Ensaios de padronização do teste ELISA para diagnósticoda cisticercose bovina utilizando antígenos de larvade Taenia crassiceps / ELISA test standardization for the diagnosis of bovine cysticercosis employing Taenia crassiceps metacestode antigens

Os antígenos total e vesicular de Taenia crassiceps e soros-controle de bovinos positivos e negativos para a cisticercose foramcomparados por meio de alguns parâmetros de padronização do teste ELISA, visando avaliar o seu desempenho no diagnósticoda referida doença. Os parâmetros avaliados foram: diferentes concentrações dos antígenos, diluições de soros e conjugados,marcas de placa e substâncias bloqueadoras das placas. As diluições 1:25 de soro e 1:2.500 de conjugado para o antígenode líquido vesicular e 1:5.000 para o antígeno total, o leite desnatado e as maiores concentrações dos antígenos testadas (1,2 e 4 µg/orifício) foram os critérios de padronização que proporcionaram maior diferenciação entre soros positivos e negativos,conseqüentemente, melhor desempenho do teste ELISA.

Using the cyst fluid and the total antigens of Taenia crassiceps and positive and negative bovine control sera, some standardizationparameters of one ELISA were compared, in order to evaluate its performance in the diagnosis of the bovine cysticercosis. Thereferred parameters were different antigen concentrations, dilutions of sera and conjugated, plate marks and blocking substances.The 1:25 dilution sera and 1:2.500 dilution conjugated for the cyst fluid antigen and 1:5.000 for the total antigen, the skimmedmilk and the largest antigens concentrations (1, 2 and 4 µg/well) improved the differentiation among positive and negative sera,consequently, they were the best criteria for the bovine cysticercosis determination employing the ELISA.

Comparative evaluation of different immunoassays for the detection of Taenia solium cysticercosis in swine with low parasite burden

Seven swine were experimentally infected with Taenia solium eggs and blood samples from each animal were periodically collected. At the end of the experiment (t140) the animals did not show clinical aspects of cysticercosis or parasites in tongue inspection. All animals were slaughtered and cut into thin slices in searching for cysts. The number of cysts found in each animal varied from 1 to 85. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) tests for antibody (Ab) detection and for antigen (Ag) detection were performed, which presented respectively 71 and 57 percent of positivity. By immunoblot (IB), using 18/14(T. crassiceps Ag) or lentil-lectin-purified glycoproteins from T. solium Ag (LLGP) as Ag, five (71 percent) and six (86 percent) animals were positive, respectively. The association between Ag-ELISA with any IB (18/14 or LLGP) allowed the detection of all animals at 140 days post-experimental infection (days p.e.i.). The use of IB 18/14 combined to the Ag-ELISA allowed the detection of all animals since 70 days p.e.i., and the association between IB LLGP and Ag-ELISA allowed the detection of all animals since 112 days p.e.i. While all animals could be considered healthy by conventional screening tests, the use of immunoassays for detecting Ab and Ag showed better accuracy; therefore it would be more useful than usual clinical examination for screening cysticercosis in slightly infected pigs.

Metacercárias de Ascocotyle (Phagicola) longa Ransom, 1920 (Digenea: Heterophyidae), em Mugil platanus, no estuário de Cananéia, SP, Brasil / Ascocotyle (Phagicola) longa Ransom, 1920 (Digenea: Heterophylidae) metacercariae, in Mugil platanus in estuarin of Cananéia, SP, Brazil

Estudou-se no estuário de Cananéia, litoral do estado de São Paulo, Brasil, a presença de Ascocotyle (Phagicola) longa Ransom, 1920 (Digenea: Heterophylidae), trematódeo, em tainha (Mugil platanus, Günther, 1880). Foram realizadas amostragens a fresco e cortes histológicos em tecidos provenientes de 61 exemplares. A presença de metacercárias foi comprovada em 100 por cento dos peixes examinados, com a seguinte distribuição: coração (21,6 por cento), fígado (19,7 por cento) e rins (58,6 por cento). As alterações histológicas no tecido cardíaco foram caracterizadas pela presença de um granuloma parasitário formado por uma cápsula de tecido conjuntivo ao redor do parasita, levando a um edema generalizado. Para determinar a infecção em alevinos de tainha da espécie M. platanus, foram capturados 100 exemplares nas entradas de córregos da região estuarino-lagunar. Esses peixes foram eviscerados para a pesquisa de metacercárias pelo exame a fresco, verificando-se que 100 por cento dos alevinos não estavam infectados.

The present research was carried out the coast of the state of São Paulo, Brazil, when it was studied the presence of Ascocotyle (Phagicola) longa Ransom, 1920 (Digenea: Heterophylidae), trematode, in mullet (Mugil platanus, Günther, 1880). Fresh samples and histological tissues sections from 61 animals were obtained. The results showed presence of metacercariae of A. (P.) longa in 100 percent of the fish examined, with the following distribution: heart (21.6 percent), liver (19.7 percent) and kidneys (58.6 percent). Histological alterations in cardiac tissues were characterized by the presence of a parasitic granuloma formed by a connective tissue capsule around the parasite, leading to generalized edema. To determine the infection in juvenile grey mullets of the M. platanus species, 100 of them were captured in the stream entrances of the estuary region, each fish was individually sacrificed and fresh mounts were prepared to determine the presence of metacercariae, demonstrating that 100 percent of the juveniles were not infected.

Effect of Cysticercus cellulosae fractions on the respiratory burst of pig neutrophils

Neutrófilos, eosinófilos e macrófagos são células que interagem com os parasitas no corpo do hospedeiro desenvolvendo atividade antiparasitária. A reação inicial destes leucócitos é a geração de espécies reativas de oxigênio (ERO) a fim de expulsar os parasitas. No presente trabalho estudou-se o efeito da fração total, de escolex e de membrana de Cysticercus cellulosae sobre a explosão respiratória de neutrófilos de suínos. A produção de peróxido de hidrogênio (H2O2) pelos neutrófilos incubados com as frações de C. cellulosae apresentou acréscimo de 190% (extrato total), 120% (escolex) e 44% (membrana). Alta atividade de catalase (33%, 28% e 28% para extrato total, escolex e membrana respectivamente) foi observada nos neutrófilos incubados com as frações de metacestodeo, podendo representar a própria proteção celular do neutrófilo. Frações de escolex e de membrana aumentaram a capacidade fagocitária dos neutrófilos (44% e 28%, respectivamente). Por outro lado, a fração total do cisticerco não alterou a capacidade fagocitária dos neutrófilos, o que pode estar relacionada com modificações na função da membrana celular causadas pela alta produção de ERO na presença da fração total. O extrato total de C. cellulosae é tóxico para os neutrófilos, indicada pela diminuição da capacidade fagocitária, provavelmente pela indução de alto nível de ERO. A diferença de toxicidade do extrato total, de escolex e de membrana para os neutrófilos pode ocorrer pelo efeito antigênico presente no fluido vesicular no extrato total de C. cellulosae.

Sensibilizaçäo alérgica à Blatella germanica (Insecta: Dyctyoptera) em pacientes com asma e rinite na cidade de Säo Paulo, Brasil / Allergic sensitization to Blatella germanica (Insecta: Dyctyoptera) in patients with asthma and rhinitis in Säo Paulo city, Brazil

Em 203 pacientes com história de asma e rinite e com crises respiratórias ao contato com pó domiciliar, foram realizados testes cutâneos com B. germanica, pesquisa de IgE específica pelo método ELISA ("Enzyme-Linked Immunosorbent Assay") e prova de Immunoblotting. Em 37, as provas cutâneas foram positivas, e em 14 foram demonstrados anticorpos IgE específicos em concentraçöes baixas ou moderadas e apenas dois com nível elevado. Pela prova de "Immunoblotting", em oito soros, os anticorpos reconheceram fraçöes alergênicas presentes no extrato total. Sete pacientes apresentaram também anticorpos para a P. americana, em concentraçöes semelhantes àquelas determinadas para a B. germanica.