ABSTRACT
La proquimosina de ternero fusionada al gen de la superóxido dismutasa humana (SOD) fue sintetizada en forma insoluble en Saccharomyces cerevisiae. Las condiciones que permiten la solubilización de la proteína fueron investigada, siendo la desnaturalización el proceso esencial mediante el cual es solubilizado más del 90 % del producto recombinante. Se estudiaron diferentes parámetros que intervienen en el proceso de renaturalización de la SOD proquimosina, describiéndose un procesamiento mediante el cual es posible recuperar el 25 % de la proquimosina soluble en su forma nativa. Más del 98 % de la proteína fue activada, obteniéndose un preparado enzimático cuya función biológica fue determinada mediante el proceso de coagulaciónm de la leche
Subject(s)
Cattle , Chymosin , Saccharomyces cerevisiae , Superoxide Dismutase , CubaABSTRACT
Se examinó el efecto de las condiciones de cultivo en la producción de la proteina fusionada SOD-proquimosina sintetizada en Sacharomyces cerevisiae bajo el control del fragmento corto del promotor que regula la síntesis de la enzima gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa. El proceso fermentativo de 5 y 50 l de cultivo, obteniéndose resultados similares en ambas escalas. Cuando las células son cultivadas en medio selectivo suplementado con sacarosa al 5 % e hidrolizado de caseina al 2 % utilizando un sistema batch, la concentración relativa de SOD-proquimosina es incrementada 1,7 veces, mientras que la utilización del cultivo incrementado aumenta aproximadamente 4 veces la masa celular y eleva significativamente la producción de la proteina recombinante a un nivel del 2 % del total de la proteina celular