ABSTRACT
La polifenol oxidasa es la enzima responsable del pardeamiento de frutas y vegetales, en los que ocasiona disminución de las propiedades organolépticas y nutricionales. En este trabajo se evaluó la influencia de las condiciones de extracción (pH, concentración, composición del buffer y precipitación proteica) sobre la actividad de la polifenol oxidasa extraída de uchuva. La actividad polifenol oxidasa más alta se obtuvo al extraer la enzima utilizando buffer fosfato 0,2 M pH 6,0 suplementado con Triton® X-100 y polivinil pirrolidona y concentrando las proteínas con acetona fría en una proporción sobrenadante:acetona 1:1. Posteriormente, la polifenol oxidasase purificó parcialmente utilizando sistemas bifásicos acuosos formados por polietilenglicol y fosfato. Se evaluó el efecto de la composición de las fases, el peso molecular del polietilenglicol y el pH. Los mejores resultados se obtienen con un sistema formado por 5% de polietilenglicol 8000 y 14% de fosfato, en un pH de 5,5 con un factor de purificación de 4,65, un Ka de 4,70 y un porcentaje de rendimiento en la fase superior de 74,29%. Estos resultados indican un efecto significativo de las condiciones de extracción sobre la actividad polifenol oxidasa y proporcionan un método rápido, simple y eficiente para el aislamiento de esta enzima.
Polyphenol oxidase activity is responsible for the enzymatic browning of fruits and vegetables, and the endproducts of the catalyzed reaction are detrimental to food quality, in both sensory and nutritional properties. Inthis study we evaluated the influence of the extraction conditions (pH, concentration, composition of extractionbuffer and protein precipitation agent) on the activity of golden berry polyphenol oxidase. The extraction ofproteins with a mixture of Triton® X-100 and polyvinyl pyrrolidone in 0.2 M phosphate buffer at pH 6.0 andprecipitation with cold acetone in a ratio supernatant-acetone of 1:1 gave the higher polyphenol oxidase activity.Partial purification of polyphenol oxidase was achieved using an aqueous two-phase system composed bypolyethylene glycol and phosphate. Effect of phase composition, molecular weight of polythylene glycol and pHof the system on enzyme partitioning was studied. The optimum system was found at pH 5.5 containing 5%polythylene glycol 8000 and 14% phosphate, with Ka of 4.70, purification factor of 4.65 and a 74.29% yield ofenzyme activity in the top phase. These results show a significant effect of extraction conditions on polyphenoloxidase activity and provide a quick, simple and efficient method for polyphenol oxidase isolation.
Subject(s)
Phenols , PhysalisABSTRACT
En el desarrollo de estudios etnobotánicos o quimiotaxonómicos en búsqueda de sustancias biológicamente activas con efectos antiparasitarios a partir de plantas colombianas de la familia Annonaceae, fue observada la actividad antiplasmodial sustancial para los extractos de acetato de etilo de tallos de Rollinia pittieri y Pseudomalmea boyacana (Annonaceae). Los alcaloides aislados a partir de éstas fueron estudiados. De los compuestos, liriodenina presentó la mayor actividad contra las cepas de Plasmodium falciparum, sensible y resistente a cloroquina (CI50 = 8.0-10,0 µg/ml). Igualmente fue evaluada la capacidad de inhibición de la formación de la â-hematina (If?-h) a los metabolitos aislados. O-metilmoschatolina y melosmina presentaron porcentajes de inhibición mayor del 96 (por ciento) cuando fueron evaluados a una concentración de 2 mg/ml. Algún grado de actividad citotóxica fue observada en todos los alcaloides oxoaporfínicos aislados contra células U-937
Subject(s)
Plants , Alkaloids , EthnobotanyABSTRACT
Desde el descubrimiento de la penicilina, hace ya casi tres cuartos de siglo, se han venido produciendo numerosos antibióticos para el tratamiento de enfermedades infecciosas. Esto ha dado como resultado una importante disminución de este tipo de enfermedades y, en consecuencia, del número de muertes, sin embargo esta nueva generación de fármacos trajo como resultado un uso generalizado e indiscriminado que promovió el desarrollo de la resistencia bacteriana. Actualmente muchas investigaciones en el mundo buscan nuevas y efectivas propuestas para el manejo de las infecciones baterianas y desarrollan interesantes alternativas de solución. El secuenciamiento del genoma bacteriano para conocer blancos moleculares, el uso de bacteriófagos y la búsqueda de productos de origen natural y sintético que representan una fuente rica en compuestos con actividad biológica, son sólo una pequeña muestra de los diversos campos que se pueden explorar para encontrar una solución al problema de la resistencia bacteriana