ABSTRACT
Resumen Con el objetivo de reproducir vizcaína Curimata mivartii, ejemplares de dos años de edad (n= 54), mantenidos en estanques en tierra (0,1 pez/m2) fueron inducidos con extracto pituitario de carpa (EPC) (Argent, USA) a razón de 6 mg/Kg de peso para las hembras en dos aplicaciones (10 % y 90% con 12 horas entre aplicación); mientras que los machos fueron inducidos con 4,8 mg/Kg EPC en dosis única. Antes de la inducción hormonal a cada hembra le fue realizada biopsia para verificar su estado de maduración gonadal. La muestra de ovocitos fue tratada con solución Serra (Chemí, Colombia) y después de tres minutos, con la ayuda de un estereoscopio de luz, (Leica, EZ4 W, Alemania) en objetivo de 4x, se determinó posición de la vesícula germinal (céntrico, migrando, periférico, sin núcleo). El análisis de la biopsia ovárica mostró que las hembras se encontraban en maduración final. Los machos inducidos se encontraron en fase de espermiación; los cuales a ligera presión abdominal liberaron líquido seminal. Se estimó el índice de ovulación, fecundidad (absoluta y relativa), diámetro de los ovocitos y volumen seminal. El porcentaje de fertilidad fue estimado a las cuatro horas post-eclosión (hpe) y el porcentaje de eclosión fue estimado a las 10 hpe. Las hembras ovularon entre 5 y 6 horas (28±1,0°C) e inmediatamente los huevos fueron obtenidos por extrusión, así como el semen. La fecundidad absoluta fue de 178331,6±28773,7 ovocitos/hembra y la relativa 137,7±19,6 g ovocitos/Kg de hembra. El diámetro de los ovocitos recién desovados fue de 687,2±42,8 µm. La fertilidad fue de 90,7±1,4% y la eclosión de 85,3±1,5%. Los resultados permiten concluir que EPC a dosificación de 6mg/Kg de peso es un buen inductor de la reproducción de vizcaína, con alto índice de ovulación y altos porcentajes de fertilidad y eclosión.
Abstract With the aim of reproducing the vizcaina Curimata mivartii, two-year-old specimens (n = 54), kept in ponds on land (0,1 fish/m2) were induced with carp pituitary extract (EPC) (Argent, USA) at a doses of 6 mg/Kg of weight for females in two applications (10% and 90% with 12 hours between applications), while males were induced with 4,8 mg / Kg EPC in a single dose. Before the hormonal induction, each female underwent an ovarian biopsy to verify the oocytes maturation stage. The oocyte sample was treated with Serra solution (Chemi, Colombia) and after three minutes, with the help of a light stereoscope (Leica, EZ4 W, Germany) in 4x objective, the position of the germinal vesicle was determined (central, migrating, peripheral, breakdown). The analysis of the ovarian biopsy showed that the females were in final maturation. Induced males were found in the spermiation phase; which at light abdominal pressure released seminal fluid. The ovulation index, fecundity (absolute and relative), oocyte diameter and seminal volume were estimated. The percentage of fertility was estimated at four hours after hatching (hah); and the hatching percentage was estimated at 10 hah. The females ovulated between 5 and 6 hours (28±1,0°C) and immediately the eggs were obtained by extrusion, as well as the semen. The absolute fecundity was 178331,6±28773,7 oocytes/female and the relative 137,7±19,6 g oocytes/Kg of female. The diameter of the newly spawned oocytes was 687,2±42,8 µm. Fertility was 90,7±1,4% and hatching 85,3±1,5%. The results allow to conclude that EPC at dosage of 6mg/Kg of weight is a good inducer of the vizcaína reproduction, which high ovulation index and high rates of fertility and hatching.
Resumo Com o objetivo de reproduzir vizcaína Curimata mivartii, espécimenes de dois anos de idade (n = 54), mantidos em tanques em terra (0,1 peixes / m2) foram induzidos com extrato de hipófise de carpa (EPC) (Argent, USA) a uma taxa de 6 mg / kg de peso para as fêmeas em duas aplicações (10% e 90% com 12 horas entre aplicações), enquanto os machos foram induzidos com 4,8 mg / kg de EPC em dose única. Antes da indução hormonal para cada fêmea, uma biópsia ovariana foi realizada para verificar o seu estado de maturação gonadal. A amostra de oócitos foi tratada com solução de Serra (Chemi, Colômbia) e após três minutos, com auxílio de um estereoscópio de luz (Leica, EZ4 W, Alemanha) em objetivo 4x, foi determinada a posição da vesícula germinativa (central, migrando, periférico, sem nucleo). A análise da biópsia ovariana mostrou que as fêmeas estavam em maturação final. Os machos induzidos foram encontrados na fase de espermizaҫã; que na pressão abdominal leve liberou fluido seminal. O índice de ovulação, fecundidade (absoluta e relativa), diâmetro do oócito e volume seminal foram estimados. A percentagem de fertilidade foi estimada em quatro horas pós-eclosão (hpe); enquanto a porcentagem de eclosão foi estimada em 10 hp. As fêmeas ovularam entre 5 e 6 horas (28±1,0°C) e imediatamente os ovos foram obtidos por extrusão, assim como o sêmen. A fecundidade absoluta foi 178331,6±28773,7 oócitos / fêmea e a relativa 137,7±19,6 g oócitos / kg de fêmea. O diâmetro dos oócitos recém-gerados foi 687,2±42,8 µm. A fertilidade foi de 90,7±1,4% e incubação de 85,3±1,5%. Os resultados permitem concluir que a EPC na dosagem de 6mg/Kg de peso é um bom indutor de reprodução de vizcaína, com alto índice de ovulação e altas taxas de fertilidade e eclosão.
ABSTRACT
RESUMEN El objetivo fue evaluar la calidad del semen descongelado de dorada Brycon moorei crioconservado con dimetilsulfóxido (DMSO) a tres porcentajes de inclusión. El semen se obtuvo de nueve machos mantenidos en cautiverio en la Estación Piscícola Repelón (Atlántico, Col), inducidos con extracto pituitario de carpa (4,5 mg/kg). El semen fue diluido en proporción 1:3 con un diluyente compuesto de DMSO a tres porcentajes 5%, 10% y 15%; glucosa al 6% y yema de huevo al 12%; empacado en macrotubos de 2,5 ml, congelados en vapores de nitrógeno y después de tres meses descongelados a 35°C durante 90 s. Semen fresco fue considerando como tratamiento control. En semen descongelado se evaluó movilidad total, tipos de movilidades, progresividad, velocidades y concentración espermática con el programa Sperm Class Analyzer SCA®; adicionalmente en semen fresco se determinó volumen, color y tiempo de activación. El semen fresco presentó movilidad mayor a 80% y tiempo de activación entre 28,5 y 41 s; mientras que, la concentración espermática osciló entre 10188,1 y 14590,2 millones/ml. La movilidad total del semen descongelado fue mayor cuando DMSO se incluyó a 5% (40,1±5,0%) o 10% (43,3±8,7%) (p>0,05); pero a 15% registró la menor movilidad (30,6±7,9%) y el mayor porcentaje de espermatozoides inmóviles (69.4±7.9%) (p<0,05); lo cual sugiere que inclusiones de DMSO por encima de 10% ocasionan mayores daños al espermatozoide de dorada. Los resultados permiten concluir que DMSO debe ser incluido entre 5 y 10%, junto con glucosa al 6% y yema de huevo al 12% para crioconservar semen de dorada.
ABSTRACT The aim was assess thawed sperm quality of dorada Brycon moorei, cryopreserved with dimethylsulfoxide (DMSO) to three inclusion rate. The sperm was obtained from nine males, kept in captivity in the Repelón Fish Farming Station (Atlántico, Col), were induced with carp pituitary extract (4.5 mg/kg). The semen was diluted with an extender composed of DMSO to three inclusion rates (5%, 10% and 15%); 6% glucose and 12% egg yolk. The sperm was diluted in 1:3, packed in macrotubes of 2.5 mL and freeze with vapors of nitrogen and after three months were thawed at 35°C for 90 s. The fresh sperm was considered as control treatment. The thawed semen was analyzed total motility, types of motility, progressivity, velocities and sperm concentration with the Sperm Class Analyzer SCA® software; further, volume, color and activation time were measured in fresh semen. The fresh sperm showed motility greater than 80% and activation time between 28.5 and 41 s; whereas that sperm concentration ranged between 10188.1 and 14590.2 million/ml. The total motility of thawed sperm was higher when DMSO was included at 5% (40.1±5.0%) or DMSO 10% (43.3±8.7%) (p> 0.05); but with 15% DMSO, were registered the low motility (30.6±7.9%) and the highest percentage of immotile sperm (69.4±7.9%) (p<0.05); which suggests inclusions of DMSO above 10% cause greater damage to dorada spermatozoa. The results showed that DMSO should be included between 5 and 10%, along with 6% glucose and 12% egg yolk for cryopreservation of dorada sperm.