Allergenic response induced by Pterobothrium crassicolle (Cestoda: Trypanorhyncha) extracts in murine model / Resposta alergênica induzida por extratos de Pterobothrium crassicolle (Cestoda: Trypanorhyncha) em modelo murino

Abstract The aim of this study was to determine the allergenic activity of components present in crude extracts of Pterobothrium crassicolle plerocerci (CPE) and blastocysts (CBE) obtained from Micropogonias furnieri in a murine model. Two groups of seven animals each received 50 µg of CPE or CBE on days 1, 35 and 120. Serum samples were tested by ELISA and Immunoblotting. Specific IgG and IgE levels were detected by ELISA, showing specific humoral responses for the primary immunization for both immunoglobulins and continuously growing titers for IgE. Positive Passive Cutaneous Anaphylaxis tests in rats sensitized with anti-CBE sera and tested by CBE, showed biologically, the allergenic activity of the extracts. The CPE and CBE showed some different recognition regions but both experimental groups recognized all regions of the extracts when tested for cross reactions, showing that CPE and CBE could share antigenic recognition sites.

Resumo O objetivo deste estudo foi determinar a atividade alergênica de componentes presentes em extratos crus de plerocercos (CPE) e de blastocistos de Pterobothrium crassicolle (CBE), obtidos de Micropogonias furnieri, em modelo murino. Dois grupos de sete animais receberam cada um 50 µg de CPE ou CBE nos dias 1, 35 e 120. As amostras de soro foram testadas por ELISA e Imunoblot. Os níveis específicos de IgG e IgE foram detectados por ELISA, mostrando respostas humorais específicas para a imunização primária para ambas as imunoglobulinas e títulos crescentes de IgE. Testes positivos de Anafilaxia Cutânea Passiva em ratos sensibilizados com soros anti-CBE e testados por CBE, demonstraram biologicamente, a atividade alergênica dos extratos. O CPE e o CBE evidenciaram algumas regiões de reconhecimento diferentes, mas ambos os grupos experimentais reconheceram todas as regiões dos extratos, quando testados para reações cruzadas, mostrando que o CPE e o CBE poderiam compartilhar locais de reconhecimento antigênico.

Sensitization with Eustrongylides sp. (Nematoda: Dioctophymatidae) antigens induce production of specific IgG and IgE in murine model / Sensibilização com antígenos de Eustrongylides sp. (Nematoda: Dioctophymatidae) induzindo a produção de IgG e IgE em modelo murino

Abstract Fish consumption plays an important role in human diet. Hoplias malabaricus, commonly known as traíra, is a freshwater fish widely appreciated in several Brazilian states and frequently infected by Eustrongylides sp. fourth-instar larvae (L4). The aim of the present study was to evaluate allergenic potential of Eustrongylides sp. L4 crude extract (CEE). BALB/c mice were immunized intraperitoneally (IP) by 10 μg CEE with 2 mg of aluminum hydroxide on days 0 and 35. Specific IgG and IgE antibody levels were determined after immunization and cellular immunity was evaluated by assessing intradermal reaction in ear pavilion. Epicutaneous sensitization was performed in dorsal region by antigen exposure using a Finn-type chamber containing 50 μg of CEE or saline solution, followed by evaluation of specific antibody levels. IP immunization resulted in a gradual increase in IgG antibody levels and transitory IgE production. Significant increase in ear thickness was observed in cellular hypersensitivity reaction. In case of antigen exposure by epicutaneous route, CEE was able to induce meaningfully increased levels of specific IgG and IgE antibodies as well as heightened cellular immunity. Both intraperitoneal immunization and epicutaneous contact with Eustrongylides sp. larval antigens were observed for first time to be capable of inducing immunological sensitization in mice.

Resumo Consumir peixe constitui papel importante na dieta humana. Hoplias malabaricus, comumente chamado de traíra, peixe de água doce largamente apreciado no Brasil, é frequentemente infectado com larvas de quarto estágio (L4) de Eustrongylides sp. O presente estudo objetivou avaliar o potencial alergênico do Extrato Bruto de L4 de Eustrongylides sp. (EBE). Camundongos BALB/c foram imunizados intraperitonealmente (IP) por 10 μg de EBE com 2 mg de hidróxido de alumínio nos dias 0 e 35. Após imunização, determinaram-se níveis específicos de anticorpos IgG e IgE e avaliou-se a imunidade celular pela reação intradérmica no pavilhão auricular. Realizou-se sensibilização epicutânea na região dorsal pela exposição ao antígeno, utilizando-se câmara tipo Finn, contendo 50 μg de CEE ou solução salina. Após exposições, foram avaliados níveis específicos de anticorpos. Na imunização via IP, houve aumento gradual nos níveis de anticorpos IgG e produção de IgE transitória. Foi observado aumento significativo na espessura do pavilhão auricular na reação de hipersensibilidade celular. Na exposição ao antígeno pela via epicutânea, o EBE induziu aumento significante nos níveis de anticorpos IgG e IgE específicos e induziu imunidade celular. Pela primeira vez, observou-se que a imunização intraperitoneal e contato epicutâneo com antígenos larvares de Eustrongylides sp. são capazes de induzir sensibilização imunológica em camundongos.

Frequency of enteroparasitoses in preschool children attending daycare centers: a survey applying parasitological and immunological methods

The present study evaluated the frequency of intestinal parasitoses in children in public day care centers applying parasitological and immunological diagnostic methods. Fecal samples from 121 children from six public daycare centers were analyzed using parasitological techniques. Epidemiological data were obtained through a questionnaire, where parents and / or guardians were asked, for instance, whether the children had contact with soil, ate raw food, such as vegetables or raw or undercooked meat, normally walked around barefoot or had contact with animals. Fecal samples from 82 children were also tested for Giardia intestinalis and Cryptosporidium sp. coproantigen using the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) which was also used for Entamoeba coproantigen detection only in samples that tested positive for the parasite by parasitological stool exam/optical microscopy. Intestinal parasite infection was noted in 23.1% (28/121) of the children. The most frequent parasite was Giardia intestinalis (13.2%), followed by Entamoeba coli (5.8%), Blastocystis spp. (1.7%), Endolimax nana (1.7%), Enterobius vermicularis (1.7%), Cystoisospora belli (0.8%), Entamoeba histolytica/E. dispar complex (0.8%), and Ascaris lumbricoides (0.8%). Positivity for parasite infection using parasitological stool exams was significantly associated with age groups, with a higher frequency in 4 to 6 year old children (p=0.03). No association or significant variations were noted in the prevalence of intestinal parasites in relation to the epidemiological variables studied. All samples were negative for Cryptosporidium sp. and Entamoeba histolytica detected by immunological testing, and 17.1% (14/82) children tested positive for Giardia intestinalis, although using parasitological exam/optical microscopy, only 14.6% (12/82) tested positive. The high incidence of intestinal parasites, especially protozoans, suggests probable interpersonal transmission among the children, environmental contamination, or even contaminated food/water intake. Thus, consolidation of preventive measures and efficient diagnostic resources as well as control of intestinal parasites and patient treatment are of utmost importance

Conhecimentos de escolares e funcionários da rede pública de Ensino sobre as parasitoses intestinais / Knowledge of students and employees of public school system on the intestinal parasites

O desconhecimento ou nível insatisfatório de informações sobre as enteroparasitoses e sua prevenção, aliados ao baixo nível socioeconômico, educacional e insuficiência de saneamento básico, têm sido apontados como fatores de risco para a aquisição dessas infecções. Neste estudo foram averiguados os conhecimentos de estudantes do 3º ao 7° ano do Ensino Fundamental e dos funcionários de sete escolas Municipais de Niterói, RJ, Brasil. Foram aplicados questionários, e as respostas foram avaliadas como adequadas, inadequadas, incompletas, não soube responder ou não respondeu. Entre os 335 estudantes, observou-se conhecimento mediano sobre habitat (47,5 %), prevenção (48,4 %) e sintomatologia (45,1 %). Desses, 43,3 % demonstraram conhecimento inadequado sobre transmissão. E 51,6 % dos estudantes fizeram associação de verminoses com vermes, e somente 2,7 % apresentaram conhecimento sobre protozoários. Em 62 funcionários, observou-se conhecimento adequado sobre definição, exemplos, habitat, transmissão, sintomatologia e prevenção. Tais resultados evidenciaram a ocorrência de informações fragmentadas sobre a infecção por enteroparasitos entre os escolares e mais corretas entre os funcionários. Torna-se importante efetuar melhor abordagem do tema, referente aos conteúdos de ciências, e ampliar este arcabouço teórico para interferir na difusão da informação e na formação de cidadãos críticos.

Lack of knowledge or unsatisfactory information about the enteroparasites and preventivemeasures, combined with low socioeconomic, educational and poor sanitation status, havebeen appointed as a risk factor for acquiring these parasites. This study aimed at identifying the knowledge of students of 3rd to 7th grade of elementary school and of employees of seven municipal schools of Niterói, RJ, Brazil. Questionnaires were applied, and the answers were ratedas adequate, inadequate, incomplete, could not answer or did not answer. Among 335 students,the median knowledge on habitat (47.5 %), prevention (48.4 %) and symptoms (45.1 %) were detected. Of these, 43.3 % showed an inadequate knowledge on transmission; 51.6 % associatedthe verminosis with worms, and 2.7 % only had knowledge about protozoa. The adequate knowledge on definition, examples, habitat, transmission, symptoms and prevention were observed among62 employees. Occurrence of fragmented information on the enteroparasites among studentsand the correct knowledge among employees. Thus, it is crucial to perform the better approach, referring to science content, aiming to promote the expansion of this theoretical frameworkfor interfering with the information dissemination and in the development of critical citizens.

Conhecimentos de escolares e funcionários da Rede Pública de Ensino sobre as parasitoses intestinais / Knowledge of students and employees of Public School System on the intestinal parasites

O desconhecimento ou nível insatisfatório de informações sobre as enteroparasitoses e sua prevenção, aliados ao baixo nível socioeconômico, educacional e insuficiência de saneamento básico, têm sido apontados como fatores de risco para a aquisição dessas infecções. Neste estudo foram averiguados os conhecimentos de estudantes do 3º ao 7º ano do Ensino Fundamental e dos funcionários de sete escolas Municipais de Niterói, RJ, Brasil. Foram aplicados questionários, e as respostas foram avaliadas como adequadas, inadequadas, incompletas, não soube responder ou não respondeu. Entre os 335 estudantes, observou-se conhecimento mediano sobre habitat (47,5 %), prevenção (48,4 %) e sintomatologia (45,1 %). Desses, 43,3 % demonstraram conhecimento inadequado sobre transmissão. E 51,6 % dos estudantes fizeram associação de verminoses com vermes, e somente 2,7 % apresentaram conhecimento sobre protozoários. Em 62 funcionários, observou-se conhecimento adequado sobre definição, exemplos, habitat, transmissão, sintomatologia e prevenção. Tais resultados evidenciaram a ocorrência de informações fragmentadas sobre a infecção por enteroparasitos entre os escolares e mais corretas entre os funcionários. Torna-se importante efetuar melhor abordagem do tema, referente aos conteúdos de ciências, e ampliar este arcabouço teórico para interferir na difusão da informação e na formação de cidadãos críticos.

Lack of knowledge or unsatisfactory information about the enteroparasites and preventive measures, combined with low socioeconomic, educational and poor sanitation status, have been appointed as a risk factor for acquiring these parasites. This study aimed at identifying the knowledge of students of 3rd to 7th grade of elementary school and of employees of seven municipal schools of Niterói, RJ, Brazil. Questionnaires were applied, and the answers were rated as adequate, inadequate, incomplete, could not answer or did not answer. Among 335 students, the median knowledge on habitat (47.5 %), prevention (48.4 %) and symptoms (45.1 %) were detected. Of these, 43.3 % showed an inadequate knowledge on transmission; 51.6 % associated the verminosis with worms, and 2.7 % only had knowledge about protozoa. The adequate knowledge on definition, examples, habitat, transmission, symptoms and prevention were observed among 62 employees. Occurrence of fragmented information on the enteroparasites among students and the correct knowledge among employees. Thus, it is crucial to perform the better approach, referring to science content, aiming to promote the expansion of this theoretical framework for interfering with the information dissemination and in the development of critical citizens.

Toxoplasmosis-rllated knowledge among pregnant nd postpartum women attended inn public health units in niterói, rio de janeiro, Braill / Conhecimento sobre toxoplasmose entre gestantes e puérperas atendidas na rede pública de saúde do município de Niterói, Rio de Janeiro, Brasil

The present study conducted a toxoplasmosis-related knowledge level survey with 400 pregnant and puerperal women attended in public health units in the municipality of Niterói, Rio de Janeiro. Only 111 (27.8%) women claimed to know about the disease. Most of them (n = 289; 72.2%) had never heard about toxoplasmosis nor knew how to prevent the infection by Toxoplasma gondii. A significant difference (p = 0.013) regarding the presence of anti-T. gondii IgG was observed between women who claimed to know about the disease and those who had never heard about it. These results highlight the importance of a systematic serological screening process for toxoplasmosis, as well as the importance of primary prevention by accurate information during prenatal care, an important Public Health action to be implemented.

Este estudo teve por objetivo realizar um levantamento do conhecimento de 400 gestantes e puérperas atendidas na rede pública de saúde do município de Niterói, Estado do Rio de Janeiro sobre a toxoplasmose. Apenas 111 (27,8%) participantes relataram conhecer a doença. A maioria 289 (72,2%) nunca ouviu falar sobre a toxoplasmose, principalmente sobre as formas de prevenção da infecção pelo Toxoplasma gondii. Foi encontrada diferença significativa entre as pacientes que disseram conhecer a toxoplasmose e aquelas que relataram desconhecer a doença com relação à presença de anticorpos IgG anti- T.gondii (p = 0,013). Estes resultados permitem ressaltar a importância do rastreamento sorológico sistemático na infecção toxoplásmica, bem como a prevenção primária por meio de informações corretas durante o pré-natal, sendo esta uma importante medida de saúde pública a ser implementada.

Prevalence and risk factors for Toxoplasma gondii infection among pregnant and postpartum women attended at public healthcare facilities in the City of Niterói, State of Rio de Janeiro, Brazil

Introduction To determine the prevalence of immunoglobulin G (IgG) and immunoglobulin M (IgM) anti-Toxoplasma gondii antibodies among pregnant and postpartum women attended within the public healthcare system in Niterói, State of Rio de Janeiro, and to detect possible exposure factors associated with T. gondii infection in this population. Methods IgM and IgG anti-T. gondii antibodies were investigated in 276 pregnant and 124 postpartum women by using the indirect immunofluorescence (IFAT) and immunoenzymatic assay (ELISA) techniques. The participants were selected by convenience sampling. All these 400 patients filled out a free and informed consent statement, answered an epidemiological questionnaire and were informed about the disease. Results Among the 400 samples analyzed, 234 (58.5%) were reactive to IgG anti-T. gondii antibodies, according to the IFAT and/or ELISA assay. One pregnant woman was found to be reactive to IgM anti-T. gondii antibodies, with an intermediate IgG avidity test. Risk factor analysis showed that seropositivity was significantly associated (p<0.05) with age, contact with cats and presence of rodents at home. Through a logistic regression model, these associations were confirmed for age and contact with cats, while education at least of the high school level was found to be a protective factor. Conclusions The prevalence rate of IgG anti-T. gondii antibodies in the City of Niterói was high and the risk factors for infection detected after multivariate analysis were: age over 30 years, contact with cats and education levels lower than university graduate level. .

Ectopic dirofilariosis in two dogs from Rio de Janeiro state, Brazil / Dirofilariose ectópica em dois cães do estado do Rio de Janeiro, Brasil

Report of two canine dirofilariosis cases of ectopic location in the state of Rio de Janeiro. This is the first report of erratic migration for this parasitosis in dogs in the state, calling attention to the short period of time between the two cases. The fact that the area is endemic for this parasite, its zoonotic potential and the report of human cases in the state, demonstrates that authorities should be alerted to the control programs of dirofilariosis along with the pathogenic profile of the infections.

Relato de dois casos de dirofilariose canina de localização ectópica no Estado do Rio de Janeiro. Este é o primeiro relato de migração errática para esta parasitose em cães no Estado, e chama a atenção o curto espaço de tempo entre os dois casos. O fato da região ser endêmica para a parasitose, seu caráter zoonótico e o relato de casos humanos no Estado, demonstram que as autoridades competentes devem estar atentas aos programas de controle da dirofilariose assim como no perfil patogênico da infecção.

Estudo da contaminação de praças públicas de três municípios do Estado do Rio de Janeiro, Brasil, por ovos e larvas de helmintos / Evaluation of the contamination of public squares of three regions of the State of Rio de Janeiro, Brazil, by eggs and larvae of helminths

Este estudo objetivou avaliar a contaminação de praças públicas de três municípios do estado do Rio de Janeiro por ovos e larvas de helmintos, observando-se também a presença de fezes de animais e de condições ambientais favoráveis para o desenvolvimento das estruturas infectantes. Foram analisadas amostras de 60 praças pelas técnicas de centrífugo-flutuação e sedimentação espontânea. deste total, 16 (26,7por cento) apresentaram-se positivas para a presença de ovos semelhantes aos de ancilostomídeos e 2 (3,3por cento), para Toxocara sp; em ambos os casos, foram analisadas amostras tanto de fezes quanto de solo. Foram encontradas 17 (34,7por cento) amostras fecais positivas e, em apenas 2 (3,3por cento) praças, o solo apresentou ovos desses parasitos. Foram observadas larvas de nematóides em 34 (56,7por cento) praças, incluindo todas as que foram positivas para ovos dos parasitos, exceto uma. Os resultados demonstram a viabilidade da transmissão de zoonoses causadas por helmintos de cães e gatos para a população que frequenta esses locais.

Estudo histopatológico e imuno-histoquímico de camundongos infectados por Toxoplasma gondii e alimentados com micotoxinas / Histopathologic and immunohistochemical study of mice infected for Toxoplasma gondii and fed with mycotoxins

A toxoplasmose,importante infecção em gestantes,vem se mostrando também como uma das enfermidades oportunistas mais freqüentes em indivíduos imunocomprometidos.Dentre as...concentrações já são capazes de causar efeitos imunomodulatórios.Sendo assim,com o presente trabalho buscou-se avaliar por meio da análise histopatológica e imuno-histoquímica o curso da infecção pelo Toxoplasma gondii em camundongos alimentados com micotoxinas.Para tanto,camundongos da linhagem C57BL/6,infectados pela cepa ME49 do T.gondii,foram alimentados com ração experimental contendo baixas dosagens das micotoxinas: aflatoxina B1,fumonisina B1,citrinina e ocratoxina A, isoladas ou associadas.Os animais foram divididos em grupos de acordo com a infecção e alimentação da seguinte forma:C-C(controle-controle),C-F(controle-fumonisina B1), C-FA(controle-fumonisina B1 + aflatoxina B1),C-CO (controle-citrinina + ocratoxina A),C-MIX(controle-mix das 4 micotoxinas),I-C(infectado-controle),I-F(infectado-fumnonisina B1),I-FA(infectado-fumonisina B1 + aflatoxina B1),I-CO(infectado-citrinina + ocratoxina A),I-MIX (infectado-mix das 4 micotoxinas).Para a visualização de lesões,assim como de estruturas parasitárias e sua dispersão nos tecidos do hospedeiro,foram analisadas amostras de cérebro,fígado,rim,pulmão,musculaturas esquelética e cardíaca.Os animais alimentados com micotoxinas e infectados com T.gondii apresentaram as lesões mais acentuadas foram representadas por quadros de encefalite,hepatite,focos de necrose encefálica e hepática,mostrando que a associação entre parasitismo e micotoxicose causou um agravamento nas lesões uma vez que animais somente infectados ou somente intoxicados apresentaram alterações histopatológicas mais brandas.O grupo I-CO apresentou ainda um quadro de glomérulo-nefrite que poderia estar relacionado à associação da infecção com a micotoxicose,uma vez que não foi observada alteração em grupos com tais eventos ocorrendo separadamente.A fumonisina B1(isolada ou associada à outra micotoxina)foi responsável por alterações celulares como gigantismo nuclear e hipertrofia celular e células atípicas em tecido hepático.Essa micotoxina foi relacionada também a quadros de desmielinização em tecido cerebral.A presença de cistos ou formas livres do T.gondii foi constatada tanto em animais controle quanto nos alimentados com micotoxinas,mostrando que a cepa do parasita nesta linhagem de camundongos,apresenta formas características de fase aguda e crônica da infecção.