coffee.

Deoxynivalenol in wheat and wheat products from a harvest affected by fusarium head blight

Abstract Fusarium head blight is an important disease occurring in wheat, caused mainly by the fungus Fusarium graminearum. In addition to direct damage to crops, reduced quality and yield losses, the infected grains can accumulate mycotoxins (toxic metabolites originating from prior fungal growth), especially deoxynivalenol (DON). Wheat crops harvested in 2014/2015 in southern Brazil were affected by high levels of Fusarium head blight. In this context, the aim of this study was evaluate the mycotoxicological quality of Brazilian wheat grains and wheat products (wheat flour and wheat bran for DON. DON contamination was evaluated in 1,504 wheat and wheat product samples produced in Brazil during 2014. It was determined by high performance liquid chromatograph fitted to a mass spectrometer (LC-MS / MS). The results showed that 1,000 (66.5%) out of the total samples tested were positive for DON. The mean level of sample contamination was 1047 µg.kg-1, but only 242 samples (16.1%) had contamination levels above the maximum permissible levels (MPL) - the maximum content allowed by current Brazilian regulation. As of 2017, MPL will be stricter. Thus, research should be conducted on DON contamination of wheat and wheat products, since wheat is a raw material widely used in the food industry, and DON can cause serious harm to public health.

Anesthetic activity of the essential oil of Ocimum americanum in Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard, 1824) and its effects on stress parameters

The aim of this study was to evaluate the anesthetic activity of the essential oil (EO) of Ocimum americanum L. in silver catfish (Rhamdia quelen ). In the first experiment, the depressor effects and chemical composition of the leaf EO (LEO) and inflorescence EO (IEO) were compared. Juveniles (n = 10) were placed in aquaria containing different concentrations of EO (25 - 500 mg L-1) to determine the point at which anesthesia was induced and the length of the recovery period. In the following experiment, the effects of 300 and 500 mg L-1 LEO exposure on stress parameters (plasma cortisol, glucose and sodium levels) after air exposure for 1 min were assayed. Fish (n = 10 per sampling time) were sampled immediately or transferred to anesthetic-free aquaria until sampling (15, 30, 60 or 240 min). LEO was composed mainly of β-linalool and 1,8-cineole in similar proportions, whereas IEO showed β-linalool as major compound. Anesthesia was obtained in silver catfish with 200-500 mg L-1 between 4-8 min for LEO and 6-16 min for IEO. Lower EO concentrations did not reach anesthetic stage up to 30 min. LEO used as anesthetic prevented the cortisol increase and sodium loss induced by aerial exposure. Glucose levels were raised in catfish exposed to LEO compared to basal group (not air exposed) in almost all observation times. EO of O. americanum obtained from leaves was considered suitable to anesthetic procedures due to its fast induction and handling-induced stress prevention.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade anestésica do óleo essencial (EO) de Ocimum americanum L. em jundiás (Rhamdia quelen ). No primeiro experimento, os efeitos depressores e a composição química dos óleos obtidos a partir das folhas (LEO) e das inflorescências (IEO) desta espécie vegetal foram comparados. Para isto, juvenis de jundiás (n = 10) foram transferidos para aquários contendo diferentes concentrações de EO (25 - 500 mg L-1) a fim de determinar os tempos de indução aos estágios de anestesia e de recuperação. No experimento seguinte foram determinados os efeitos da exposição a 300 e 500 mg L-1 de LEO em parâmetros de estresse (cortisol, glicose e níveis de sódio plasmáticos) após os animais serem expostos durante 1 min ao ar. Os peixes (n = 10 por tempo de amostragem) foram coletados imediatamente ou transferidos para aquários livres de anestésico até amostragem (15, 30, 60 ou 240 min). LEO demonstrou ser composto majoritariamente por β-linalol e 1,8-cineol em proporções similares, enquanto que IEO apresentou β-linalol como constituinte majoritário. O estágio de anestesia foi verificado em jundiás com 200-500 mg L-1 entre 4-8 min para LEO e 6-16 min para IEO. Menores concentrações de ambos os EO não promoveram anesthesia até 30 min. O uso de LEO como anestésico preveniu o aumento de cortisol e a perda de sódio induzida pela exposição aérea. Já a glicemia encontrava-se aumentada em peixes expostos ao LEO em comparação ao grupo basal (não exposto ao ar) na maioria dos tempos de observação. Assim, EO de O. americanum obtido a partir das folhas foi considerado adequado para procedimentos anestésicos devido a sua rápida indução e capacidade de prevenir o estresse decorrente do manuseio.

Estabilidade lipídica de filés de carpa húngara congelados tratados com extratos de Lippia Alba / Lipid stability of frozen common carp fillets treated with Lippia alba extract

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da aspersão de extratos de Lippia alba na estabilidade lipídica de filés de carpa húngara armazenados a -18±2°C. Filés não tratados (controle sem aspersão) ou aspergidos (1mL 10g-1 de filé) com água destilada (controle água destilada) ou com extratos de L. alba (0,10g mL-1) hidrometanólico ou aquoso foram analisados durante o armazenamento nos dias zero, 90 e 180. Independente do tempo de congelamento, o extrato hidrometanólico reduziu os valores de dienos conjugados (DC) dos filés em relação aos demais tratamentos, além de reduzir os valores de ácidos graxos livres aos 90 dias (P<0,05). O extrato aquoso resultou em maior teor de peróxidos após 180 dias de congelamento comparado aos demais tratamentos (P<0,05). Os extratos hidrometanólico e aquoso reduziram os valores de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) após 180 dias, comparados aos filés tratados com água destilada e sem aspersão (P<0,05). Ambos os extratos de L. alba retardaram a oxidação lipídica, sendo que o extrato aquoso retardou a degradação de produtos primários da oxidação lipídica (peróxidos) em produtos secundários (TBARS), enquanto o extrato hidrometanólico parece ser mais eficiente, pois inibiu de forma similar tanto a formação de DC e peróxidos, quanto a sua degradação em produtos secundários (TBARS).

The effect of sprinkling with Lippia alba extracts was evaluated on the lipid stability of common carp fillets stored at -18±2°C. Fillets that received no treatment (no spray control) or that were sprayed (1mL 10g-1 fillet) with distilled water (water control) or with hydro-methanolic or aqueous extract of L. alba (0.10g mL-1) were evaluated immediately (time zero) and after 90 and 180 days. Regardless of the storage time, the hydro-methanolic extract reduced the conjugated dienes (CD) values of fillets compared to the other treatments, and reduced the free fatty acid levels at 90 days (P<0.05). The aqueous extract caused higher peroxide value after 180 days of frozen storage compared to the other treatments (P<0.05). The hydro-methanolic and aqueous extracts reduced thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) values after 180 days compared to the non-treated fillets or to the water-sprayed fillets (P<0.05). Both extracts have delayed lipid oxidation. While the aqueous L. alba extract delayed the degradation of primary oxidation products (peroxides) into secondary products (TBARS), the hydro-methanolic extract was more efficient as it inhibited both the CD and peroxide formation and its degradation into secondary products (TBARS).

Variabilidad de la composición química del aceite esencial de nectandra megapotamica (spreng. ) mez (lauraceae) / Variability of chemical composition of essential oil from nectandra megapotamica (spreng. ) mez (lauraceae)

Este trabajo describe la variabilidad química del aceite esencial (AE) de N. megapotamica, utilizando análisis multivariado. Se colectaron hojas de tres individuos en una población en Santa Maria, Brasil, en cada estación durante un año y se clasificaron en hojas jóvenes y viejas. Los AE se obtuvieron por hidrodestilación y la composición química fue determinada por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. Se realizó un análisis de agrupamiento jerárquico para formación de grupos químicos (GQ) y análisis de componentes principales (ACP) para verificar cuáles constituyentes influenciaron la formación de grupos. Inicialmente se observaron dos agrupamientos en el dendrograma debido a concentraciones de α-pineno y biciclogermacreno, constituyentes mayoritarios. En el segundo corte se discriminaron cinco GQ, siendo este también el número de componentes principales con valores propios superiores a 1. Los isómeros de asarona se observaron solamente en el AE de dos individuos (GQ5), constituyendo los principales elementos de diferenciación.

This work describes the chemical variability of the essential oils (EO) of N. megapotamica using multivariate analysis. Leaves of three individuals of a population in Santa Maria-RS were collected per season for a year, and classified into young and old. The EO were obtained by hydrodistillation and the chemical composition was determined by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC/MS). Cluster analysis (HCA) were performed for formation of chemical groups (CG), and principal component analysis was done (PCA) to determine which constituents influenced the formation of groups. Initially, two clusters were observed in the dendrogram, due to the concentration of α-pinene and bicyclogermacrene, major constituents of the EO. The second section showed five different CG, which is also the number of principal components with eigenvalues greater than 1. The occurrence of isomers of asarone was observed only in EO of two individuals (CG5), containing the main elements of differentiation.

Seasonal influence on the essential oil production of Nectandra megapotamica (Spreng.) Mez

This study evaluated the seasonal influence on the yield and chemical composition of the essential oil (EO) of Nectandra megapotamica. Fresh young (YL) and old leaves (OL) obtained from three trees in each season (Nov/2010 to Sep/2011) collected in Santa Maria-RS were hydrodistilled in triplicate. The chemical composition was determined by the gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) and the yield on dry basis was evaluated by two-way ANOVA (seasons, development stage). Spring (Sp) and summer (Su) showed higher average incomes (0.45 and 0.33%), which occurred when flowering, fruiting, and growth of YL and senescence of OL took place, while autumn (Au) presented the lowest yield (0.25%) during the rustification of OL. The highest yield was obtained for the YL in Sp (0.59%) and the lowest for the OL in Au (0.21%). The major constituents of the EO were independent from the season and were identified as α-pinene, bicyclogermacrene, β-pinene, germacrene D, and limonene. Seasonality and phenology influenced the production of EO probably due to morphological and metabolic alterations in the leaves as well as due to the needs of the tree, such as attraction and/or protection.

Comparison of the efficiency between two sampling plans for aflatoxins analysis in maize

Variance and performance of two sampling plans for aflatoxins quantification in maize were evaluated. Eight lots of maize were sampled using two plans: manual, using sampling spear for kernels; and automatic, using a continuous flow to collect milled maize. Total variance and sampling, preparation, and analysis variance were determined and compared between plans through multifactor analysis of variance. Four theoretical distribution models were used to compare aflatoxins quantification distributions in eight maize lots. The acceptance and rejection probabilities for a lot under certain aflatoxin concentration were determined using variance and the information on the selected distribution model to build the operational characteristic curves (OC). Sampling and total variance were lower at the automatic plan. The OC curve from the automatic plan reduced both consumer and producer risks in comparison to the manual plan. The automatic plan is more efficient than the manual one because it expresses more accurately the real aflatoxin contamination in maize.

Concentrados proteicos vegetais na alimentação de Jundiás (Rhamdia quelen) / Vegetable Protein concentrates in the diet of South American catfish Rhamdia quelen

O objetivo deste estudo foi avaliar fontes de concentrados proteicos vegetais alternativos em substituição ao farelo de soja sobre o desempenho e composição centesimal de jundiás (Rhamdia quelen) e coloração dos filés. Foram utilizadas 20 unidades experimentais, com capacidade de 90L cada uma, onde 400 peixes permaneceram alojados durante 45 dias. Os juvenis de jundiá possuíam 11,5±5,0cm e peso inicial de 10,4±5,5g. Foram avaliadas quatro fontes de concentrados proteicos, sendo eles: dieta controle, tendo o farelo de soja com base proteica; CL: dieta contendo concentrado proteico de crambe + concentrado proteico de linhaça; CLGM: composta por concentrado proteico de crambe + concentrado proteico de linhaça + concentrado proteico de folha de mandioca + concentrado proteico de farelo de girassol e GM: constituída por concentrado proteico de farelo de girassol + concentrado proteico de folha de mandioca. Aos 30 e 45 dias, foram avaliados os parâmetros de crescimento (peso, fator de condição, taxa de crescimento específico, ganho em peso diário e relativo, taxa de eficiência proteica e conversão alimentar aparente) e avaliação centesimal do peixe inteiro e filé (umidade, proteína bruta, gordura e cinzas). Além disso, aos 45 dias, foi realizada a avaliação instrumental da cor nos filés. Ao final do período experimental, foram observadas diferenças significativas para os parâmetros de crescimento e avaliação centesimal, sendo que os animais alimentados com as dietas CL apresentaram maior crescimento (13,8cm), taxa de crescimento específico (2,43% dia-1), ganho em peso diário (0,41g dia-1), ganho em peso relativo (108,3%) e menor conversão alimentar (1,21), comparado às dietas contendo concentrado proteico de girassol e concentrado proteico de folhas de mandioca. Observou-se também que os animais alimentados com as dietas GM e CLGM apresentaram uma pigmentação amarelada nos filés. Conclui-se que os animais alimentados com a dieta CL obtiveram os maiores índices de desempenhos, podendo ser utilizada como alimento na formulação de dietas para esta espécie. As demais combinações não redundaram em resultados melhores que a dieta controle e CL.

The aim of this study was to evaluate vegetable protein concentrates to replace soybean meal (traditional protein) on performance and chemical composition of catfish (Rhamdia quelen) and its influence on the coloration of the fillets. We used 20 experimental units (EU), with a capacity of 90L each, where 400 fish were rearing for 45 days. Juvenile catfish had 11.5±5.0cm and an initial weight of 10.4±5.5g. We evaluated four diets with different sources of protein concentrates, which are: Control, conventional diet using soybean meal as source of protein; CL: diet containing protein concentrate crambe meal protein concentrate; CLGM: protein concentrate consisting of crambe meal protein concentrate protein concentrate cassava leaf protein concentrate and GM sunflower meal: protein concentrate consisting of sunflower meal protein concentrate cassava leaf. At 30 and 45 days were evaluated growth parameters (weight, condition factor, specific growth rate, daily weight gain and relative protein efficiency ratio and feed conversion) and proximate evaluation of the whole fish and fillet (humidity, crude protein, fat and ash). In addition, the 45-day evaluation was made color instrumental in fillets. At the end of the experiment, significant differences were observed for growth parameters and proximate, and the animals fed the LC diets had higher growth (13,8cm), specific growth rate (2,43% day-1), daily weight gain (0,41g day-1), relative weight gain (108,3%) and lower feed conversion (1,21) compared to diets containing protein concentrate of sunflower and cassava leaves. We also observed that animals fed on GM diets and CLGM showed a yellowish pigment in the fillets. It is concluded that animals fed the CL diet had the highest levels of performance and can be used as food in the formulation of diets for this species. All others combinations do not showed no better results than the control diet and CL.

Anesthetic activity of Brazilian native plants in silver catfish (Rhamdia quelen)

There is an increasing demand for inexpensive and safe anesthetics that can reduce fish stress caused by some procedures such as capture and handling. In this context, the present study evaluated the potential of essential oils (EO) of three Brazilian native plants (Hesperozygis ringens, Lippia sidoides and Ocotea acutifolia) as anesthetics for the silver catfish - Rhamdia quelen. Moreover, an analysis was made of the chemical composition of these oils and their influence on stress parameter. EO of H. ringens and O. acutifolia were effective as anesthetics, without behavioral side effects. EO of O. acutifolia (150 µL L-1) promoted an increase in blood glucose level. Regarding to the composition, pulegone accounts for 96.63% of the EO of H. ringens, and caryophyllene oxide amounts to 56.90% of the EO of O. acutifolia. Two chemotypes, thymol and carvacrol (68.40% and 67.89%, respectively) were verified for EO of L. sidoides. Both samples of EO of L. sidoides showed anesthetic activity in silver catfish, but exposure also caused loss of mucus and mortality. Thus, only the EO of H. ringens and O. acutifolia are advised for anesthetic use.

Existe uma crescente demanda por anestésicos baratos e seguros capazes de reduzir o estresse em peixes produzido durante procedimentos como captura e manuseio. Neste contexto, o presente estudo avaliou o potencial como anestésico dos óleos essenciais (EO) de três espécies vegetais nativas (Hesperozygis ringens, Lippia sidoides e Ocotea acutifolia) em jundiás - Rhamdia quelen. Adicionalmente, a composição química desses óleos e suas influências sobre o estresse também foram avaliadas. Os EO de H. ringens e O. acutifolia foram efetivos como anestésicos sem efeitos adversos detectáveis. EO de O. acutifolia (150 µL L-1) promoveu um aumento na glicemia. Em relação a sua composição, pulegona correspondeu a 96,63% do EO de H. ringens, e óxido de cariofileno a 56,90% do EO de O. acutifolia. Dois quimiotipos, timol e carvacrol (68,40% e 67,89%, respectivamente) foram verificados para os EO de L. sidoides. Ambas as amostras de EO de L. sidoides apresentaram atividade anestésica em jundiás, contudo a exposição produziu perda de muco e mortalidade. Desta forma, somente os EO de H. ringens e O. acutifolia têm seu uso recomendável como anestésicos.

Anesthesia and transport of fat snook centropomus parallelus with the essential oil of Nectandra megapotamica (Spreng) Mez

This study analyzed the chemical composition and anesthetic potential of essential oil (EO) of Nectandra megapotamica in fat snook (Centropomus parallelus). For the extraction of EO by hydrodistillation, leaves were separated in young (EO-Y) or old (EO-O), and the chemical composition of the EOs was determined by CG-MS. The anesthetic potential was assessed by the evaluation of induction and recovery time of anesthesia and stress response from anesthesia and transport. Three experiments were carried out: i) four different concentrations of each EO were tested to evaluate anesthesia induction and recovery time; ii) two concentrations of EO-O were tested for the evaluation of its effects on stress parameters (glucose, lactate, and Na+ and K+ plasma levels) caused by anesthesia; and iii) fish were transported in plastic bags, supplied with two concentrations of EO-O for the evaluation of water quality and mortality. All experiments were performed on fish acclimated to 0 and 33 ppt salinity. The main constituents of the Y and O-EOs were bicyclogermacrene (46.5/34.6%), α-pinene (26.8/26.2%), β-pinene (7.9/12.3%), and germacrene D (9.6/9.1%). Mild sedation was achieved at 30 °L L-1(1.3-3.2 min) and deep anesthesia at 150 °L L-1 (5.6-8.0 min) with both EOs. The recovery time ranged from 1-10 min. The EO-O was not able to avoid the stress of anesthesia evidenced by elevated glucose and lactate plasma levels observed in all groups. Plasma levels of Na+ and K+ were not significantly affected by treatments. During transport, the use of EO-O did not prevent deterioration in water quality and the post-transport mortality. In conclusion, the EO of N. megapotamica has anesthetic activity in fat snook, but it was not able to prevent the stress of anesthesia and transport.

Este estudo analisou a composição química e o potencial anestésico do óleo essencial (OE) de Nectandra megapotamica em robalos-peva (Centropomus parallelus). Para a extração do OE por hidrodestilação, as folhas foram separadas em jovens (OE-J) ou velhas (OE-V) e a composição química foi determinada por CG-EM. O potencial anestésico foi acessado através da avaliação do tempo de indução e recuperação da anestesia e resposta ao estresse do procedimento anestésico e transporte. Foram realizados três experimentos: em primeiro lugar, quatro concentrações diferentes de cada OE foram testadas para avaliar o tempo de indução à anestesia e de recuperação; em segundo lugar, duas concentrações do OE-V foram testadas para avaliar os efeitos sobre os parâmetros de estresse (níveis plasmáticos de glicose, lactato, Na+ e K+) causados pelo procedimento anestésico; em terceiro lugar, os peixes foram transportados em sacos plásticos com duas concentrações do OE-V para avaliação da qualidade da água e mortalidade. Todos os experimentos foram realizados em peixes aclimatados à salinidade zero e 33. Os constituintes majoritários do OE-J e OE-V foram: biciclogermacreno (46,5/34,6%), α-pineno (26,8/26,2%), β-pineno (7,9/12,3%) e germacreno D (9,6/9,1%). Sedação leve foi alcançada com 30 °L L-1(1,3-3,2 min) e anestesia profunda a partir de 150 °L L-1 (5,6-8,0 min) com ambos OEs. O tempo de recuperação variou entre 1-10 min.O OE-V não foi capaz de evitar o estresse do procedimento anestésico, evidenciado pelos elevados níveis plasmáticos de glicose e lactato observados em todos os grupos. Os níveis plasmáticos de Na+ e K+ não foram significativamente afetados pelos tratamentos. Durante o transporte, o OE-V não impediu a deterioração da qualidade da água e a mortalidade pós-transporte. Concluindo, o OE de Nectandra megapotamica apresenta atividade anestésica em robalos-peva, mas não foi capaz de evitar o estresse do procedimento anestésico e transporte.

Dois planos de amostragem para análise de fumonisinas em milho / Two sampling plans for fumonisins analysis in maize

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência de dois planos de amostragem para análise de fumonisinas (B1+B2) em 11 lotes de milho. Empregaram-se o plano de amostragem manual em grãos inteiros, através do calador graneleiro e o plano de Amostragem Automático em Fluxo Contínuo em grãos moídos (AAFC). Para a comparação dos dois planos de amostragem, foram utilizadas duas medidas de dispersão: a variância e o coeficiente de variação. Em cada plano de amostragem, foram determinadas as variâncias associadas às três etapas do procedimento de detecção das fumonisinas (amostragem, preparação da amostra e análise) e os coeficientes de variação total. A correlação entre as médias de concentrações de fumonisinas e as variâncias de cada etapa do procedimento de detecção foi avaliada para cada plano amostral através da análise de regressão. Na AAFC de milho moído para análise de fumonisinas, obtiveram-se resultados inferiores (P<0,01) de variância na etapa de amostragem (0,0226mg kg-1)², assim como no coeficiente de variação total (6,37%), quando comparados com a variância da amostragem manual (0,0685mg kg-1)² e coeficiente de variação total do plano de amostragem manual em grãos inteiros (8,94%), apresentando, portanto, maior eficiência na detecção de fumonisinas em milho.

The aim of this research was to evaluate the efficiency of two sampling plans for fumonisins (B1+B2) analysis in 11 lots of maize. For sample collection the two systems used were a manual system in whole grains, using sampling spear, and an automatic system in milled grains, using the continuous flow sampling system (CFSS). For comparison purpose, two dispersion measurements were used: variance and coefficient of variation. For each sampling plan the variance associated to the three steps of fumonisins quantification (sampling, sample preparation, and analysis), and the total coefficient of variation were determined. The correlation between the average fumonisins concentration and the variances for each phase of the detection procedure was evaluated for each sampling plan using analysis of regression. At the automatic sampling plan in milled grains for fumonisins analysis in maize both sampling variance (0.0226mg kg-1)² and total coefficient of variation (6.37%) were lower (P<0.01) than in the manual sampling plan in whole grains whit (0.0685mg kg-1)² of variance and 8.94% of coefficient of variation, showing so better efficiency for fumonisin detection on maize.

Sesquiterpenoids of Senecio bonariensis Hook. & Arn., Asteraceae / Sesquiterpenóides de Senecio bonariensis Hook. & Arn., Asteraceae

Das folhas de Senecio bonariensis Hook. & Arn. foram isolados três sesquiterpenóides. β-Cariofileno (1), óxido de β-cariofileno (2) e germacreno D (3) foram identificados por CG-IE-EM, IV, ¹H and 13C-RMN. A importância ecológica e quimiotaxionômica para o gênero Senecio é discutida, assim como a correlação biossintética entre as substâncias isoladas. As substâncias 1 e 2 tiveram sua atividade antimicrobiana avaliada pelo método de microdiluição em caldo contra cepas bacterianas e fúngicas. Ambas não inibiram o crescimento microbiano nas concentrações testadas.

From the leaves of Senecio bonariensis Hook. & Arn. three sesquiterpenoids were isolated. β-caryophyllene (1), β-caryophyllene oxide (2) and germacrene D (3) were characterized by GC-EI-MS, IR, ¹H and 13C-NMR data. Their ecological and chemotaxonomical significance for the genus Senecio are discussed, as well as the biosynthetic correlation between the isolated substances. The antimicrobial activity of substances 1 and 2 were evaluated by the microdilution method against bacterial and fungal strains. Both compounds did not inhibit the microorganism growth at the tested concentrations.

Avaliação da legislação de boas práticas de manipulação de alimentos pela vigilância sanitária municipal na cidade de Cachoeira do Sul/RS / Evaluation of the rules of good food manipulation practices by municipal sanitary surveillance in the city of Cachoeira do Sul / RS

Este trabalho teve como objetivo investigar a aplicação das condições de atuação da Vigilância Sanitária, na cidade de Cachoeira do Sul/RS referente às Boas Práticas de Manipulação de Alimentos estabelecidas pela RDC nº 216/2004 e estabelecer um instrumento de monitoramento na manutenção das condições sanitárias dos estabelecimentos envolvidos. Os estabelecimentos foram selecionados de acordo com o protocolo de solicitação de alvará sanitário, no período de janeiro de 2006 a outubro de 2007. Foram avaliados 331 processos protocolados. A análise dos dados incluiu as condições de trabalho da vigilância sanitária, os critérios adotados para a liberação das licenças, a situação do cadastro de estabelecimentos de alimentos no município. Nas vistorias foi avaliado o atendimento a Lista de Verificação de Boas Práticas de Alimentação (RDC nº 275/2002 e Portaria/RS nº 542/2006). (...)Houve redução significativa do número de estabelecimentos irregulares e de infrações entre 2006 e 2007. Os pontos críticos identificados foram: falta de estrutura da vigilância, alta rotatividade de funcionários, falta de programa de saúde dos manipuladores, inicio das atividades sem alvará sanitário, problemas de temperatura dos alimentos e, dificuldade de elaboração do Manual de Boas Práticas. Implementação das Boas Práticas ocorreu com regramento específico através de editais de notificação alterando o processo de liberação de todos os alvarás a partir de janeiro de 2008. Conclui-se que a ação da VISA deve priorizar: atualização cadastral,ampliação de vistorias de monitoramento principalmente do comércio ambulante e divulgação da legislação sanitária.

Atividade antimicrobiana de Senecio heterotrichius DC. (Asteraceae) / Antimicrobial activity of Senecio heterotrichius DC.

Neste trabalho é relatada a avaliação da atividade antimicrobiana dos extratos diclorometânico e etanólico, obtidos por maceração das partes aéreas de S. heterotrichius pelo método de microdiluição em caldo, frente a patógenos bacterianos e fúngicos. O extrato diclorometânico evidenciou boa atividade inibitória frente a Candida krusei (CIM de 0,25 mg/mL) e moderada atividade frente a Staphylococcus aureus (CIM de 2,5 mg/mL). O extrato etanólico mostrou-se inativo frente aos microrganismos testados. Também foi isolado o constituinte majoritário do extrato diclorometânico, cuja análise espectroscópica indicou tratar-se de um sesquiterpeno, identificado como germacreno D.

This work describes the evaluation of the antimicrobial activity of CH2Cl2 and EtOH extracts obtained by the maceration of the aerial parts of Senecio heterotrichius DC. against bacterial and fungal pathogens by broth microdilution method. The CH2Cl2 extract showed the best activity against Candida krusei (MIC 0.25 mg/mL) and a moderate activity against Staphyllococcus aureus (MIC 2.5 mg/mL). The EtOH extract was inactive against the tested microorganisms. Besides, one of the main constituents of CH2Cl2 extract was isolated, and its spectroscopic analysis indicated the presence of a sesquiterpene identified as germacrene D.

Digestibilidade de dietas e balanços metabólicos de suínos alimentados com dietas contendo aflatoxinas / Diets digestibility and metabolic balances of pigs fed diets containing aflatoxins

Um experimento foi realizado para avaliar a digestibilidade de dietas e balanços metabólicos de suínos alimentados com dietas contendo 800ug kg-1 de aflatoxinas. Foram utilizados oito suínos, meio-irmãos, com peso médio inicial de 13kg, alojados em gaiolas metabólicas, em ambiente semi-climatizado. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com dois tratamentos (dieta controle e controle + 800ug kg-1 de aflatoxinas) e quatro repetições, sendo o animal a unidade experimental. Os coeficientes de digestibilidade da matéria seca, proteína e energia bruta não foram influenciados (P>0,05) pela adição de 800ug kg-1 de aflatoxinas na dieta. A metabolização da energia bruta foi 6 por cento superior (P<0,05) quando comparada à dieta controle. A excreção urinária de N aumentou (P<0,05) em 52 por cento e a retenção relativa à absorção diminuiu (P<0,05) em 31 por cento nos animais alimentados com a dieta contendo aflatoxinas. No balanço energético, a energia bruta ingerida não foi influenciada (P>0,05) pela adição de aflatoxinas. A excreção urinária de energia aumentou (P<0,05) 52 por cento nos animais alimentados com a dieta contendo aflatoxinas. A presença de 800ug kg-1 de aflatoxinas na dieta não afetou a digestibilidade, mas alterou o metabolismo protéico e energético de leitões.

An experiment was conducted in order to investigate the digestibility of diets and metabolic balances of piglets fed diets containing 800ug kg-1 of aflatoxins. This study used eight with littermate barrows whith an average initial weight of 13kg, housed in metabolic cages in a semi-acclimatized environment. A completely randomized experimental design was used, with two treatments (control diet and control + 800ug kg-1 of aflatoxins) and four replications, with the animal as the experimental unit. The digestibility coefficients of dry matter, protein and gross energy were not affected (P>0.05) by the addition of 800ug kg-1 of aflatoxins in the diet. The gross energy metabolization was 6 percent (P<0.05) higher when compared to the control diet. The N urinary losses increased (P<0.05) 52 percent and the retention related to absorption decreased (P<0.05) 31 percent in piglets fed diet containing aflatoxins. Concerning the energy balance, the gross energy digested was not influenced (P>0.05) by the addition of aflatoxins in the diet. Energy losses in urine increased (P<0.05) 52 percent in the pigs fed diets containing aflatoxins. The presence of an aflatoxin level of 800ug kg-1 in the diet did not affect the digestibility, but it altered the protein and energy metabolism of weaned piglets.

Adição de bentonita sódica como adsorvente de aflatoxinas em rações de frangos de corte / Utilization of sodium bentonite as adsorbent of aflatoxins in broiler feed

A presença de micotoxinas nas matérias-primas, principalmente no milho utilizado para rações para aves, é uma das maiores preocupações atuais devido aos danos causados por essa substâmcia não só aos animais, mas também aos produtores e às empresas do setor avícola. Considerando a utilização de adsorvente ou seqüestrante na ração para minimizar os efeitos deletérios, realizou-se um experimento para avaliar o efeito da adição de um adsorvente, baseado em bentonita sódica, na ração de frangos de corte, a fim de reduzir os efeitos de aflatoxinas. Foram utilizados 960 pintos Cobb de um dia de idade, distribuídos em oito repetições de 20 animais nos tratamentos: T1=sem aflatoxina;T2=3mg kg-1 de aflatoxina;T3=sem aflatoxina+0,5 por cento de bentonita; T4=3mg kg-1 de aflatoxina+0,1 por cento de bentonita; T5=3mg kg-1 de aflatoxina+0,3 por cento de bentonita e T6=3mg kg-1 de aflatoxina+0,5 por cento de bentonita. O consumo alimentar, o peso corporal e a conversão alimentar foram afetados pela presença da toxina na ração. A adição de bentonita sódica na ração sem aflatoxina não causou nenhum efeito depressivo nas aves. Nos tratamentos que continham 3mg kg-1 de aflatoxinas, a adição do adsorvente promoveu um melhor desempenho das aves, sendo que 0,3 por cento de adição de bentonita apresentou melhores resultados.

High concentrations of micotoxins in raw materials, mainly in corn used in poultry rations of food, is an important subject of study due to hazardous problems not only to the animals themselves but also to the producer and to the poultry industry due to the reduction of performance by aflatoxins. Taking into account the lack of efficient tecnique for its elimination, from the feed, an adsorbent was added to the diets in order to reduce the effects of aflatoxins. Nine hundred sixty day old Cobb chicks, distributed in 8 replicates of 20 birds per pen the following treatments: T1=No aflatoxin; T2=3mg kg-1 of aflatoxin; T3=no aflatoxin+0.5 percent of bentonite; T4=3mg kg-1 of aflatoxin+0,1 percent of bentonite;T5=3mg kg-1 of aflatoxin+0.3 percent bentonite and T6=3mg kg-1 aflatoxin+ 0.5 percent of bentonite. Feed intake, body weight and feed conversion were depressed by aflatoxin in the feed. The addition of bentonite to the feed without aflatoxin did not caused negative effecs to the broilers. In treatments carried out with 3mg kg-1 of aflatoxins, the addition of the adsorbent promoted a better performance of the broilers with best results for those receiving 0.3 percent of bentonite.

Desempenho e plumagem de frangos de corte intoxicados por aflatoxinas / Performance and plumage of broiler chicken intoxicated by aflatoxins

O objetivo desta pesquisa foi estudar os efeitos das aflatoxinas sobre o desempenho e plumagem de frangos de corte. Foram utilizados 240 pintos machos, alimentados de 1 a 42 dias de idade com racão ad libitum sem aflatoxinas (grupo controle) e contaminada com 3mg de aflatoxinas/kg de racão (grupo tratado). As aves foram analisadas duas vezes ao dia em relacão ao seu desenvolvimento. O consumo de racão e peso dos animais foram avaliados ao final de cada fase de criacão (21, 35 e 42 dias). Ao final do experimento, realizaram-se as avaliacões patológicas, a pesagem das penas e a avaliacão dos seus aminoácidos. As aves do grupo tratado apresentaram sinais caracteristicos de intoxicacão por aflatoxinas, como desuniformidade da estatura, reducão no consumo de racão e ganho de peso e alteracões microscópicas e macroscópicas em órgãos e tecidos. Observou-se que o coracão e o fígado das aves intoxicadas apresentaram um incremento significativo no peso médio relativo, a massa de penas foi reduzida significativamente (33,8 por cento) e não houve alteracões na concentracão e na composicão dos aminoácidos, apesar do baixo desempenho dos animais intoxicados.

Surto de aflatoxicose em suínos no Estado do Rio Grande do Sul / Swine aflatoxicosis outbreak in the state of Rio Grande do Sul, Brazil

Descreve-se um surto de aflatoxicose ocorrido no outono de 2004, em uma granja de suínos, no município de Sentinela do Sul, RS. O milho utilizado no arraçoamento dos animais e que causou a intoxicação, foi produzido e processado na propriedade. Morreram 7 porcas e 8 leitões, e foram relatados dois casos de aborto. Os sinais clínicos foram apatia, anorexia, icterícia, urina amarelada com sangue e fotossensibilização. A gama-glutamil transferase (GGT) e a bilirrubina total mostraram-se elevadas nos animais necropsiados. Os principais achados de necropsia incluíam icterícia generalizada, fígado amarelo-alaranjado, edema de parede da vesícula biliar e presença de líquido amarelado nas cavidades abdominal e pericárdica. As lesões microscópicas mais importantes foram encontradas no fígado e consistiam em tumefação, degeneração e necrose individual de hepatócitos, proliferação de ductos biliares e colestase. O diagnóstico foi baseado nos sinais clínicos, nos achados de necropsia e de histopatologia e nos níveis altos de aflatoxina B1 (milho 3140ppb, ração 4670ppb) encontrados no milho e na ração.