Influence of apoptosis on liver and spleen resistance in dogs with visceral leishmaniosis / Influência da apoptose na resistência hepática e esplênica de cães com leishmaniose visceral

Abstract The aim of this study was to evaluate apoptosis and parasite load in the liver and spleen of dogs with visceral leishmaniosis (VL), using immunohistochemistry. Liver and spleen samples from 71 dogs with VL were used. The parasite load in the spleen and liver showed significant difference between organs in infected group (P=0.0219). The density of the parasite load in the spleen (median=2.4) was higher than liver (median=0.8). Immunodetection of apoptotic cells was predominant in lymphocytes and differ between the infected and control group in spleen (P=0.0307) and liver (P=0.0346). There was a significant correlation between apoptosis and parasite load (P = 0.0084; r=0.3104) only in the spleen of the infected group, where it was observed that, when increasing the number of apoptotic cells increases the parasitic load. It was concluded that the liver and spleen of infected dogs presented greater numbers of cells undergoing apoptosis (lymphocytes) than the control group, thus suggesting that this process may be contributing towards the survival of Leishmania in these organs, because lymphocyte in apoptosis did not have the ability to present and recognize the antigen, allowing the survival of the parasite.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a apoptose e a carga parasitária no fígado e baço de cães com leishmaniose visceral (LV), pela técnica de imuno-histoquímica. Foram utilizadas amostras de fígado e baço de 71 cães com LV. A carga parasitária no baço e fígado mostrou diferença significativa entre os órgãos no grupo infectado (P=0,0219). A densidade da carga de parasita no baço (média=2,4) foi maior do que no fígado (média=0,8). A imunodetecção de células em apoptose foi predominante nos linfócitos, com diferenças entre o grupo infectado e controle no baço (P=0,0307) e fígado (P=0,0346). Houve uma correlação positiva fraca entre apoptose e carga parasitária (P=0,0084; r=0,3104) apenas no baço do grupo infectado, onde observou-se que quando aumentava o número de células em apoptose aumentava a carga parasitária. Concluiu-se que o fígado e o baço de cães infectados apresentam um maior número de células que sofrem apoptose (linfócitos) do que o grupo controle, sugerindo que este processo possa contribuir para a sobrevivência de Leishmania nestes órgãos, pois os linfócitos em apoptose não tiveram a capacidade de apresentar e reconhecer o antígeno, permitindo a sobrevivência do parasita.

Influence of apoptosis on liver and spleen resistance in dogs with visceral leishmaniosis / Influência da apoptose na resistência hepática e esplênica de cães com leishmaniose visceral

Abstract The aim of this study was to evaluate apoptosis and parasite load in the liver and spleen of dogs with visceral leishmaniosis (VL), using immunohistochemistry. Liver and spleen samples from 71 dogs with VL were used. The parasite load in the spleen and liver showed significant difference between organs in infected group (P=0.0219). The density of the parasite load in the spleen (median=2.4) was higher than liver (median=0.8). Immunodetection of apoptotic cells was predominant in lymphocytes and differ between the infected and control group in spleen (P=0.0307) and liver (P=0.0346). There was a significant correlation between apoptosis and parasite load (P = 0.0084; r=0.3104) only in the spleen of the infected group, where it was observed that, when increasing the number of apoptotic cells increases the parasitic load. It was concluded that the liver and spleen of infected dogs presented greater numbers of cells undergoing apoptosis (lymphocytes) than the control group, thus suggesting that this process may be contributing towards the survival of Leishmania in these organs, because lymphocyte in apoptosis did not have the ability to present and recognize the antigen, allowing the survival of the parasite.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a apoptose e a carga parasitária no fígado e baço de cães com leishmaniose visceral (LV), pela técnica de imuno-histoquímica. Foram utilizadas amostras de fígado e baço de 71 cães com LV. A carga parasitária no baço e fígado mostrou diferença significativa entre os órgãos no grupo infectado (P=0,0219). A densidade da carga de parasita no baço (média=2,4) foi maior do que no fígado (média=0,8). A imunodetecção de células em apoptose foi predominante nos linfócitos, com diferenças entre o grupo infectado e controle no baço (P=0,0307) e fígado (P=0,0346). Houve uma correlação positiva fraca entre apoptose e carga parasitária (P=0,0084; r=0,3104) apenas no baço do grupo infectado, onde observou-se que quando aumentava o número de células em apoptose aumentava a carga parasitária. Concluiu-se que o fígado e o baço de cães infectados apresentam um maior número de células que sofrem apoptose (linfócitos) do que o grupo controle, sugerindo que este processo possa contribuir para a sobrevivência de Leishmania nestes órgãos, pois os linfócitos em apoptose não tiveram a capacidade de apresentar e reconhecer o antígeno, permitindo a sobrevivência do parasita.

Morphological changes and parasite load of the adrenal from dogs with visceral leishmaniasis / Alterações morfológicas e carga parasitária da adrenal de cães com leishmaniose visceral

The objective of this study was to analyze morphological changes and parasite loads in the adrenal gland from 45 dogs with visceral leishmaniasis (VL). The animals were from the Zoonosis Control Center of Araçatuba, state of São Paulo, which is an endemic region for the disease. These animals were euthanized due to positive diagnoses of VL. The dogs were classified into asymptomatic, oligosymptomatic and symptomatic groups. The parasite load was determined by immunohistochemistry, using VL-positive dog hyperimmune serum. Nine dogs showed an inflammatory infiltrate composed, predominantly, of plasma cells and macrophages. However, only eight dogs showed macrophages with amastigote forms of the parasite, immunolabeled in the cytoplasm. The medullary and reticular layers were the most affected areas, possibly due to a favorable microenvironment created by hormones in these regions. The density of parasites in the glandular tissue was not associated with clinical signs of VL (P > 0.05). However, the presence of the parasite was always associated with the presence of a granulomatous inflammatory infiltrate. This gland may not be an ideal place for the parasite's multiplication, but the presence of injuries to the glandular tissue could influence the dog's immune system, thus favoring the parasite's survival in the host's different organs.

O objetivo deste estudo foi analisar as alterações morfológicas e a carga parasitária da glândula adrenal de 45 cães com leishmaniose visceral (LV). Os animais eram provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) de Araçatuba (SP), região endêmica para a doença. Esses animais são submetidos à eutanásia, devido ao diagnóstico positivo para LV. Os cães foram classificados nos grupos assintomático, oligossintomático e sintomático. A determinação da carga parasitária foi feita por imuno-histoquímica, com utilização de soro hiperimune de cão positivo para LV. Em nove cães, verificou-se um infiltrado inflamatório, composto predominantemente por plasmócitos e macrófagos. Entretanto, apenas oito cães apresentaram macrófagos com formas amastigotas do parasito imunomarcadas em seu citoplasma. As camadas medular e reticulada foram as mais afetadas, possivelmente por um microambiente favorável criado pelos hormônios nestas regiões. A densidade de parasitos no tecido glandular não foi relacionada com os sinais clínicos de LV (P > 0,05). No entanto, a presença do parasito sempre esteve associada à presença de infiltrado inflamatório granulomatoso. Possivelmente, essa glândula não é um sítio ideal para a multiplicação do protozoário, mas a presença de injúrias no tecido glandular poderia influenciar o sistema imune do cão, favorecendo a sobrevivência do parasito nos diferentes órgãos do hospedeiro.

Arranjos configurados pelos nervos do plexo braquial no urubu (Coragyps atratus foetens -Linnaeus, 1758) / The arragement of configurat of nervs of brachial plexus in vulture (Coragyps atratus foetens - Linnaeus, 1758)

O estudo anatômico da origem e distribuição do plexo braquial no urubu (Coragyps atratus foetens) foi efetuado em 14 animais, adultos,machos e fêmeas oriundos da região de Araçatuba (SP). Após a fixação em solução aquosa de formaldeído a 10,00%, realizou-se a dissecação bilateral da origem dos plexos braquiais e sua distribuição. A análise permitiu verificar, que o plexo braquial do urubu, possui quatro troncos, os quais originam-se dos ramos ventrais dos nervos espinhais cervicais onze (C11), doze (C12) e treze (C13) e dos ramos ventrais dos nervos espinhais torácicos um (T1) e (T2) em 100% dos casos em ambos antímeros. O primeiro tronco parte de C11 nos antímeros direito e esquerdo, e da margem cranial do cordão dorsal partem os nervos subescapular, subcoracoescapular e supracoracóide; em ambos antímeros (100%). O segundo tronco origina-se de C12 em ambos antímeros, dando origem ao cordão dorsal, dele partem os nervos axilar, radial e anconeal (100%). O terceiro tronco do plexo origina-se unicamente de C13 (100%) e o quarto tronco de T1 em ambos antímeros (100%). Os troncos de C12, C13 e T1 unem-se dando origem ao cordão ventral, o qual partem os nervos medianoulnar quese divide em mediano e ulnar e os nervos peitorais (100%). T2 emite filamentos que se unem à raiz nervosa de T1, sendo um filamento(35,55%) e dois filamentos (64,29%) no antímero direito, enquanto que no esquerdo um filamento (42,85%), dois filamentos (50%) e três filamentos (7,15%)

The anatomical study of the origin and distribution of brachial plexus in vulture (Coragyps atratus foetens) was performed in 14 animals, adults,males and females, deriving of the region of Araçatuba (SP). After fixed in watery solution of formaldehyde 10,00%, became dissected bilateral of the origin of the brachial plexus, and yours distribution. The analysis allowed verify that brachial plexus of vulture, four root possess, which originate from the ventral branches of cervical spinal nerves eleven (C11),twelve (C12) and thirteen (C13) and of the ventral branches of thoracic spinal nerve one (T1) and (T2) in both sides (100%). The first root part of C11 in the right and left side, and of the edge skull of the dorsal lace the nerves subescapular, subcoracoescapular e supracoracóide in bothantímeros (100%). As the root originates from C12 in both sides, giving origin to the dorsal lace, giving the axilar, radial and anconeal nerves(100%). The third root of plexus originates solely from C13 (100%)and the root of T1 in both sides (100%). The roots of C12, C13 and T1 was united the ventral lace originates, which breaks the nerves to medianoulnar that divided in medium and to ulnar and the pectoral nerves (100%). T2 emits filaments that join it root nervous of T1,being one filament (35,55%) and two filaments (64,29%) in side right,while that in the left one filament (42,85%), two filaments (50%) and three filaments (7,15%)

Ramificação e distribuição dos nervos frênicos no músculo diafragma do gato doméstico / Ramification and distribution of the phrenic nerves in the muscle diaphragm of the domestic cat

A ramificação e a distribuição dos nervos frênicos direito e esquerdo foram estudadas em 30 músculos diafragmas de gatos domésticos sem raça definida, 7 machos e 23 fêmeas, conservados em solução de formaldeído a 10 %. Mediante fixação e dissecção, observou-se que os nervos frênicos se ramificaram para as respectivas partes carnosas do músculo diafragma, pars lumbalis, costalis e sternalis, e terminaram em maior freqüência em tronco dorsolateral e ramo ventral (63,33 %). Notou-se ainda os seguintes arranjos: ramos dorsal, lateral e ventral (25,0 %); ramo dorsal e tronco ventrolateral (6,66 %); troncos dorsolateral e ventrolateral (3,33 %); tronco dorsolateral, ramos lateral e ventral (1,66 %). Os nervos frênicos se distribuíram simetricamente em 11 exemplares (36,66 %), exibindo somente a terminação em tronco dorsolateral e ramo ventral. Os ramos dorsais inervaram a pars lumbalis (73,33 % à direita e 56,66 % à esquerda) e a pars costalis (13,33 % à direita e 10,0 % à esquerda). O ramo dorsal direito supriu a crus mediale dexter do pilar direito (100,0 %) e o ramo dorsal esquerdo inervou a crus mediale sinister do pilar direito e o pilar esquerdo (100,0 %). Os ramos laterais inervaram a pars lumbalis (23,33 % à direita e 33,33 % à esquerda), a pars costalis (96,66 % à direita e 100,0 % à esquerda) e a pars sternalis (3,33 % somente à direita). Os ramos ventrais inervaram a região ventral da pars costalis (46,66 % à direita e 43,33 % à esquerda) e a pars sternalis (96,66 % à direita e 100,0 % à esquerda). Quatro animais fêmeas (13,33 %) exibiram cruzamento de fibras provenientes do ramo ventral esquerdo para o antímero direito sendo que em um desses exemplares (3,33 %) ocorreu conexão entre o ramo ventral esquerdo e o direito.

The ramification and the distribution of the phrenic nerves right and left had been studied in 30 muscles diaphragms of unknown breed adult domestic cats, 7 males and 23 females, and were fixed in 10 % buffered formalin solution. After fixation and dissection, it was observed that the phrenic nerves ramified for the respective carnous parts of the muscle diaphragm, pars lumbalis, costalis and sternalis, and had finished in higher frequency in dorsolateral trunk and ventral branch (63.33 %). We observed the following arrangements: dorsal, ventral and lateral branches (25.0 %); dorsal branch and ventrolateral trunk (6.66 %); dorsolateral and ventrolateral trunks (3.33 %); dorsolateral trunk, lateral and ventral branches (1.66 %). The phrenic nerves had distributed symmetrically in 11 samples (36.66 %), only showing the termination in dorsolateral trunk and ventral branch. The dorsal branches supplied pars lumbalis (73.33 % to right and 56.66 % to the left) and pars costalis (13.33 % to right and 10.0 % to the left). The right dorsal branch supplied the crus mediale dexter of the right pillar (100.0 %) and the left dorsal branch supplied the crus mediale sinister of the right pillar and the left pillar (100.0 %). The lateral branches supply pars lumbalis (23.33 % to right and 33.33 % to the left), pars costalis (96.66 % to right and 100.0 % to the left) and pars sternalis (3.33 % only to the right). The ventral branches supplied the ventral region of pars costalis (46.66 % to right and 43.33 % to the left) and pars sternalis (96.66 % to right and 100.0 % to the left). Four female animals (13.33 %) had shown fibers crossing proceeding from the left ventral branch for right antimere had been that in one of these samples (3.33 %) occurred connection between the left ventral branch and the right.