ABSTRACT
Se estudiaron las cepas Choachí-2V y Durán del Tripanosoma rangeli para obtener la mayor información posible acerca del comporamiento biológico de este parásito y su posible relación de protección contra infecciones por T. cruzi. La metaciclogénesis se determinó mediante recuento de las formas metacíclicas en un universo de 200 parásitos durante 15 días de seguimiento. Se produjo la infección, con cultivo axénico por vía intracelomica, en grupos de 20 ninfas de quinto estadio de Rodnius prolixus, obteniéndose en hemolinfa y glándulas salivares las diferentes formas del ciclo del parásito incluyendo las metacíclicas infectivas, las cuales fueron inoculadas por vía intraperitoneal a ratones a los cuales se les hizo seguimiento de parasitemias por observación en gota de sangre cada 48 horas durante 20 días. Se pudo determinar que aunque no se observaron formas del parásito después del día 15, éste continua circulando en baja concentración, ya que al día 20 posinfección, se logró obtener cultivo del parásito a partir de muestras de sangre aparentemente negarivas. Los cultivos axénicos purificados de las dos cepas de T. rangeli fueron cosechados y analizados por isoenzimas para su identificación bioquímica
Subject(s)
Hemolymph , Isoenzymes , Rhodnius , Salivary Glands , TrypanosomaABSTRACT
Se analizaron 42 cepas de trypanosoma provenientes de los bancos del CIMPAT y del INS, provenientes de varios sitios de Colombia y aislada de diferentes vertebrados (humanos, D. marsupialis, C. Lanatus R. rattus, Aotus sp. y murciélago) o de diferentes vectores (R prolixus, P. geniculatus y Triatoma sp). Para el análisis isoenzimático se utilizaron 13 sistemas enzimáticos diferentes según la metodología estandarizada en el Instituto de Biología de Altura de la Paz Bolivia. Se incluyeron también en el estudio cepas procedentes de Panamá, de Chile, de Bolivia y de Honduras y como patrones isoenzimáticos para T. cruzi una cepa procedente de Bolivia (SO34) y otra de Chile (MN). Se obtuvieron, 38 zymodemos con una gran variación de genotipos; teniendo en cuenta solamente dos cepas de (Omar González y Tc. Molino) que presentaron el mismo genotipo, como tambien el grupo de las cepas (MDID.531, MDID-R-46, MDID-69 y Fredy Chaparro). Las 7 cepas de T. rangeli fueron caracterizadas y diferenciadas de las cepas de T. cruzi por medio de la utilización de la enzima Me-1 =0. Las cuatro cepas de Trypnosoma aisladas de murciélago fueron caracterizadas como Trypnosoma sp. por que presentaron el perfil isoenzimático diferente al de T. cruzi y de T. rangeli. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se realizó con los "primers" GE12 y GE13 proporcionados por Campbell (Universidad de California), específicos para copiar la región que comprende el Gen-Mini- exón en T. cruzi como en T. rangeli, 27 cepas de Trypanosoma amplificaron repetitivamente, correspondientes a todas las cepas de T. cruzi aisladas de humano y de reservorios (D. marsupialis, C. lanatus, R. rattus), 6 del vector R. prolixus y una cepa de T. rangeli aislada del primate Aotus sp. Dos (MSA-111 y MSA-114) de las cuatro cepas aisladas de murciélago también amplificaron presentando un patrón de bandeo diferente a las demás cepas de Trypanosoma. La cepa de Crithidia sp. (M. Mayorga) utilizada como control positivo también presentó un bandeo diferente. Se caracterizaron treinta y una cepas de T. cruzi, siete de T. rangeli, tres de Trypanosoma sp. y una Crithidia sp. Las soenzimas y el PCR coincidieron con los resultados, diferenciando cuales son las cepas de T. cruzi, T. rangeli y Trypanosoma sp. dándonos una fiavilidad de estos dos métodos...
Subject(s)
Academic Dissertations as Topic , DNA/isolation & purification , Trypanosoma/classification , Trypanosoma/enzymology , Polymerase Chain ReactionABSTRACT
Se evaluó el efecto de diferentes concentraciones de ácido nalidíxico, ampicilina, kanamicina, penicilina G y polimixina B, sobre la población de promastigotes de Leishmania braziliensis braziliensis, Leishmania donovani chagasi y Leishmania mexicana amazonensis in vitro. La penicilina G y la ampicilina se pueden utilizar hasta concentraciones 1000 ug/ml y 500 ug/ml respectivamente en cultivo de promastigotes de cualquier cepa de Leishmania sin que éstos se afecten. La polimixina B disminuye la población de promastigotes por lo cual es preferible no usarse en cultivos de Leishmania. El ácido nalidíxico y kanamicina pueden ser utilizados in vitro pero teniéndose en cuenta la especie de Leishmania y la concentración de antimicrobiano recomendado para la misma