Molecular detection of clarithromycin and fluoroquinolones resistance in helicobacter pylori infection, directly applied to gastric biopsies, in an urban brazilian population

ABSTRACT Background - Antimicrobial resistance is the major factor leading to eradication failure in H. pylori treatment. Molecular tests are useful to detect genetic mutations predictive of clarithromycin and fluoroquinolones resistance. Knowledge of the local prevalence rate of resistance is important to define the best recommended treatment. Objective - To assess the prevalence of primary resistance of H. pylori to clarithromycin and fluoroquinolones, using a molecular test, in a Southeastern urban Brazilian population. Methods - A total of 72 H. pylori seropositive patients [65% female, mean age 39 (19-73) years] never treated before for this infection were studied. All patients underwent gastroscopy in addition to antrum and corpus biopsies and molecular test GenoType HelicoDR (Hain Life Science, Germany) to detect H. pylori and point mutations in genes responsible for clarithromycin and fluoroquinolone resistance. The molecular procedure was divided into three steps: DNA extraction from biopsy samples, a multiplex amplification with biotinylated primers and a reverse hybridization. The most frequent point mutations involved in resistance to the two antibiotics were evaluated. Results - Resistance to clarithromycin was detected in nine (12.5%) patients and to fluoroquinolones in eight (11.1%) patients. The point mutation A2147G was the most common (77.8%) among resistant strains to clarithromycin. In 50% of the resistant strains to fluoroquinolones, the mutant codon couldn't be identified. Conclusion - The resistance rates to clarithromycin and fluorquinolones in a large urban population in the Southeast of Brazil were acceptable, suggesting that these drugs remain appropriate options to first and second-line of H. pylori treatment. The molecular test represents an adequate diagnostic tool for monitoring H. pylori resistance.

RESUMO Contexto - A resistência aos antimicrobianos é o principal fator associado à falha terapêutica no tratamento do H. pylori. Testes moleculares são úteis na detecção das mutações genéticas associadas ao desenvolvimento de resistência à claritromicina e fluorquinolonas. O conhecimento da taxa de prevalência local de resistência é importante na definição do melhor esquema terapêutico. Objetivo - Estimar a prevalência de resistência primária do H. pylori à claritromicina e fluorquinolonas, empregando-se um teste molecular, em uma capital do Sudeste do Brasil. Métodos - Setenta e dois pacientes com sorologia positiva para H. pylori [65% mulheres, idade média 39 (19-73) anos], nunca tratados previamente para essa infecção, foram selecionados. Todos os pacientes submeteram-se à endoscopia digestiva com biópsias de antro e corpo e realização do teste molecular GenoType HelicoDR (Hain Life Science, Alemanha) para a detecção do H. pylori e das mutações pontuais dos genes responsáveis pela resistência à claritromicina e fluorquinolonas. O procedimento molecular constituía-se de três etapas: extração do DNA a partir das amostras endoscópicas, amplificação multiplex com primers biotinilados e hibridização reversa. As mutações pontuais mais frequentemente envolvidas com resistência aos dois antibióticos foram avaliadas. Resultados - Resistência à claritromicina foi detectada em nove (12,5%) pacientes e às fluorquinolonas em oito (11,1%) pacientes. A mutação pontual A2147G foi a mais comum (77,8%) entre as cepas resistentes à claritromicina. Em 50% das cepas resistentes à fluorquinolonas, o códon mutante não pôde ser identificado. Conclusão - As taxas de resistência à claritromicina (12,5%) e às fluorquinolonas (11,1%), em uma importante capital do Sudeste do Brasil, mostraram índices aceitáveis, sugerindo que essas drogas permanecem opções apropriadas para o tratamento de primeira e segunda linha do H. pylori. O teste molecular constitui uma ferramenta diagnóstica adequada para monitorar a resistência do H. pylori.

Estudo comparativo para avaliação de cateter de pHmetria com novo sistema de referência interna na prática clínica / Comparative study to evaluate pH electrodes with new system of built-in reference in clinical practice

Introdução: pHmetria esofágica é um método importante para avaliação direta do refluxo ácido gastroesofágico. Os aparelhos convencionais de pHmetria usam cateteres de referência externa, que podem gerar grandes diferenças nas medidas de pH. Desenvolvemos, em nosso meio, eletrodo de referência interna construído com matriz metálica/polimérica para uso em cateteres de pHmetria. Objetivos: avaliar comparativamente escore de DeMeester, tempo total, supino e ereto de pH menor que quatro, utilizando simultaneamente cateteres de antimônio com eletrodo de referência externa e interna em um mesmo indivíduo. Métodos: entre julho e dezembro de 2013 selecionamos os 16 participantes do estudo. Cada participante foi submetido simultaneamente a dois exames de pHmetria prolongada (um com eletrodo de referência interno e outro com eletrodo de referência externo). Para avaliar os resultados obtidos com cateteres de referência interna e externa utilizamos o teste de Wilcoxon Signed Rank. Resultados: a idade média de nossa população foi de 34,2 anos, sendo 56,2% do sexo feminino. Para avaliar os resultados obtidos com cateteres de pHmetria com referência interna e externa, utilizamos o teste de Wilcoxon Signed Rank. A diferença de valores de pH menor que quatro no tempo total, em posições supina e ereta, bem como o escore de DeMeester, foram muito semelhantes nos exames com eletrodo de referência interna e externa realizados simultaneamente em um mesmo paciente. Conclusão: os cateteres de pHmetria com eletrodo de referência externa e com novo sistema de referência interna comportaram-se de forma semelhante e registraram resultados similares. Vantagens descritas na literatura em relação a cateteres de pHmetria com referência interna deverão ser avaliadas em estudos futuros.

Introduction: esophageal pH monitoring is a very important tool to evaluate gastroesophageal reflux disease. Conventional pH recording equipment uses electrodes with external reference and is associated with great differences in pH measurements. We developed a pH electrode built-in reference, based on a matrix ceramic/metallic/polymeric. Objectives: to compare data of DeMeester scores, total, supine and orthostatic time of pH under four, using simultaneously, in the same patient pH electrodes with external reference and built-in reference. Methods: between July and December 2013 we enrolled 16 patients. Each participant was submitted simultaneously to two prolonged monitoring pH study using electrodes with external and built-in reference. To evaluate the results of the exams performed simultaneously in the same patient we used the Wilcoxon Signed Rank test. Results: the participants median age was 34.2 years, 56.2% women. To evaluate the results of the exams performed simultaneously in the same patient we used the Wilcoxon Signed Rank test. The results of DeMeester score and the data of pH under four, in total, supine and orthostatic time, were similar in recordings using electrode with external reference and built-in reference. Conclusion: performance of pH electrodes with external and in-built reference was similar. Future studies will evaluate vantages of pH electrode built-in reference.

Prevalence of Barrett's esophagus in individuals without typical symptoms of gastroesophageal reflux disease

BACKGROUND: Barrett’s esophagus, the major risk factor for esophageal adenocarcinoma, is detected in approximately 10 percent-14 percent of individuals submitted to upper endoscopy for the assessment of gastroesophageal reflux disease related symptoms. Prevalence studies of Barrett’s esophagus in individuals without typical symptoms of gastroesophageal reflux disease have reported rates ranging from 0.6 percent to 25 percent. AIM: To determine the prevalence of Barrett’s in a Brazilian population older than 50 years without typical symptoms of gastroesophageal reflux disease. METHODS: A total of 104 patients (51 men), mean age of 65 years, with an indication for upper endoscopy but without symptoms of heartburn and/or acid regurgitation (determined with a validated questionnaire) were recruited. Subjects submitted to upper endoscopic examination in the last 10 years or using antisecretory medication (proton pump inhibitors) during the last 6 months were not included. Methylene blue chromoscopy was performed during the endoscopic exam to facilitate identification of the metaplastic epithelium. RESULTS: Barrett’s esophagus was diagnosed endoscopically and confirmed by histology in four patients, all of them males. The metaplastic segment was short (less than 3 cm) and free of dysplasia in all patients. The prevalence of Barrett’s esophagus was 7.75 percent in the male population and 3.8 percent in the general population studied. CONCLUSION: Due to the low prevalence of Barrett’s esophagus found in the present study, associated with the finding of short-segment Barrett’s esophagus in all cases diagnosed and the absence of dysplasia in the material analyzed, endoscopic screening for Barrett’s esophagus in patients above the age of 50 without the classical symptoms of gastroesophageal reflux disease is not indicated for the Brazilian population.

RACIONAL: O esôfago de Barrett, principal fator de risco para o adenocarcinoma do esôfago, é uma complicação da doença por refluxo gastroesofágico de longa duração, sendo detectado em, aproximadamente, 10 por cento-14 por cento dos indivíduos submetidos a endoscopia digestiva alta para avaliação de sintomas relacionados à doença por refluxo gastroesofágico. Estudos de prevalência do esôfago de Barrett em indivíduos sem sintomas típicos de doença por refluxo gastroesofágico mostram taxas oscilando entre 0,6 por cento e 25 por cento. OBJETIVO: Determinar a prevalência do esôfago de Barrett em indivíduos maiores de 50 anos sem os sintomas clássicos da doença por refluxo gastroesofágico. MÉTODOS: Foram recrutados 104 pacientes (51 homens e 53 mulheres), idade média 65 anos, com indicação de se submeterem a endoscopia digestiva alta, porém sem sintomas de pirose e/ou regurgitação ácida (certificados através de questionário validado). Foram excluídos indivíduos com exame endoscópico prévio nos últimos 10 anos ou que fizeram uso de medicação anti-secretora nos últimos 6 meses. Durante o exame endoscópico foi realizada cromoscopia com azul de metileno, para facilitar a identificação do epitélio metaplásico. RESULTADOS: O esôfago de Barrett foi diagnosticado por endoscopia e confirmado pela histologia em quatro pacientes, todos do sexo masculino. Os segmentos metaplásicos eram curtos (inferior a 3 cm) e livre de displasia em todos os pacientes. A prevalência encontrada foi de 7,75 por cento na população masculina e 3,8 por cento na população geral avaliada. CONCLUSÃO: Diante da baixa prevalência do esôfago de Barrett encontrada no presente estudo, associada ao achado de segmento curto de Barrett em todos os casos diagnosticados e ausência de displasia no material analisado, rastreamento endoscópico para o esôfago de Barrett em pacientes acima de 50 anos sem os sintomas clássicos da doença por refluxo gastroesofágico não se justificaria na população...

The presence of serum anti-Cag A antibodies of Helicobacter pylori may not represent a protective factor in the severe esophageal forms of GERD

There is a worldwide debate about the possible protective role of Helicobacter pylori against gastroesophageal reflux disease (GERD), especially in the severe esophageal forms. This bacterium, amd oits Cag A straom in particular, can induce inflammatory and atrophic changes in the stomach mucosa and the resulting hypochlorhydria may be responsible for this protective effect. Objectives: To assess patients with severe erosive esophagitis and /or Barrett's esophagus for the prevalence of H.pylori infection, as well as the presence of anti-Cag A antibodies, and of histopathological signs of gastric atrophy in the colonized patientes. Patients and metkhods: Thirty patientes with endoscopic and histopathological diagnosis of severe erosive esophagitis (Los Angeles grade C or D) and /or Barrete's esophagus were selected. These patients were submitted to the 13C-urea breath test for the detection of H. pylori, and to upper digestive endoscopy to collect gastric biopsies for the histopathological determination of atrophy. Sera from individuals infected with the bacterium were examined for the presence of anti-Cag A antibodies. Results: Twelve patients were infected with H. pylori(40por cento), and the prevalence of the anti-Cag A antibody in these indiviuals was 91.7por cento. Histopathological signs of gastic atrophy were observed in 33por cento of the patients colonized by the bacteria. conclusion: There is a predominance of the Cag A-positive strain (91.7por cento) among patients with severe esophageal forms of GERD infected with H. pylory. Histopathological signs of gastric atrophy were observed in 33.3por cento of the infected patients, but none of the uninfected patients. These findings suggest that the cag-positive stains of H. pylori may have, but do not necessarily have, a protective effect against the developmente of severe forms of GERD

Assessment of effectiveness of different dosage regimens of pantoprazole in controlling symptoms and healing esophageal lesions of patients with mild erosive esophagitis

Background - Gastroesophageal reflux disease is a very common affection, and esophageal involvement is particularly frequent. The means to effectively control symptoms and improve esophageal inflammation in these patients is to reduce esophageal acid exposure. For this purpose, we use gastric proton pump inhibitor, that can suppress gastric acid secretion. Aim - To compare the effectiveness of two different pantoprazole dosage regimens (20 and 40 mg/day), in controlling symptoms and healing esophageal lesions of patients with mild erosive esophagitis. Material and Methods - Fifty-seven patients with endoscopically confirmed mild erosive esophagitis characterized as non-confluent erosions in the distal esophagus, were randomly to be treated either with pantoprazole 20 mg/day (group I, 28 patients) or 40 mg/day (group II, 29 patients) over a period of 4 weeks. After treatment completion, the patients were assessed for clinical and endoscopic outcome, i.e., absence of erosions in distal esophagus and improvement of gastroesophageal reflux symptoms. Results - At the end of the treatment, 73.1 percent of the patients in group I and 85.7 percent of the patients in group II had endoscopic improvement. We also observed, that 88.5 percent of the patients in group I and 92.9 percent of the patients in group II had complete elimination of heartburn and regurgitation. Conclusion - Pantoprazole dosage regimens of 20 mg/day and 40 mg/day provide equivalent effectiveness in controlling symptoms and healing esophageal lesions of mild esophagitis

Terapia tripla com lansoprazol, claritromicina e amoxicilina, por dez dias, na erradicaçäo do "Helicobacter pylori" em pacientes com ulcera duodenal / Triple therapy using lansoprazole clarithomycin during 10 days for the eradication of Helicobacter pylori in patients with duodenal ulcer

Objetico: Avaliar o emprego de terapia por 10 dias na erradicaçäo do H, Pylori. Pacientes e métodos: 70 pacientes(39 homens, 31 mulheres, idade médiade 38 anos) portadores de úlcera duodenal endoscopicamente comprovada e H.pylori positivos, foram incluídos. Antes da inclusäo os paciente submeteram-se a exames hematológicos e a presença do H. pylori confirmada através do teste da urease e/ou exame histológicoe/ ou teste respiratório comÿ13C-Uréia(TR). Os pacientes admitidos no estudo empregaram a associaçäo de lamsoprazol 30mg, claritromicina 500mg e amoxicilina 1.000mg, tomados de 12/12h durante 10 dias. Exame clinico de avaliaçao de aderencia e presença de efeitos adversos e nova avaliaçäo laboratorial foram realizados no dia seguinte ao final do tratamento. Novo exame clinico com endoscopia digestiva alta e pesquisa de H. pylori por exame histologico e novo TR foram realizados 37(28-73) dias após o final do tratamento. Resultados: Seis pacientes foram excluidos do estudo, sendo dois por efeitos adversos, que cederam apenas com a suspensäo da medicaçäo. Assim 64 pacientes completaram o estudo. Desses, 62 tiveram H pylori erradicado ao final do tratamento, correspondendo a 89por cento (IC de 95por cento = 79 a 95por cento) de erradicaçäo, quando se analisam os resultados por intençäo de tratamento, e a 97 por cento (IC de 95por cento = 89 a 100por cento) ao analisá-lo por protocolo. Conclusões: A terapia tripla com lansoprazol, claritromicina e amoxilina durante 10 dias é segura, bem tolerada e muito eficaz na erradicaçäo do H. pylori entre nós