ABSTRACT
Bauhinia monandra, commonly known as "cow's-foot", is native from Asia and widely used all over the world to treat a variety of illnesses, in particular diabetes. The high usage of the plant in Brazil and to fulfill the need of medicinal plant regulation by the Ministry of Public Health, we aimed at determining the genotoxicity, cytotoxicity and mutagenicity of an aqueous infusion from B. monandra leaves. The results were correlated to the chemical compounds found after phytochemical selection. Tests were performed in an in vitro system with plasmid DNA, in the presence and absence of exonuclease III, and in vivo system employing prokaryotic (transformation into competent DH10B bacteria) and eukaryotic (Allium cepa) assays. The infusion concentrations were 0.8 µg/µL, 4 µg/µL, 20 µg/µL and 100 µg/µL. The infusion concentrations did not cause mutagenicity or cytotoxicity, however the highest concentrations were able to induce breaks in DNA phosphodiester bonds and form abasic sites, an effect suggested by the presence of phenolic hydroxyls. The results revealed risks and benefits of plant extracts for therapeutic use and their effect on genetic integrity, especially when commonly employed as a hypoglycemic.
Bauhinia monandra, popularmente conhecida como "pata-de-vaca", é nativa da Ásia e amplamente utilizada em todo o mundo para o tratamento de várias doenças, em especial diabetes. Diante da grande utilização dessa planta no Brasil, e de forma a satisfazer a necessidade de regulamentação das plantas medicinais pelo Ministério Público de Saúde, objetivamos determinar a genotoxicidade, citotoxicidade e mutagenicidade do infuso aquoso das folhas da B. monandra. Os resultados foram correlacionados com os compostos químicos encontrados após realização de uma triagem fitoquímica. Os testes foram realizados em sistema in vitro como o DNA plasmidial, na presença e ausência de exonuclease III, e in vivo empregando sistema procarioto (transformação com bactérias competente DH10B) e eucarioto (teste Allium cepa). As concentrações do infuso foram 0,8 µg/µL, 4 µg/µL, 20 µg/µL e 100 µg/µL. Nessas concentrações o infuso não causou mutagenicidade ou citotoxicidade, porém as concentrações mais elevadas foram capazes de induzir quebra nas ligações fosfodiéster do DNA e formar sítios abásicos, efeito sugerido pela presença de hidroxilas fenólicas. Os resultados revelaram riscos e benefícios desse extrato vegetal para uso terapêutico e seus efeitos sobre integridade do material genético, especialmente quando empregados como hipoglicêmico.
ABSTRACT
Danos no DNA podem ser induzidos por um grande número de agentes físicos e químicos presentes no ambiente, como também por compostos produzidos pelo próprio metabolismo celular. Estes danos podem interferir com processos celulares como replicaçäo e transcriçäo, levando a morte celular e/ou mutações. Os baixos níveis de mutaçäo nas células säo devidos à presença de vias enzimáticas, que reparam os danos no DNA. Diversos genes de reparo de DNA têm sido clonados e seus produtos caracterizados, principalmente em bactérias, leveduras e mamíferos. O interesse no estudo de mecanismos de reparo de DNA advém de seu envolvimento com a proteçäo da integridade da informaçäo genética. A alta conservaçäo observada para a maioria dos genes relacionados ao reparo de DNA, especialmente em eucariotos, aponta para sua importância para a manutençäo da vida na terra. Em plantas, o conhecimento sobre os mecanismos de reparo de DNA é ainda reduzido. Os primeiros genes de reparo foram recentemente clonados e o mecanismo de açäo de seus produtos está por ser caracterizado. Nosso objetivo neste trabalho de data mining foi identificar, no banco de dados gerados pelo projeto Genoma da Cana de Açúcar (Sugarcane Expressed Tag Project-SUCEST), genes relacionados ao reparo por excisäo de bases (BER). Esta busca foi feita através do programa tblastn. Em cana de açúcar, foram identificados clusters homólogos para a maioria das proteínas BER analisadas e um alto grau de conservaçäo foi observado. Os melhores resultados foram obtidos com proteínas BER de Arabidopsis thaliana. Para alguns homólogos BER de cana de açúcar, a presença de mais de uma forma de mRNA é possível, como definido pela ocorrência de mais de um cluster homólogo.