ABSTRACT
El objetivo de este trabajo fue determinar y comparar la actividad de fosfolipasas y protesasas de cepas de Candida spp., así como correlacionar la actividad enzimática con el sitio de aislamiento de las levaduras. Se emplearon 95 cepas de Candida spp. aisladas de diferentes muestras clínicas. La actividad de fosfolipasas se evaluó de acuerdo al ensayo de Polak, utilizando dos medios de cultivo a base de yema de huevo. La actividad de protesasas se evaluó según el ensayo de Aoki y col., utilizando un medio de cultivo a base de albúmina sérica bovina. Para el análisis estadístico se utilizaron las pruebas de ANOVA y t de Student para muestras pareadas. Se pudo establecer que las cepas de Candida albicans poseen más actividad de protesasas que las especies de Candida no albicans, así como una relación entre la actividad de protesasas y el sitio de aislamiento de las levaduras. No se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas al evaluar la actividad de fosfolipasas entre Candida albicans y Candida no albicans y no se pudo establecer una relación entre la actividad de fosfolipasas y el sitio de aislamiento de las levaduras. Los medios de cultivo sólidos son una alternativa viable y fácil de usar para evaluar la actividad enzimática de proteasas y fosfolipasas en un laboratorio de micología, unido a pruebas de rutina como el examen directo y el cultivo, para la identificación de especies de Candida. Su uso puede tener una gran aplicabilidad, ayudando a establecer si existe una relación entre la producción de estas enzimas y la patogenicidad de estas levaduras, asociado al sitio de aislamiento de las mismas.
Subject(s)
Candida , Culture Media , Endopeptidases , Phospholipases , Microbiology , VenezuelaABSTRACT
Mantener y conservar una colección de hongos es una tarea que demanda constante dedicación y vigilancia. Requiere conocer las características morfológicas, fisiológicas y bioquímicas de los hongos, así como sus requerimientos en cuanto a los métodos de preser-vación. El objetivo principal de este trabajo fue evaluar la viabilidad, pureza y estabilidad morfológica macroscópica y microscópica de hongos levaduriformes y filamentosos, preservados en agua destilada y aceite mineral durante largos períodos de tiempo. Se escogieron al azar 411 hongos (170 levaduriformes y 241 filamentosos), todos ellos preservados por duplicado bajo capa de aceite mineral y agua por Castellani. Para la evaluación de las levaduras se realizaron pruebas rápidas, bioquímicas y fisiológicas y para los hongos filamentosos pruebas bioquímicas y cultivos en lámina. El análisis estadístico se realizó utilizando medidas de tendencia central y análisis de varianza (ANOVA). De 170 levaduras, 100 por ciento se conservaron viables, puras y estables morfológicamente por los dos métodos de preservación, durante un período de tiempo entre 2 - 48 años. De 241 hongos filamentosos, 100 por ciento se conservaron puros y viables, mientras que 95,4 por ciento se mantuvieron estables morfológicamente, por ambos métodos usados, durante un período de tiempo entre 3 - 47 años. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas al comparar ambos métodos de conservación. Los métodos de conservación de agua por Castellani y capa de aceite mineral garantizan la preservación adecuada de hongos levaduriformes y filamentosos durante largos períodos de tiempo, asegurando viabilidad, pureza y estabilidad morfológica