ABSTRACT
La Leishmania afecta la salud pública en 88 países del mundo y representa un serio obstáculo para su desarrollo socioeconómico. Los métodos para diagnosticar la enfermedad toman tiempo y muchas veces son traumáticos para el paciente. Objetivo: Se aplicó PCR como método alternativo para el diagnóstico rápido de esta enfermedad. Materiales y métodos: A diferentes especies de Leishmania se les extrajo ADN genómico. Se diseñaron tres oligonucleótidos (LEISH 1, LEISH 2 y LEISH 3) dirigidos al extremo carboxilo terminal de la historia H2B de Leishmania (V.) peruaviana cuya secuencia parcial sirvió para diseñar dichos oligos, los cuales fueron probados en un sistema de PCR. Resultados: los oligonucleótidos amplificaron exitosamente regiones de 123 pb (LEISH 2) Y 139 pb (LEISH 1/LEISH 3) de esta secuencia parcial utilizada. La sensibilidad del PCR fue de hasta 1fg de ADN purificado de L (V.) peruviana y de 2 parásitos cuando se realizó la técnica de manera directa. La especificidad fue 100 por ciento (sólo reconoció a Leishmania y no a Trypanosoma ni a humano). Los oligonucleótidos diseñados también amplificaron todas las especies de Leishmania evaluadas. Conclusión: el sistema de PCR diseñado puede ser aplicado en la detección del parásito a partir de cualquier tipo muestra convirtiéndose en un método alternativo de diagnóstico de la enfermedad por su rapidez, especificidad y sensibilidad.