ABSTRACT
El crecimiento in vitro de unidades formadoras de colonias granulomonocíticas (UFC-GM) en sangre periférica (SP) y médula ósea (MO) humana requiere de fractores estimuladores denominados actividad estimuladora de colonias (AEC). El ensayo de Pike & Robinson emplea como fuente de AEC capa alimentadora (CA) compuesta por leucocitos de SP inmovilizados en agar. No obstante que este ensayo de bicapa presenta desventajas técnicas es ampliamente utilizado. Los sobrenadantes tisulares y celulares con actividad biológica para la UFC-GM, también conocidos como medios condicionados (MC), eliminan lsos incovenientes teécnicos de la estimulación con CA. En el presente trabajo se prepararon dos MC, uno de CA (MC-CA) y otro de leucocitos estimulados con fitohemaglutinina (MC-LEF). La AEC de ambos MC se comparó con la producida por la CA. Las tres AEC, evaluadas por el número de racimos (agregados celulares con 3 a 39 células) y de colonias (agregados celulares con -> 40 células) presentes en el cultivo, se probaron en células obtenidas de SP de 17 individuos sanos, y en células de SP (17 muestras) y MO (12 muestras) de enfermos con leucemias mieloides. Se encontró que el MC-CA indujo un número significativamente menor de agregados celulares tanto en muestras de sujetos normales como de enfermos leucémicos al compararlo con el ensayo de CA. En muestras de pacientes con leucemia, el crecimiento clonal mediado por el MC-LEF fue similar al encontrado con CA. En cambio, la adición de MC-LEF a muestras de sujetos sanos dio como resultado un número promedio de colonias significativamente menor al observado con CA. Estos resultados indican que el MC-CA es una fuente inapropiada de AEC para muestras provenientes de sujetos normales y de pacientes leucémicos, mientras que la AEC derivada del MC-LEF mantiene adecuadamente el crecimiento de UFC-GM en muestras de enfermos con leucemia, pero no en muestras de personas normales. Basados en estos hallazgos y en los incovenientes técnicos del ensayo de Pike & Robinson, se concluye que el MC-LEF permite una mejor evaluación de la granulomonopoyesis in vitro en pacientes con leucemias mieloides