Estandarizacion de un protocolo de extraccion y caracterizacion del material proteico del esmalte dental erupcionado / Standardization of a protocol of extraction and characterization of erupted dental enamel proteins

Introduccion: El 95% del peso del esmalte dental erupcionado sano corresponde a material inorganico, 4% agua y 1% a materia organica (con un 0,03 a 0,1% de trazas de proteinas estructurales). En el caso del esmalte con defectos del desarrollo - como la fluorosis dental - existe evidencia de la retencion de material proteico, despertando la necesidad del estudio del proteoma del esmalte en estas condiciones. Limitaciones inherentes a los tejidos duros, como su bajo contenido proteico encerrado en una matriz mineral, dificultan los procesos de extraccion y caracterizacion de proteinas. El presente estudio, busca hacer una adaptacion metodologica de los procedimientos de extraccion de proteinas en esmalte dental erupcionado humano, para su posible aplicacion al estudio del proteoma del esmalte con defectos del desarrollo. Objetivo: Estandarizar una tecnica de extraccion y caracterizacion del material proteico del esmalte de dientes erupcionados. Materiales y metodos: Se recolectaron dientes sanos con extraccion indicada y se realizaron: -cortes de secciones longitudinales de 550 ¦Ìm, - separacion mecanica de esmalte/dentina y - pulverizacion de esmalte dental. El pulverizado se sometio a desmineralizacion/precipitacion de proteinas con TCA 12%. El extracto fue separado por electroforesis SDS-PAGE y caracterizado por LC-MS/ MS. Resultados: el procedimiento fue estandarizado. No se evidenciaron bandas de proteina despu¨¦s de la electroforesis SDS-PAGE, pero se identificaron y caracterizaron 138 peptidos, correspondientes a 13 proteinas, 3 de ellas especificas del esmalte (Amelogenina X, Amelogenina Y, Ameloblastina). Conclusiones: por primera vez en Colombia, se estandarizan y se adaptan metodos de extraccion y caracterizacion de proteinas del esmalte dental, abriendo las puertas al estudio del proteoma de este tejido.

Introduction: 95% of erupted enamel corresponds to inorganic material, 1% organic and 4% water content (by weight) and it only has traces of structural proteins (0,03¨C0,1%), making extraction and characterization a difficult process. Enamel developmental defects as dental fluorosis, have been related to protein retention, indicating a clear need for the study of the enamel proteome. Standardization of methods for extraction and characterization of enamel proteins will allow the characterization of the human enamel proteome under these particular conditions. Methods: ethical approval from Universidad El Bosque ethics committee was granted and informed consent was given. Human permanent erupted teeth were collected from Universidad El Bosque Dental Clinics. The teeth crowns were cut in 550 ¦Ìm sections, and dental tissues were separated. The enamel sections were grinded with liquid nitrogen to get enamel powder. Powdered enamel was demineralized and the proteins precipitated with TCA 12%. The proteins were separated by SDS-PAGE Electrophoresis and characterized by LC-MS/MS. Results: enamel powdering and protein extraction techniques were standardized at Universidad El Bosque laboratories. No protein bands were detected after SDS- PAGE Electrophoresis, however, by LC-MS/MS, 138 peptides from 13 proteins were identified, 3 of them enamel-specific (Amelogenin X, Amelogenin Y). Conclusions: for the first time in Colombia, methods for extraction and characterization of proteins are standardized and applied on dental enamel, opening the doors for the study of the proteome from sound and defective dental enamel.

Señalización asociada al receptor del factor de crecimiento similar a la insulina de tipo I en una línea celular colombiana de carcinoma mamario / Insulin-like growth factor receptor I signaling in a breast cancer cell line

Introducción. Varios estudios in vitro sugieren que la proliferación, migración y supervivencia en líneas celulares de cáncer de seno se ven significativamente afectadas por la activación del receptor IGF de tipo I (Insulin-like Growth Factor-I Receptor, IGF-IR).Objetivo. Caracterizar la fosforilación del IGF-IR y las moléculas de señalización intracelular Akt y Erk1/2 (vías de señalización PI-3K y MAPK, respectivamente), causada por el factor IGF-I en una línea celular colombiana de cáncer de mama ductal infiltrante (CSC 1595). Materiales y métodos. Las líneas celulares CSC 1595 y MCF-7 se cultivaron en medio DMEM con suplemento de suero fetal bovino 10%, glutamina 2 mM, penicilina 100 U/ml, estreptomicina 100 µg/ml a 37 0C, atmósfera de CO2 al 5% y humedad de 95%. Los extractos celulares se sometieron a inmunoprecipitación e inmunodetección con anticuerpos específicos anti-pIGF-IR, anti-pERK1/2 y anti-pAkt. Resultados. Cinco minutos después del estímulo con 10 nM de IGF-I, 70% y 25% del IGF-IR fueron fosforilados en las células CSC 1595 y MCF-7, respectivamente; también se observó activación de las proteínas Akt y ERK1/2. Los niveles basales y estimulados de las proteínas ERK1/2 fueron significativamente más altos en las células CSC 1595, comparados a los observados en MCF-7. Conclusiones. El IGF-IR y la vía MAPK cinasa que involucra las proteínas ERK1/2 muestran una fosforilación mayor en las células 1595 a la observada en las MCF-7. El IGF-IR, principal activador de esta vía, podría jugar un papel importante en los procesos de proliferación y metástasis de tumores de cáncer de mama ductal infiltrante.

Introduction. In vitro studies strongly suggest that proliferation, migration and cell survival of breast cancer cell lines are significantly affected by activation of the IGF type 1 receptor (IGF-IR).Objective. The phosphorylation by IGF-I of IGF-IR and the intracellular signaling molecules Akt (PI-3K pathway) and Erk1/2 (MAPK pathway) was characterized in a human breast cancer cell lines. Materials and methods. The study compared a standard breast adenocarcinoma line (MCF-7) cell line with a line (CSC 1595) derived from an infiltrating ductal breast cancer in a Colombian patient. The CSC 1595 and MCF-7 cell lines were cultured in DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum, 2 mM glutamine, 100 U/ml penicillin, and 100 µg/ml streptomycin and grown at 37°C in 5% CO2 atmosphere and 95% humidity. Cell extracts were prepared, followed by immunoprecipitation and immunoblotting with specific anti-pIGF-IR, anti-pERK1/2 and anti-pAkt antibodies. Results. After 5 minute stimulation with IGF-I, 70% of the IGF-IR was phosphorylated in the cell line CSC 1595 and 25% in MCF-7. In addition, Akt (oncogene protein v-akt) and ERK1/2 (extracellular signal-regulated MAP kinases) were phosphorylated. Basal and stimulated levels of phosphorylated ERK1/2 were substantially higher compared to those in the MCF-7 cell line. Conclusions. The IGF-IR and MAPK kinase pathway involving proteins ERK1/2 showed more significant phosphorylation in the 1,595 cells compared to the observed in the MCF-7 cell line. Since the IGF-IR is the major activator of this pathway it may play an important role in ductal infiltrating breast cancer tumor growth and metastases.

Comportamiento epidemiológico de la mortalidad materna en el Hospital Maternidad Nuestra Señora de la Altagracia, 1992-1996 / Epidemiological behaviour of maternal mortality at \"Nuestra Señora de la Altagracia\" Maternity Hospital, 1992-1996

Con la finalidad de conocer la posible causa de muerte directa o asociada al embarazo, realizamos un estudio descriptivo transversal con la recolección retrospectiva de la información en el Hospital Maternidad Nuestra Señora de la Altagracia, durante el período 1992-1996. Del total de 121.197 pacientes admitidas 169 fueron defunciones, lo que representa una tasa de mortalidad materna de 156.5/100,000 NV., y se realizaron 95.007 partos y 12,492 cesáreas de las cuales se representaron (0.07//) defunciones vía parto vaginal y 0.41// mediante operación cesárea (9.75//) correspondieron a pacientes que fallecieron embarazadas y 10.97// por aborto, (1.21//) a las que se les practicó laparotomía; (32.92//) eran primigesta, (42//) las multíparas, (11.9//) adolescentes, (73.8// entre 20 y 30 años; (14.3//) eran mayores de 30 años, (16.45//) eran gran multíparas. La causa de muerte fue (43.29//) por hemorragias, donde el DPPNT ocupó el primer lugar (10.5//), (ver cuadro 12); (27.4//) debido a trastornos hipertensivos; (5.24//) muertes por sepsis, (2.4//) por accidente anestésico, (4.3//) por causa desconocida. Consideramos que las principales causas de mortalidad materna son hemorragias, trastornos hipertensivos y sepsis

Comportamiento sexual en una población de embarazadas que acuden a consulta prenatal / Sexual behavior in a population of gravid women that attend a prenatal consult

Se realizó un estudio de tipo descriptivo para obsevar el comportamiento sexual de 300 mujeres embarazadas que acudieron a la consulta prenatal del Hospital Juan Pablo Pina de la ciudad de San Cristóbal durante el período mayo-julio del 1994. Se determinó que el embarazo modifica la conducta sexual de estas mujeres, altera la líbido y hace más difícil la obtención del orgasmo en la medida en que avanza el estado gestacional y que el temor al aborto o daño fetal pudiera explicar los cambios observados en el presente trabajo

Evolución del embarazo en pacientes con cerclaje ístmico-cervical: Hospital Juan Pablo Pina, San Cristóbal, 1990-1992 / Progression of the pregnancy in patients with cerclaje isthmus-cervix : Hospital Juan Pablo Pina, San Cristobal, 1990-1992

Se trata de una investigación retrospectiva y descriptiva realizada en el Hospital Juan Pablo Pina, de San Cristóbal, República Dominicana, durante el período enero del 1990-enero de 1992, donde se estudió a 12 pacientes con insuficiencia ístmicocervical (IIC) a las cuales les fue realizado cerclaje. Los resultados de esta investigación coinciden en su gran mayoria con los reportados por los autores internacionales. Fueron practicados doce (12) procedimientos con la técnica de McDonald, y se obtuvo 8 embarazos en curso normal (66.66 por ciento ) y un parto prematuro. La mayoria no tuvo complicaciones después de la intervención. El estado del cuello ístmico en las pacientes sometidas a la práctica del cerclaje fue 83.33 por ciento normal y 16.66 por ciento con desgarros cervicales

Dermatosis en 500 expedientes revisados, en la población asegurada: Hospital IDSS "Arzobispo Meriño" - Sabana Grande de Boyá / Dermatosis in 500 records reviewd, in a social security population: Hospital IDSS Arzobispo Meriño - Sabana Grande de Boyá

Se realizó un estudio retrospectivo en el hospital del IDSS "Arzobispo Meriño" de Sabana Grande de Boyá, donde fueron revisados 500 expedientes en los archivos del Hospital ya citado correspondiente al año 1984. Los resultados obtenidos en dicho estudio fueron: Escabiasis 22 casos (29.3%), tiña inguinal 14 casos (18.7%), tiña corporis 8 (10.7%), pitiriasis versicolor 8 (10.7%), tiña pedis 5 (6.7%), tiña ungueal 4 (5.2%), tiña copetis 3 (4%). Entre otras, menos frecuentes encontramos: Dematitis por contacto 2 (2.7%), tiña de mano 1 (1.3%)