Flow cytometry as a tool in the evaluation of blood leukocyte function in Chelonia mydas (Linnaeus, 1758) (Testudines, Cheloniidae) / A citometria de fluxo como ferramenta para avaliar a função celular de leucócitos sangüíneos de Chelonia mydas (Testudines, Cheloniidae)

Chelonia mydas is a sea turtle that feeds and nests on the Brazilian coast and a disease called fibropapillomatosis is a threat to this species. Because of this, it is extremely necessary to determine a methodology that would enable the analysis of blood leukocyte function in these sea turtles. In order to achieve this aim, blood samples were collected from C. mydas with or without fibropapillomas captured on the São Paulo north coast. Blood samples were placed in tubes containing sodium heparin and were transported under refrigeration to the laboratory in sterile RPMI 1640 cell culture medium. Leukocytes were separated by density gradient using Ficoll-PaqueTM Plus, Amershan Biociences®. The following stimuli were applied in the assessment of leukocyte function: Phorbol Miristate-Acetate (PMA) for oxidative burst activity evaluation and Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) Bio Particles®, Alexa Fluor® 594 conjugate for phagocytosis evaluation. Three cell populations were identified: heterophils, monocytes and lymphocytes. Monocytes were the cells responsible for phagocytosis and oxidative burst.

Chelonia mydas é uma tartaruga marinha que freqüenta o litoral brasileiro para alimentação e nidificação e uma doença denominada fibropapilomatose é uma das mais importantes ameaças à sobrevivência dessa espécie. Desta forma, a definição de uma metodologia que permita analisar a função dos leucócitos sangüíneos torna-se extremamente necessária. Foram utilizadas amostras sangüíneas de C. mydas com e sem fibropapilomas capturadas no litoral norte do estado de São Paulo. As amostras sangüíneas foram colocadas em tubos contendo heparina sódica e transportadas em meio de cultura celular RPMI 1640 estéril e sob refrigeração. Os leucócitos foram obtidos por gradiente de densidade usando Ficoll-PaqueTM Plus, Amershan Biociences®. Os estímulos aplicados foram Miristato Acetato de Phorbol (PMA) para avaliação de burst oxidativo e Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) Bio Particles®, Alexa Fluor® 594 conjugate para avaliação de fagocitose. Foram identificadas três populações celulares: heterófilos, monócitos e linfócitos. Os monócitos foram as células responsáveis pela fagocitose e pelo burst oxidativo.

Chondroma in rufescent tiger-heron (Tigrisoma leneatum): case report

The paper describes a chondroma affecting the left metacarpus of a free-ranging rufescent tiger-heron (Tigrisoma lineatum). There are very few reports of such neoplastic process in this avian species

Aspectos morfológicos e citoquímicos dos glóbulos sangüíneos de Caiman crocodilus yacare (Daudin, 1802) (Reptilia, Crocodilia) / Morphological and cytochemical observations of blood cells of Caiman crocodilus yacare (Daudin, 1802) (Reptilia, Crocodilia)

Foram utilizados 10 jacarés Caiman crocodilus yacare, colhendo-se 5 ml do sangue periférico de cada animal. A análise morfológica foi realizada após coloraçäo por Leishman. Para estudo citoquímico, empregaram-se os métodos do PAS, do Sudan black B, da o-toluidina e do azul de bromofenol. Foram identificados 7 tipos celulares: eritrócitos, trombócitos, heterófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos azurófilos. Os eritrócitos nucleados apresentam formato elíptico com atividade mitótica e positividade citoplasmática para o azul de bromofenol. Os trombócitos säo de formato elíptico, com citoplasma abundante nos pólos, contendo grânulos de glicogênio e núcleo com sulcos profundos. Heterófilos, grosseiramente esféricos, mostram núcleo esférico excêntrico e citoplasma repleto de grânulos corados em salmäo, de formato fusiforme, em baqueta, oval ou esférico. A citoquímica nestas células revelou a presença de glicogênio, grânulos citoplasmáticos positivos para azul de bromofenol e parcialmente sudanófilos e positivos para mieloperoxidase. Eosinófilos mostram-se esféricos com núcleo lenticular excêntrico e citoplasma com grânulos esféricos ou ovais róseos positivos para Sudan e mieloperoxidase, porém fracamente para o azul de bromofenol. Basófilos apresentam formato esférico, de tamanho menor em relaçäo aos demais granulócitos, núcleo esférico central e citoplasma com poucos grânulos fortemente basófilos. Linfócitos mostram-se polimórficos com núcleo de formato irregular, citoplasma escasso com projeçöes e grânulos azurófilos. Monócito azurófilo, de formato esférico, núcleo excêntrico e citoplasma basófilo contendo grânulos azurófilos abundantes

Cinomose em canídeos e mustelídeos silvestres brasileiros: relato de caso / Distemper in Brazilian wild canidae and mustelidae: case report

Relatam-se cincos casos confirmados de cinomose de um total de 13 óbitos de animais silvestres brasileiros das espécies Galictis vittata, Crisocyon brachyurus e Cerdocyon thous, mantidos em cativeiro no Zoológico Municipal de Taboäo da Serra - SP - Brasil. A histopatologia observam-se as principais lesöes da virose, inclusive a presença de corpúsculos de inclusäo em diferentes localizaçöes. A sobrevivência de um único indivíduo, vacinado contra cinomose, reforça a importância desta medida profilática no controle da doença

Estudos hematológicos em Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) (Cichlidae, Teleostei) - Parte I / Hematological studies in Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) (Cichlidae, Teleostei) - Part I

Avaliou-se o hemograma e a morfologia celular em amostras de sangue periférico obtidas de 10 peixes da espécie Oreochromis niloticus. Parte das mesmas foi utilizada para o estudo da hematimetria, isto é, contagem de eritrócitos (x = 2,35 x 10 elevado à sexta potência/mm ao cubo mais ou menos 0,12), taxa de hemoglobina (x = 7,04g/dL mais ou menos 0,38), hematócrito (x = 27,85 por cento mais ou menos 1,62), HCM (x = 30,31pg mais ou menos 1,64), VCM (x = 118,6u ao cubo mais ou menos 3,53), CHCM (x = 25,78 por cento mais ou menos 1,72), contagem global de leucócitos (x = 16,08 x 10 ao cubo/mm ao cubo mais ou menos 1,28), contagem de trombócitos (x = 61,69 x 10 ao cubo/mm ao cubo mais ou menos 5,96), sendo a avaliaçäo da morfologia das células do sangue realizada através do estudo de extensöes sanguíneas submetidas à coloraçäo de Wright. Os eritrócitos e trombócitos nucleados apresentaram-se elípticos; neutrófilos e eosinófilos esféricos de tamanho variável, com o núcleo também esférico, apresentaram citoplasmas abundantes, ligeiramente basófilo e altamente acidófilo, respectivamente. Näo foram vistas as formas polimorfonucleares dessas células. Os basófilos apresentaram núcleo esférico e granulaçöes metacromáticas. Os monócitos e os linfócitos assemelharam-se morfologicamente aos dos mamíferos

Cinética da reaçäo inflamatória induzida pela carragenina na bexiga natatória de Oreochromis niloticus (Tilápia-do-Nilo) / Kinetics of the inflammatory reaction induced by carrageenin in the swimbladder of Oreochromis niloticus (Nile tilapia)

A cavidade natural da bexiga natatória de Oreochromis niloticus (Tilápia-do-Nilo), pesando entre 100 e 150g, foi utilizada para o estudo da cinética celular inflamatória induzida pela carragenina (n=42). A injeçäo de 0,1ml do irritante (0,5 por cento) na luz da bexiga natatória determinou um processo inflamatório caracterizado por congestäo e edema de sua parede e migraçäo de células, predominantemente mononucleares, para a cavidade. Este fenômeno teve início 3 horas após a injeçäo do irritante, atingindo um máximo às 24 horas. Para caracterizar as células inflamatórias que migraram para a cavidade do órgäo, foi realizada uma análise das células sangüíneas desses animais em nível de microscopia de luz comum e eletrônica. Pode-se demonstrar que as células que migraram para a luz da bexiga natatória após diferentes tempos da injeçäo do irritante eram predominantemente trombócitos. Poucos macrófagos, linfócitos, granulócitos e outras células näo caracterizadas morfofuncionalmente também faziam parte do exsudato