ABSTRACT
The pathogenic fungi may be associated with the seeds during development, harvest and storage, and it can be disseminated through them. This work evaluated the seeds performance of three hybrid corn cultivars, BM 840 PRO, BM 810 and BM 207, submitted to different inoculum potentials of Fusarium verticillioides. Seeds were uniformly distributed over the medium fungal colony developed on PDA (potato dextrose agar) containing mannitol in water potential -2.0 MPa. Seeds remained in this way for different periods of contamination (0, 24, 48, 72 and 96 hours). Before and after seven months of seed storage the evaluations were performed. Seeds treated with fungicide Derosal Plus® (carbendazim + thiram, 250 mL p.c. 100 kg-1 of seeds) were used as control. The increased of inoculum potential of F. verticillioides fungus on corn seeds caused reduction in physiological quality in the potentials 72 and 96 hours of exposure before and after storage. The highest Fusarium verticillioides incidence is observed in non-stored seeds. Fusarium verticillioides incidence on corn seeds accentuates the deterioration in storage.
Os fungos fitopatogênicos podem associar-se as sementes durante o desenvolvimento, colheita e armazenamento, e por meio dessas serem disseminados. Este trabalho avaliou o desempenho de sementes de três cultivares de milho híbrido, BM 840 PRO, BM 810 e BM 207, submetidas a diferentes potenciais de inóculo de Fusarium verticillioides. As sementes foram distribuídas uniformemente sob colônia fúngica desenvolvida em meio BDA, contendo manitol no potencial hídrico -2,0 MPa. As sementes permaneceram desse modo por diferentes períodos de contaminação (0, 24, 48, 72 e 96 horas). Antes e após sete meses de armazenamento das sementes as avaliações foram realizadas. As sementes tratadas com o fungicida Derosal Plus® (carbendazim + tiram, 250 mL p.c. 100 kg-1 de sementes) foram usadas como testemunhas. O aumento do potencial de inóculo do fungo F. verticillioides nas sementes de milho causa redução da qualidade fisiológica nos potenciais de 72 e 96 horas de exposição, antes e após o armazenamento. A maior incidência de Fusarium verticillioides é observada nas sementes não armazenadas. A incidência de Fusarium verticillioides em sementes de milho acentua a deterioração no armazenamento.
Subject(s)
Seeds , Germination , Zea mays , Fungi , FusariumABSTRACT
Sclerotinia sclerotiorum, infection of bean fields, has increased in Brazil. Fungicides application is the control strategy used due to lack of cultivars with complete disease resistance. To guide the use of isolates in resistance screening 25 S. sclerotiorum isolates from Brazilian dry bean fields were characterized using microsatellite markers, mycelial compatibility groups (MCGs) and aggressiveness. Microsatellite primer pairs were used to identify polymorphisms among the S. sclerotiorum isolates and MCGs were determined from interaction of all isolates grown sideby-side. Aggressiveness was derived from a straw test where fungal mycelium was placed over a cut bean stem and rated for disease progress. Data from microsatellite profiles grouped the 25 isolates into four clusters and seven MCGs were identified. No association among host cultivar and cluster or MCG of isolates was observed. For MCGs, 57% contained isolates sampled frequently over multiple locations and 43% contained isolates unique to locations. There were significant differences among isolates in aggressiveness within and between MCGs. The most aggressive isolates in resistance screening will be helpful in the identification of higher levels of resistance in bean germplasm/lines.
A infecção de Sclerotinia sclerotiorum em campos de feijoeiro tem aumentado no Brasil. A aplicação de fungicidas é a estratégia de controle utilizada devido à falta de cultivares com resistência completa á doença. Para orientar o uso de isolados visando resistência, 25 isolados de S. sclerotiorum coletados em campos de feijoeiro no Brasil foram caracterizados utilizando marcadores microssatélites, grupos de compatibilidade micelial (MCGs) e agressividade. Pares de primers de microssatélites foram utilizados para identificar polimorfismo entre os isolados de S. sclerotiorum e MCGs foram determinados a partir de interação dos isolados crescendo lado-a-lado. O teste de agressividade foi derivado a partir do straw test onde o micélio do fungo foi depositado sobre a haste cortada de feijoeiro e avaliado o progresso da doença. Os dados de microssatélites dos 25 isolados de S. Sclerotiorum foram agrupados em quatro grupos e identificados sete MCGs. Não foi observada associação entre a cultivar hospedeira e o cluster ou MCG dos isolados. Para MCGs, 57% continham isolados amostrados em vários locais e 43 % continham isolados de apenas um local. Houve diferença significativa entre os isolados na agressividade dentro e entre os MCGs. O isolado mais agressivo no screening de resistência será útil na identificação de níveis mais elevados de resistência em germoplasma/linhagens de feijoeiro.
Subject(s)
Ascomycota , Genetic Variation , Microsatellite Repeats , Fungi , FabaceaeABSTRACT
The cultivated area of sunflower in Brazil is expanding considerably over the last years as the result of the great interest in the biodiesel production derived from that crop. One consequence of that expansion is the occurrence of several diseases some of devastating nature in part of the growing areas with sunflower. This study evaluated the effects of the association of sunflower seeds infected by Sclerotinia sclerotiorum and the pathogen transmission rates from these infected seeds, considering some factors which may interfere in that interaction. Four inoculum potentials, two isolates of the cited fungus, two sunflower cultivars, 'Helio 250' and 'Helio 253' and two environmental temperatures, 20°C and 25°C, were used for the purpose in this work. Seed germination and health, emergence speed index, and plant populations were variables analyzed. From the results, increased levels of inoculum potentials led to gradual reduction of the mean values of germination, emergence rate index and plant populations, regardless the genotype, fungal isolates and temperatures. Transmission rates were higher at the highest levels of inoculum potential, the maximum reaching 80%. These results show the significance of S. sclerotiorum inoculum associated with sunflower seeds both in the establishment of plants in fields and also in spreading the pathogen inoculum between crop fields.
A área cultivada de girassol no Brasil tem se expandido consideravelmente, nos últimos anos, como resultado do elevado interesse na produção de biodiesel. Como consequência do crescimento da cultura, a ocorrência de várias doenças vem devastando as áreas plantadas com girassol. Este estudo avaliou os efeitos da associação de sementes de girassol infectadas por Sclerotinia sclerotiorum e as taxas de transmissão do patógeno a partir destas sementes infectadas, considerando os fatores que podem interferir nesta interação. Foram utilizados, neste trabalho quatro potenciais de inóculo, dois isolados de fungo, duas cultivares de girassol, 'Helio 250' e 'Helio 253', e duas temperaturas de crescimento, 20°C e 25°C. Sanidade e germinação das sementes, índice de velocidade de emergência e população de plantas foram as variáveis analisadas. A partir dos resultados, o aumento do nível do potencial de inóculo levou a uma redução gradual nos valores de germinação, índice de velocidade de emergência e população de plantas, independente da cultivar, do isolado fúngico e da temperatura. As maiores taxas de transmissão foram observadas nos níveis de potencial de inóculo mais elevados, atingindo níveis próximos de 80%. Estes resultados são indicativos sobre a importância do inóculo de S. sclerotiorum associado com sementes de girassol, tanto na disseminação do inóculo do patógeno, quanto como causa de possíveis danos em condições de campo.
Subject(s)
Ascomycota , Seeds , Germination , Fungi , HelianthusABSTRACT
The use of DNA sequences analysis has been an important mean to distinguish and to identify populations of organisms at different levels. By molecular markers several complex organisms have been successful detected in plants for distinct aims. Ribosomal DNA (rDNA) has been used to evaluate genetic variability, microorganism phylogeny and to develop specific primers for detection of plant pathogens in plant tissues. In this study, the objective was to characterize isolates of Colletotrichum gossypii var. cephalosporioides and Colletotrichum gossypii, collected in different regions of Brazil, by analyzing the nucleotide sequence of rDNA regions. ITS1, ITS2, and the intervening 5.8S gene were amplified by PCR and their sequences compared to each other and to those from other species registered in the GenBank. The rDNA of isolates associated with Gossypium spp. showed sequence identities ranging from 96 to 100% in the ITS1 region, 98 to 100% in the 5.8S gene, and 97 to 100% in the ITS2 region. The sequences were submitted to UPGMA analysis, and according to the phylogenetic trees, the C. gossypii var. cephalosporioides and C. gossypii species clustered together along with isolates of Glomerella cingulata from mango and papaya, and thus no distinction could be made between isolates of those organisms.
O uso de sequências de fragmentos de DNA tem sido importante ferramenta para distinguir e identificar populações de organismos em diferentes níveis de variação. Por meio de marcadores moleculares alguns organismos com variações taxonômicas complexas têm sido detectados com sucesso em tecidos vegetais. O DNA ribossomal tem sido utilizado para avaliar variabilidade genética, filogenia de micro-organismo e para desenvolver oligonucleotídeos específicos visando à detecção de fitopatógenos. Nesse estudo o objetivo foi comparar isolados do complexo Colletotrichum, incluindo C. gosssypii var. cephalosporioides e C. gossypii, coletados em diferentes regiões do Brasil, todos associados às sementes de algodão, pela análise de sequências de nucleotídeos de regiões de rDNA. ITS1, ITS2 e o gene 5.8S que foram amplificados por PCR e suas sequências comparadas entre si com outras sequências depositadas no GenBank. O rDNA de isolados associados com Gossypium spp. mostraram identidades de sequências na faixa de 96 to 100% na região ITS1, 98 to 100% na região de 5.8S, e 97 a 100% na região ITS2. As sequências foram submetidas a análise UPGMA, e de acordo com as árvores filogenéticas , C. gossypii var. cephalosporioides e C. gossypii fizeram parte de um mesmo cluster junto com isolados de Glomerella cingulata de manga e mamão, e assim nenhuma distinção pode ser feita entre os isolados destes organismos.
Subject(s)
Phylogeny , DNA, Ribosomal , Base Sequence , Colletotrichum , Plant PathologyABSTRACT
A deficiência hídrica do solo por ocasião do plantio e associação de patógenos com sementes podem ocasionar a diminuição da germinação e vigor de um lote de sementes, levando à redução do estande e introdução de doenças no campo. Nesse trabalho utilizou-se sementes de algodoeiro cultivar Deltapine Acala 90 (suscetível a ramulose) e linhagem IAC 2226 (resistente a ramulose) para avaliar o desempenho das sementes mediante condições de deficiência hídrica (manitol,-0,8MPa), e presença de Colletotrichum gossypii var. cephalosporioides. Após a submissão a dificiência hídrica em substrato agarizado na presença e ausência do fungo, pelos períodos de 0, 24, 36 72 e 108 horas, foram avaliados: emergência de plantas, índice de velocidade de emergência (IVE), peso de matéria seca de parte aérea, sanidade e índice de doença. Verificou-se que com o aumento do tempo de deficiência hídrica na presença e ausência do patógeno a emergência, vigor e matéria seca de parte aérea de ambos os genótipos diminuiu, sendo mais acentuado na presença do fungo. Observou-se aumento na incidência de C. gossypii var. cephalosporioides à medida que se aumentou o período de deficiência hídrica. O índice de doença na cultivar suscetível foi de aproximadamente 40% no maior período de restrição hídrica, enquanto no material resistente o índice manteve-se praticamente constante em 12% durante todo o período de restrição hídrica.
Water deficit soil at planting and association with seed pathogens can cause a decrease in germination and vigor of a seed, leading to a reduction of the stand and the introduction of diseases in the field. In this work we used seeds of cotton cultivar Deltapine Acala 90 (susceptible to ramulosis) and IAC 2226 strain (resistant to ramulosis) to evaluate the performance of seeds under conditions of water stress (manitol, -0.8 MPa) and presence of Colletotrichum gossypii var. cephalosporioides. After submitting to water stress in agar substrate in the presence and absence of the fungus, for periods of 0, 24, 36, 72 and 108 hours, were sown evaluated: plant emergence, speed of emergence index , dry weight of aerial part, health and disease index. It was found that with increasing time of water stress in the presence and absence of the pathogen emergence, vigor and dry weight of aerial part of both genotypes decreased, being more pronounced in the presence of the fungus. There was an increase in the incidence of C. gossypii var. cephalosporioides as it increased the amount of water restriction. The rate of disease in susceptible cultivar was approximately 40% higher in the period of water restriction, while the resistant strains index remained almost constant at 12% throughout the period of water restriction.
Subject(s)
Seeds , Colletotrichum , Gossypium , NoxaeABSTRACT
Stem and ear rot caused by Stenocarpella maydis are responsible for severe losses in maize production. Treatment of seeds with fungicides may induce environmental damage. Hence, this study aimed to evaluate the effects of essential oils extracted from Cymbopogon winterianus, Thymus vulgaris, Cymbopogon citratus, Corymbia citriodora, Cinnamomum zeylanicum, and Syzygium aromaticum on the development of in vitro S. maydis. In addition, maize seeds were treated with these essential oils to determine their possible mode of action and effects. The oils from S. aromaticum, C. zeylanicum, and T. vulgaris inhibited fungal development at concentrations higher than 0.025%. The oils from S. aromaticum and C. zeylanicum showed seed germination rates of 89.0% and 84.5%, which were higher than that of the control. The oils from S. aromaticum and C. zeylanicum reduced the pathogen incidence in the seeds to 39.0% and 28.0%, respectively. Further, these oils as well as that from T. vulgaris produced lower reduction of maize stand. Scanning electron microscopy examination revealed that essential oils from S. aromaticum and T. vulgaris acted directly on the conidia, impeding germination. The findings suggest that the oils from S. aromaticum, C. zeylanicum, and T. vulgaris are potential alternatives for maize seed treatment in the control of S. maydis.
A podridão-do-colmo e espiga, causada por Stenocarpella maydis, é responsável por graves perdas na produção de milho. O tratamento de sementes com fungicidas pode provocar danos ambientais. Por isso, este estudo objetivou avaliar o efeito de óleos essenciais extraídos de Cymbopogon winterianus (citronela), Thymus vulgaris (tomilho), Cymbopogon citratus (capim-limão), Corymbia citriodora (eucalipto), Cinnamomum zeylanicum (canela) e Syzygium aromaticum (cravo-da-Índia) sobre o desenvolvimento de S. maydis in vitro. Além disso, sementes de milho foram tratadas com esses óleos essenciais para determinar seus possíveis modos de ação e efeitos. Os óleos de S. aromaticum, C. zeylanicum e T. vulgaris inibiram o desenvolvimento do fungo nas concentrações maiores que 0,025%. Os óleos de S. aromaticum e C. zeylanicum mostraram taxas de germinação de sementes de 89,0% e 84,5%, as quais foram maiores que a testemunha. Esses óleos reduziram a incidência do patógeno nas sementes para 39,0% e 28%, respectivamente. Além disso, esses óleos, bem como o óleo de T. vulgaris, produziram menor redução do estande de milho. O exame de microscopia eletrônica de varredura revelou que os óleos de S. aromaticum and T. vulgaris agiram diretamente sobre os conídios, impedindo a germinação. Os resultados deste trabalho sugerem que os óleos de S. aromaticum, C. zeylanicum e T. vulgaris são alternativas potenciais para o tratamento de sementes de milho no controle de S. maydis.
ABSTRACT
O controle químico e biológico de Sclerotinia sclerotiorum têm sido métodos dos mais empregados para o manejo do mofo branco em diversas culturas, reduzindo com isso os danos na qualidade e produtividade de grãos. Neste trabalho o objetivo foi avaliar a sensibilidade in vitro de isolados de S. sclerotiorum a fungicidas e um agente de controle biológico, comumente encontrado no mercado para tratamento de sementes de espécies vegetais. Foram estabelecidos como tratamentos: testemunha, tiofanato metílico, fluazinam, piraclostrobina, fluquinconazol, procimidone e Trichoderma harzianum em 5 concentrações (5, 10, 50, 100 e 500 ppm) e 4 repetições. Os produtos foram misturados ao substrato BDA, ainda em fase liquida, e adicionado em cada placa de petri na proporção de 20 mL por placa. Após a solidificação do meio, foi depositado ao centro de cada placa de Petri um disco de 0,6 cm de diâmetro contendo micélio do fungo e avaliado o crescimento micelial, para obtenção do gráfico de correspondência entre esta variável e as concentrações dos produtos. Os fungicidas e antagonista utilizados foram eficazes em reduzir o crescimento micelial dos dois isolados do fungo, havendo variações do comportamento destes isolados. Em relação a produção de escleródios, os maiores valores ocorreram na testemunha, seguido dos tratamentos piraclostrobina e tiofanato metílico, não havendo nenhuma unidade formada no tratamento referente ao antagonista, T. harzianum. Todos os escleródios produzidos foram capazes de germinar independente das concentrações dos fungicidas.
The chemical and biological control of Sclerotinia sclerotiorum are common measures for the management of white mold disease in different cultures, being able to reduce damages to yield and seed quality. In this work the objective was to evaluate the sensitivity of isolates of S. sclerotiorum to some chemical and biological products, commonly found in the market for seed treatment of plant species. The treatment design included the products: methyl thiophanate, fluazinam, pyraclostrobin, fluquinconazole, procymidone and Trichoderma harzianum in five concentrations (5, 10, 50, 100 and 500 ppm) and 4 replicates. Fungicides were mixed in PDA medium in the liquid phase, and poured to petri dishes, 20 ml of agar medium per dish. After solidification of the medium, 6 mm agar discs containing mycelium of the fungus were placed at the center of each dish and the mycelial growth was recorded daily to obtain the mean growth diameter, which was used to obtain the correlation curve between this variable and the products concentrations. The fungicide and antagonists were effective in reducing mycelial growth of both isolates, with variations among the isolates tested. In relation to the production of sclerotia, the greatest number of these propagules was observed in the control followed by pyraclostrobin and methyl thiophanate treatments and there was no unit formed in the substrate containing T. harzianum. All sclerotia produced in fungal colonies were able to germinate regardless the concentrations of the fungicides.
Subject(s)
Ascomycota , Trichoderma , Mycelium , Fungi , Fungicides, IndustrialABSTRACT
O uso sucessivo de híbridos de milho com resistência variada aos fungos causadores de podridão de grãos tem causado aumento na importância dessas doenças a cada safra. Conduziu-se este trabalho com o objetivo de avaliar pelo teste de sanidade (blotter test) a severidade do fungo Fusarium verticilioides e a incidência dos fungos Stenocarpella maydis e Stenocarpella macrospora em grãos de milho, oriundos de híbridos comerciais, com e sem a inoculação artificial a campo, em dois sistemas de cultivo, convencional e sistema de semeadura direta e em dois anos agrícolas. O experimento foi conduzido a campo, em blocos casualizados, com três repetições. Em laboratório, foram avaliadas, pelo método de "blotter test", a severidade do fungo F. verticilioides e a incidência dos fungos S. maydis e S. macrospora causadores de podridões de espiga. A avaliação pelo teste de sanidade (blotter test) evidenciou a diferença entre os híbridos quanto a reação aos fungos F.verticilioides, S. maydis e S. macrospora. Houve influência do híbrido, da safra agrícola e do sistema de cultivo sobre a infecção dos fungos causadores de podridões de espigas, sendo que o sistema plantio direto favorece o aumento dos fungos responsáveis pelos grãos ardidos em milho. A utilização da inoculação artificial, em campo, visando a selecionar genótipos resistentes aos fungos causadores do "complexo de grãos ardidos" é eficiente.
The continued use of corn hybrids with varied resistance to grain rot-causing fungal agents increases the importance of these diseases every year. The objective of this work was to evaluate, by a sanitary test (blotter test), the severity of the fungus Fusarium verticilioides and the incidence of Stenocarpella maydis and Stenocarpella macrospora in corn grain from commercial hybrids, with and without in-field artificial inoculation, under two cultivation systems (conventional and direct sowing), over two crop seasons. The experiment was carried out under field conditions, using an experimental randomized blocks design, with three replications. In the laboratory, the severity of F. verticilioides and the incidence of S. maydis and S. macrospora ,the causative agents of ear rot in corn, were evaluated by the "blotter test" method. The blotter test evaluation allowed us to detect differences between the hybrids in their reactions to the fungi F. verticilioides, S. maydis and S. macrospora. The crop season and cultivation system used had the most influence on fungal infection in the hybrids. The direct sowing system showed an increase in the fungal infection responsible for causing grain rot. The use of artificial inoculation, in-field, to select genotypes resistant to the fungal agents causing the "grain rot complex" is efficient.
ABSTRACT
Neste trabalho, os objetivos foram avaliar a transmissibilidade de C. gloeosporioides mancha manteigosa (MM) em sementes e estudar o efeito do tratamento por fungicidas no controle do referido patógeno. Colheram-se frutos cerejas em plantas doentes e sadias, procedeu-se o despolpamento manual secando as sementes à sombra, retirou-se o endocarpo e, em seguida, realizaram-se os devidos tratamentos (fungicida) semeando-as em areia esterilizada. Avaliaram-se os sintomas de necrose e morte das plântulas e a incidência de C. gloeosporioides, por meio do teste de incubação em substrato de papel (blotter test), em sementes de cafeeiro tratadas e não tratadas com mistura comercial de benzimidazol+dimetilditiocarbamato (dose i.a. de 45 g+105 g/100 kg sementes). Com o desenvolvimento das plântulas, observaram-se em sementes de plantas com MM , altos índices de morte de plântulas, tendo apenas 5,2 por cento de sobrevivência, porém, com a abertura dos primeiros folíolos observaram-se, nestas plântulas, sintomas típicos da doença, com posterior morte das mesmas, enquanto que, a partir de sementes sadias, as plântulas apresentam-se vigorosas e em pleno crescimento. Já, com o uso do tratamento fungicida, observou-se efeito significativo, principalmente em sementes de plantas doentes (MM), nas quais verificou-se uma menor área abaixo da curva de progresso da doença e, consequentemente, menor incidência e severidade da doença. Pelo bloter test, em sementes tratadas, não houve crescimento de nenhum agente fúngico tanto para sementes de plantas com MM como para sementes de plantas sadias. Em sementes não tratadas, observou-se incidência de C. gloeosporioides em 29,8 por cento nas sementes de plantas com MM e 1,2 por cento de incidência em sementes de plantas sadias. Com base nestes resultados, fica evidenciado que neste patossistema, mancha manteigosa - cafeeiro, a principal via de transmissão de C. gloeosporioides é a semente.
The objectives in this study were: (i) the assessment of the transmission of blister spot(C. gloeosporioides) from seed to plant, and (ii) an observation study on the effect of seed treatment with fungicides used in the control of that disease. Natural transmission of the fungus was studied in seeds collected from both healthy and diseased 'Catucaí' coffee trees. The endocarp of the seeds was removed, and the seeds were sowed in sterilized sand substrate. The symptoms and the death process of hypocotyls were evaluated. Additionally, the incidence of blister spot (C. gloeosporioides) was assessed through blotter test in both fungicide treated and untreated seeds. A large number of hypocotyl deaths in seeds obtained from blister spot trees were observed, whereas seeds collected from healthy trees produced healthy seedlings. A total of 5.2 percent of the seedlings from blister spot trees were apparently healthy. But after the completion of the development of the first pair of leaves, blister spot symptoms were observed. When treated with fungicides (benzimidazol + dimethyldithiocarbamate), seeds from blister spot and healthy trees were free of fungi. Seeds collected from blister spot trees presented an incidence of 29.8 percent C. gloeosporioides , whereas seeds collected from healthy trees had an incidence of 1.2 percent. Therefore, based on the results of this study, it was clear that seeds were the principle means of transmission of blister spot in coffee.
ABSTRACT
A podridão peduncular, uma das principais doenças associadas à pós-colheita do mamão (Carica papaya L.), tem sido pouco investigada no que se refere a aspectos ecológicos e epidemiológicos nas condições brasileiras. Para que estudos sejam conduzidos nas referidas áreas é necessário que se disponham, a priori, de metodologias adequadas que permitam a reprodução dos sintomas dessa doença em condições de laboratório. No presente trabalho, o objetivo foi estabelecer um método de inoculação de frutos de mamão com o intuito de se reproduzir os sintomas da podridão peduncular, por meio de três procedimentos: 1) corte do pedúnculo seguido por deposição de um disco de micélio do fungo; 2) deposição de suspensão de conídios na região do pedúnculo, seguido por ferimento, e 3) aplicação de suspensão de conídios na região peduncular sem ferimento. Foram utilizados os fungos: Phoma caricae-papayae, Colletotrichum gloeosporioides, Botryodiplodia theobromae e Fusarium solani, sendo os frutos inoculados, submetidos a temperaturas de 20 e 25ºC. Os resultados indicaram que não houve efeito das temperaturas testadas no desenvolvimento dos fungos, nos diferentes métodos de inoculação. A maior severidade da podridão peduncular (notas de 1 a 5) foi observada em frutos inoculados pelo método de injeção no pedúnculo, independente do patógeno utilizado. Os fungos C. gloeosporioides e P. caricae-papayae foram os que apresentaram as maiores médias de severidade da doença seguido por B. theobromae e F. solani.
The stem-end-rot, one of the major post-harvest diseases in papaya (Carica papaya L.), has not been very well investigated concerning ecological and epidemiological aspects of the Brazilian conditions. So that studies can be developed in the referred to areas, it is necessary to use the right methodologies that allow the reproduction of the symptons of this disease in laboratory conditions. This study aimed to stablish a method for inoculating papaya fruits to reproduce the symptons of the stem-end-rot through tree procedures: 1) cut of the stem followed by deposition of fungal mycelium in agar discs; 2) deposition of the spore suspension into the stem's region followed by injuries, and 3) application of spore suspension in the stem's region without injuries. The inoculation was performed with the fungi P. caricae-papayae, C. gloeosporioides, B. theobromae e F. solani, and inoculated fruits were placed under temperatures of 20º and 25ºC. The results indicate that there were no effects of the tested temperatures in the development of all fungi, in the different methods of inoculation. The highest severity of stem-end-rot (score 1-5) was observed in fruits inoculated by the methods of injection in the stem, independing of the fungus used. The fungi C. gloeosporioides and P. carica-papaya presented the highest levels of severity in the disease followed by B. theobromae and F. solani.