Tissue fibrosis and its correlation with malignancy in canine mammary tumors / Fibrosis tisular y su correlación con malignidad en neoplasias mamarias caninas / Fibrose tecidual e sua correlação com a malignidade em neoplasias mamárias em cadelas

Abstract Background: Fibrosis is present in several pathologies associated with mammary carcinogenesis. Objective: To evaluate and quantify the fibrosis present in malignant and benign mammary neoplasms in bitches. Methods: Eighty-three samples were divided according to histopathological diagnosis into benign (n= 21) and malignant (n= 62) neoplasms. Haematoxylin-eosin and Masson's trichrome were used to locate the connective tissue, and the extent of fibrosis was assessed with image software. Results: Benign neoplasms were classified into adenomas (cystic, complex, and tubular), benign mixed tumor, and ductal and lobular hyperplasia. Malignant neoplasms were classified as carcinomas (complex, mixed tumor, in situ tubular, tubulopapillary, and solid). Grade I was the most prevalent histopathological class, followed by grade II and III. Fibrosis was classified as severe, moderate, or discrete. No significant (p >0.05) difference was observed for the percentage of fibrosis between malignant and benign group neoplasms. However, difference (p=0.028) was found for fibrosis percentage between histopathological subtypes of tumors. The benign subtype of lobular hyperplasia presented differences between cystic adenoma and benign mixed tumor. The in situ malignant tubular carcinoma subtype presented differences between solid and tubulopapillary carcinoma. Conclusions: Fibrosis in canine mammary tumors can be estimated with Massons's trichrome staining.

Resumen Antecedentes: La fibrosis está presente en diversas patologías asociadas con carcinogénesis mamaria. Objetivo: Analizar si existe una correlación entre fibrosis tisular y malignidad en tumores mamarios caninos. Métodos: 83 muestras de tejido mamario fueron divididas en masas benignas (n=21) y malignas (n=62), de acuerdo con sus características histopatológicas. En estas muestras se utilizaron las coloraciones de hematoxilina-eosina y tricromo de Masson para localizar el tejido conectivo y se analizó la proporción y cuantificación de fibrosis en los mismos con un software de imagen especializado. Resultados: Las masas mamarias benignas se diagnosticaron como adenomas (quístico, complejo y tubular), tumor mixto benigno, e hiperplasia ductal y lobular; las masas malignas, como carcinomas (complejo, tumor mixto, tubular in situ, túbulopapilar y solido). Los tumores grado I fueron los más prevalentes, seguidos por los grados II y III. La fibrosis se clasifico como discreta, moderada o severa. No se observó diferencia (p>0,05) en el porcentaje de fibrosis entre neoplasias benignas y malignas. No obstante, el porcentaje de fibrosis mostro diferencias (p=0,028) entre subtipos tumorales. La hiperplasia lobular fue diferente en relación a los adenomas quísticos y tumor mixto mamario. El subtipo maligno carcinoma tubular in situ fue diferente respecto a los carcinomas complejo, mixto maligno, sólido, y tubulopapilar. Conclusiones: La fibrosis en los tumores mamarios caninos se puede estimar por la tinción con tricromo de Masson.

Resumo Antecedentes: A fibrose participa em diversas patologias e ainda possui função adicional associada à carcinogênese mamária. Objetivo: Objetivou-se avaliar a fibrose e correlacionar com a malignidade nas neoplasias mamárias em cadelas. Métodos: 83 amostras foram divididas em dois grupos baseado no diagnóstico histopatológico: neoplasias benignas (n= 21) e neoplasias malignas (n= 62). Hematoxilina e eosina e Tricômico de Masson foram usadas para vizibilização de tecido conjuntivo e avaliação de fibrose através de programa de imagens. Resultados: As neoplasias benignas foram: adenoma (cístico, complexo e tubular), tumor misto benigno, hiperplasia ductal e lobular. As malignas foram: carcinoma complexo, em tumor misto maligno, tubular in situ, tubulopapilar e sólido. O grau histopatológico prevalente foi grau I, seguido do grau II e III. A fibrose nas neoplasias mamárias malignas foi classificada como severa, moderada e discreta. Não houve diferença significativa (p>0,05) na porcentagem de fibrose entre neoplasias malignas e benignas. A estatística revelou diferença significativa (p=0,028) na porcentagem de fibrose em relação ao diagnóstico histopatológico. O subtipo benigno hiperplasia lobular apresentou diferença entre o adenoma cístico e o tumor misto benigno. O subtipo maligno carcinoma tubular in situ apresentou diferença entre carcinoma complexo, misto maligno, sólido e tubulopapilar. Conclusões: A fibrose nos tumores mamários caninos pode ser estimada através da coloração de tricrômio de Masson.

Biocompatibility of polyamide 12 intramedullary rod after humeral consolidation in white Plymouth Rock birds / Biocompatibilidade de haste intramedular bloqueada de poliamida 12 após consolidação óssea umeral em aves Plymouth Rock branca

Technological and tissue engineering have enabled available, biologically inert, and low cost materials to be considered as viable alternatives in the surgical treatment of long bone fractures in birds. The aim of this study was to microscopically analyse osteotomized humerus of birds following the insertion of solid laser-sintered polyamide 12 rods in order to detect foreign body reaction and, thus, verify the bioinert property of the material in the bone fracture environment. Polyamide 12 intramedullary rods were inserted into the osteotomized humerus of 10 birds (white Plymouth Rock) and blocked using 2mm diameter cortical screws of varying lengths. The birds were operated at 60 days of age and monitored post-operatively for three months. Animals were euthanized at 150 days old and samples of the operated humerus collected for immunohistochemistry, light and scanning electron microscopy analysis. Results show bone consolidation without rejection of the implant and absence of inflammatory cells. Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) was expressed in the endothelial cells of the blood vessels at the site of the newly formed bone surrounding the implant, indicative of local angiogenesis. There was no bone growth on the surface of the rod; however, the implant did not interfere with the circumjacent bone repair. Thus, the findings of this study corroborate with the literature in characterizing polyamide as a bioinert material and, under the studied conditions, it can be concluded that polyamide 12 intramedullary rod is biocompatible and provides adequate bone consolidation in humeral fractures with no signs of rejection.(AU)

Com o desenvolvimento tecnológico e crescimento da engenharia de tecidos, o uso de materiais disponíveis, bioinertes e debaixo custo pode ser alternativa viável para o tratamento cirúrgico de fraturas em ossos longos nas aves. O objetivo do estudo foi realizar avaliação microscópica óssea após a implantação de haste maciça de poliamida, implantada em úmeros osteotomizados de galinhas para detectar reação do tipo corpo estranho, verificando a propriedade "bioinerte" do material no ambiente de fratura óssea. Foram utilizados 10 galos (Plymouth rock branca) e implantou-se a haste perfazendo o bloqueio das mesmas com parafusos corticais de 2 mm de diâmetro com comprimentos de acordo com a necessidade. As aves foram operadas aos 60 dias de vida e o acompanhamento pós-operatório ocorreu por três meses. Após a eutanásia, foram realizadas coletas do úmero operado (local de consolidação óssea) paraexame histopatológico, imuno-histoquímico e de microscopia eletrônica de varredura. Os resultados demonstraram consolidação óssea, sem presença de rejeição do material, com ausência de células inflamatórias. A neoformação óssea ao redor do implante expressou VEGF (fator de crescimento endotelial vascular) nas células endoteliais dos vasos sanguíneos caracterizando angiogênese no local. Na região de interface de tecido ósseo com a poliamida não foram observadas micro fraturas. Não houve crescimento ósseo na superfície da haste, porém a mesma não atrapalhou o reparo ósseo circunjacente. Assim, esse estudo corrobora com a literatura caracterizando a poliamida como um material bioinerte, e nas condições estudadas pode-se concluir que o uso da haste intramedular de poliamida 12 proporcionou consolidação óssea nesse modelo biológico nesse tipo de fratura, não havendo indícios de induzir rejeição.(AU)

Immunodetection of myeloid and plasmacytoid dendritic cells in mammary carcinomas of female dogs / Imunodetecção de células dendríticas mieloides e plasmocitoides nos carcinomas mamários em cadelas

Dendritic cells have attracted great interest from researchers as they may be used as targets of tumor immune evasion mechanisms. The main objective of this study was to evaluate the relationship between the dendritic cells (DCs) subpopulation in simple type mammary carcinomas in female dogs. Two groups of samples were used: the control group consisted of 18 samples of mammary tissue without changes and the tumor group with 26 simple type mammary carcinomas. In these groups, we evaluated the immunodetection of immature and mature myeloid DCs, plasmacytoid DCs and MHC-II. In mammary tumor, mature myeloid DCs predominated in the peritumoral region, while immature myeloid DCs and plasmacytoid DCs were evident in the intratumoral region. Immunostaining of MHC-II was visualized in mammary acini (control group), in tumor cells and inflammatory infiltration associated with tumors. The comparison between the control and tumor groups showed a statistically significant difference between immature myeloid DCs, mature myeloid DCs and plasmacytoid DCs. The immunodetection of MHC-II was not significant when comparing the groups. The predominance of immature DCs in the tumor group is possibly related to an inefficient immune response, promoting the development and survival of tumor cells. The presence of plasmacytoid DCs in the same group suggests a worse prognosis for female dogs with mammary tumors. Therefore, the ability of differentiation of canine dendritic cells could be influenced by neoplastic cells and by the tumor microenvironment...

As células dendríticas têm despertado grande interesse dos pesquisadores, pois podem ser alvo dos mecanismos de evasão imune do tumor. O objetivo principal deste estudo foi avaliar a relação entre as subpopulações de células dendríticas (DCs) nos carcinomas mamários do tipo simples em cadelas. Dois grupos de amostras foram utilizados, o grupo controle composto por 18 amostras de tecido mamário sem alterações e o grupo tumor com 26 carcinomas mamários do tipo simples. Nestes grupos foram avaliadas a imunodetecção de DCs mieloides imaturas e maduras, DCs plasmocitoides e de MHC-II. Nas mamas com tumor, as DCs mieloides maduras predominaram na região peritumoral, enquanto que as DCs mieloides imaturas e as DCs plasmocitoides foram evidentes na região intratumoral. A imunomarcação do MHC-II foi visualizada nos ácinos mamários (grupo controle), nas células tumorais e no infiltrado inflamatório associado aos tumores. Na comparação entre os grupos controle e tumor houve diferença estatística significativa entre as DCs mieloides imaturas, DCs mieloides maduras e DCs plasmocitoides. A imunodetecção de MHC-II não foi significativa na comparação entre os grupos. A predominância de DCs imaturas no grupo tumor, possivelmente, está relacionada com uma resposta imune ineficiente, favorecendo o desenvolvimento e a sobrevivência das células tumorais. A presença das DCs plasmocitoides no mesmo grupo sugere um prognóstico pior para cadelas com tumores de mama. Portanto, a capacidade de diferenciação das células dendríticas caninas poderia ser influenciada pelas células neoplásicas e pelo microambiente tumoral...

Avaliação da imunomarcação de células-tronco tumorais em carcinossarcomas mamários e carcinomas em tumores mistos em cadelas / Evaluation of immunostaining of tumor stem cells in mammary carcinosarcomas and carcinomas in mixed tumors in bitches

As células-tronco tumorais (CTTs) pertencem a uma pequena população de células dentro do tumor com propriedades de autorrenovação e diferenciação em outros tipos celulares. Neste estudo avaliou-se o comportamento tanto das porções mesenquimais quanto das epiteliais de seis carcinossarcomas (CSs), 11 carcinomas em tumores mistos (CTMs) grau I, 11 grau II e 10 grau III. Nas porções epiteliais dos CS e CTM foram observadas imunomarcações para os anticorpos CD44, CD24, Oct-4 e ALDH-1. Nas porções mesenquimais dos CS, nas porções epiteliais dos CTMs graus II e III não houve imunomarcação para o ALDH-1. Concluiu-se que as CTTs são expressas em proporções iguais tanto nas porções mesenquimais quanto nas epiteliais dos CSs e ausentes nas porções mesenquimais bem diferenciadas de CTMs.

Cancer stem cells belong to a small population of cells within the tumor with properties of self-renewal and differentiation into other cell types. In this study, the behavior of both portions, mesenchymal and epithelial, was evaluated. Six carcinosarcomas (CSs), 11 carcinomas within mixed tumors (CWMTs) grade I, 11 grade II, and 10 grade III were evaluated. In the epithelial portions of the CS and CWMTs was observed immunostaining for antibodies CD44, CD24, Oct-4 and ALDH-1. In the mesenchymal portions of the CS, in the epithelial portions of CMTs grades II and III no immunostaining for ALDH-1 was found. It was concluded that the tumor stem cells are expressed in equal proportions in the epithelial and mesenchymal portions of the CS. No immunostaining in the mesenchymal portions of well-differentiated CWMTs was seen.