Indução de resistência em arroz contra Bipolaris oryzae Breda de Hann, através da expressão constitutiva de um gene de quitinase / Induction of resistance in rice against Bipolaris oryzae Breda de Hann by constitutive expression of achitinase gene

Este trabalho objetivou a transformação genética da cultivar de arroz BRS Taim, para obtenção de resistência ao fungo Bipolaris oryzae, agente da mancha parda. Para a transformação das plantas foi utilizada a cepa LBA 4404 de Agrobacterium tumefaciens transformada com o plasmídeo pMOG 22 que codifica o gene da quitinase do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae. Mesocótilos de arroz foram imersos por 30 min. em solução bacteriana (OD600 = 0,7), contendo acetoceringona (100 Mm). Após os explantes foram co-cultivados por 72 horas em meio MS sem hormônio. Para seleção dos transformantes foi utilizado meio MS com 5 mg L-1 de BAP e 15 mg L-1 de higromicina, incubados a 25±1°C, fotoperíodo de 16 horas e densidade de fluxo de fótons de 42 µmol m-2 s-1. Foram obtidas 5 plantas transformadas, perfazendo uma média de eficiência de transformação de 1,53 %. A resistência das plantas foi observada somente por um dos isolados. Os resultados permitem concluir que as plantas de arroz transformadas com o gene da quitinase(Chit 1)podem reduzir o desenvolvimento do fungo B. oryzae, porém existe uma diferença na reação entre isolados.

This study aimed at a rice transformation for resistance to Bipolaris oryzae causal organism of Brown Spot, the cultivar BRS Taim and the line LBA 4404 of Agrobacterium tumefaciens transformed with plasmid pMOG 22 that codifies the chitinasegene Metarhizium anisopliae was used. Rice mesocotils immersed for 30 min in bacterial solution of OD600 = 0,7 with acetoceringone (100Mm), were co-cultivated for 72 hours in MS medium free of hormones and with 100Mm of acetoceringone. Mesocotils were then transferred to MS with 5mg L-1 de BAP and15 mg L-1 of higromicin for 45 days at 25°C and 16 ligth hours. The five transformed plants obtained (1,53 transformation rate) were inoculated with two B. oryzae isolates.Resistance was observed only with one of the isolates. The results indicate that rice plants transformed with chitinase gene (Chit 1)can reduce the colonization by some isolates of B. oryzae.

Bioassay for selection of biocontroller bacteria against bean common blight (Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli)

Emphasis has been given on selection of micro-organism for biological control. However, in order to evaluate the biological control potential of a great number of micro-organisms in a small period of time it is necessary to develop an efficient bioassay. Seven hundred and sixty bacterial isolates from different habitats, were selected for compatibility with Rhizobium leguminosarum bv. phaseoli (SEMIA 4077 e SEMIA 4080). Among them 596 isolates were ineffective against both rhizobia. Bean seeds immersed in suspension of each one of these isolates were agitated for 5 hours at 10°C and sowed in non-sterilized soil. The plants were kept in greenhouse. After the development of cotyledonary and primary leaves, these were removed and bioassayed for Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (XAP) control. In the cotyledonary leaves, it was observed that the isolate DFs093 offered 100 percent control, DFs041 and DFs1297 offered 90 percent and DFs490, DFs769, DFs831, DFs842 and DFs843 offered 80 percent control. In the primary leaves, the DFs482 isolated offered 100 percent and the DFs080, DFs348, DFs513, DFs622, DFs769, DFs842 and DFs912 offered 80 percent of XAP control.

Tem-se dado muita ênfase ao controle biológico mediante seleção de microorganismos. Porém, para se avaliar o potencial de biocontroladores de forma massal e em pequeno intervalo de tempo é necessário desenvolver um bioensaio eficiente. Bactérias de diferentes sítios, num total de 760 isolados, foram selecionadas para compatibilidade com Rhizobium leguminosarum bv. phaseoli estirpes SEMIA 4077 e SEMIA 4080, onde 596 isolados foram inefetivos contra ambos rizóbios. Sementes de feijão foram imersas em suspensão de cada um destes isolados sendo agitadas por 5 horas a 10°C, plantadas em solo não esterelizado, sendo as plantas mantidas em casa de vegetação. Após o desenvolvimento das folhas cotiledonares e folhas primárias, estas foram retiradas e avaliadas por bioensaio para o controle de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (XAP). Nas folhas cotiledonares, observou-se que o isolado DFs093, proporcionou 100 por cento de controle, DFs041 e DFs1297 propiciaram, 90 por cento e DFs490, DFs769, DFs831, DFs842 e DFs843 proporcionaram 80 por cento de controle. Nas folhas primárias, o isolado, DFs482 propiciou 100 por cento e os isolados DFs080, DFs348, DFs513, DFs622, DFs769, DFs842 e DFs912 proporcionaram 80 por cento de controle para XAP.