Homocisteína plasmática total e fator von Willebrand no diabete melito experimental / Total plasmatic homocysteine and von Willebrand factor in experimental diabetes mellitus

OBJETIVOS: Determinar os valores plasmáticos de homocisteína e fator von Willebrand, como marcador de disfunção endotelial, em ratos com diabete melito induzido por estreptozotocina. MÉTODOS: Trinta e cinco ratos (rattus norvegicus albinus), machos, adultos (180-200 g), randomizados em três grupos: controle (n=10) não receberam agente ou veículo; sham (n=10) receberam solução veículo da estreptozotocina; e diabético (n=15) receberam estreptozotocina. Após oito semanas de indução do diabete melito, os animais foram pesados, anestesiados e tiveram sangue colhido da aorta abdominal para determinação dos valores de homocisteína plasmática total, fator von Willebrand e glicemia. RESULTADOS: O modelo experimental foi reprodutível em 100 por cento dos animais. A média das concentrações plasmáticas de homocisteína foi: 7,9 æmol/l (controle); 8,6 æmol/l (sham) e 6,1 æmol/l (diabético), com diferença entre os grupos (p<0,01). Pelo método de comparações múltiplas entre os grupos, observou-se que os valores no grupo diabético foram menores que no sham (p<0,01). A média dos valores do fator von Willebrand foi 0,15 U/l (controle), 0,16 U/l (sham) e 0,18 U/l (diabético), com diferença entre os grupos (p=0,03). A média dos seus valores no grupo diabético foi maior que no grupo controle (p<0,05). No grupo diabético não houve correlação entre homocisteína e fator von Willebrand. CONCLUSÃO: No diabete melito induzido por estreptozotocina constataram-se valores reduzidos de homocisteína e elevados de fator von Willebrand, sem, contudo, haver correlações entre si e com níveis de glicemia final.

OBJECTIVES: To determine the plasma homocysteine and von Willebrand factor levels as markers of endothelial dysfunction in rats with diabetes mellitus induced by streptozotocin. METHODS: Thirty-five adult male rats (Rattus norvegicus albinus) (weight between 180-200g) were randomized into three groups: control group (n=10), which received no drugs or vehicles; sham group (n=10), which received streptozotocin solution; and diabetic group (n=15), which received streptozotocin. Eight weeks after diabetes mellitus induction, the animals were weighed and anesthesized; blood samples were collected from abdominal aorta for plasma total homocysteine, von Willebrand factor and glucose levels. RESULTS: The experimental model was reproducible in 100 percent of animals. The mean plasma homocysteine levels were: 7.9 æmol/l (control), 8.6æmol/l (sham) and 6.1æmol/l (diabetic), with difference among the groups (p<0.01). Multiple comparison analysis among the groups showed that values in the diabetic group were lower than in the sham group (p<0.01). The mean von Willebrand factor values were 0.15 U/l (control), 0.16U/l (sham) and 0.18 U/l (diabetic), with difference among the groups (p=0.03). The mean value was higher in the diabetic group than in the control group (p<0.05). Correlation between homocysteine and von Willebrand factor was not observed in the diabetic group. CONCLUSION: Reduced homocysteine levels and increased von Willebrand factor levels were observed in diabetes mellitus induced by streptozotocin; nevertheless, there were no correlations between them and with final glucose levels.

Homocisteína / Homocysteine

A homocisteína, formada a partir da metionina hepática, é metabolizada nas vias de desmetilação e de transulfuração, sendo que seus valores plasmáticos e urinários refletem a síntese celular. Sua determinação, realizada em jejum e após sobrecarga de metionina, caracteriza as diferenças dessas vias metabólicas, principalmente quando de natureza genética. A hiper-homocisteinemia tem sido associada a maior risco de eventos aterotrombóticos, e a literatura sugere associação causal, independente de outros fatores de risco para doença arterial. Diminuição da homocisteína plasmática para valores normais é seguida de redução significante na incidência de doença aterotrombótica. A relação entre homocisteína e o fígado vem adquirindo importância nos dias atuais, uma vez que alterações das lipoproteínas e da depuração de metionina são comuns em pacientes com doença hepática crônica (hepatocelular e canalicular). O tratamento da hiper-homocisteinemia fundamenta-se na suplementação alimentar e medicamentosa de ácido fólico e vitaminas B6 e B12.

Elevação dos níveis séricos de laminina na cirrose hepática induzida pelo tetracloreto de carbono / Increased serum levels of laminin in the experimental cirrhosis induced by carbon tetrachloride

RACIONAL: Laminina sérica tem sido correlacionada com a hipertensão portal e a capilarização dos sinusóides na doença hepática crônica. Pouco é conhecido sobre sua dinâmica nas doenças hepáticas. OBJETIVO: Estudar os níveis séricos de laminina e correlacioná-los com graus de fibrose hepática e hipertensão portal em ratos tratados com tetracloreto de carbono. MATERIAL E MÉTODO: Quarenta e nove ratos albinos Wistar foram mantidos como controles (n = 16) ou tratados com solução de tetracloreto de carbono a 8 por cento (n = 23). Entre a 6a e 16a semana de experimento animais foram sacrificados após cateterização da veia porta e medida da pressão portal. Fragmentos de fígado foram fixados em formol para microscopia óptica. A fibrose hepática foi classificada em perivenular, septal incompleta e completa e cirrose. Concentração de laminina circulante foi determinada pela técnica de ensaio imunoenzimático com anticorpo desenvolvido a partir de laminina isolada de tumor Engelbreth-Holm-Swarm e purificado em coluna de afinidade. RESULTADOS: A pressão portal correlacionou-se com grau de fibrose hepática (r = 0,82; n = 45) e seus níveis nos grupos fibrose septal (10,8 ± 1,2 cm H2O) e cirrose (13,6 + 3,1 cm H2O) foram estatisticamente superiores aos observados no grupo-controle (7,9 + 1,5 cmH2O) e no grupo com fibrose perivenular (9,1 + 0,8 cmH2O). A concentração de laminina no sangue periférico dos cirróticos (40,0 + 18,7 µg/dL) foi significativamente superior aos grupos-controle (13,8 + 12,1 µg/dL), fibrose perivenular (19,1 + 15,5) e fibrose septal (22,2 + 27,0 µg/dL). Laminina circulante correlacionou-se de maneira significativa com o grau de fibrose hepática (r = 0,59; n = 49) e com os níveis de pressão portal (r = 0,29; n = 45). CONCLUSÕES: Na intoxicação crônica experimental pelo tetracloreto de carbono, níveis circulantes de laminina correlacionam-se mais com o grau de fibrose hepática do que com os níveis de hipertensão portal.

Estudo da laminina sérica e de sua deposiçäo no fígado de ratos com fibrose hepática induzida por tetracloreto de carbono / Serum laminin and its deposition in the liver of rats with carbon tetrachloride-induced fibrosis

Laminina sérica tem sido correlacionada com hipertensão portal e capilarização dos sinusóides nas hepatopatias crônicas. Entretanto, pouco se conhece sobre sua dinâmica nas doenças hepáticas. Neste trabalho, objetivou-se estudar níveis séricos e deposição de laminina no tecido hepático, correlacioná-la com graus de fibrose hepática e hipertensão portal experimentalmente induzidas. 59 Ratos albinos Wistar foram mantidos como controles ou tratados com solução 8 por cento de CCl4. Entre a 6 a e 16 a semana de experimento, 16 controles e 33 tratados COM CCl4 foram sacrificados, submetidos a cateterização da veia porta, medida da pressão portal em coluna líquida e coleta de sangue da veia porta, veia supra-hepática e veia femoral. Dez ratos (quatro controles e seis tratados) foram submetidos a coleta de sangue da aorta abdominal, veia porta e veia supra-hepática. Fragmentos de fígado foram fixados em glutaraldeído 2 por cento para microscopia eletrônica, congelados em nitrogênio líquido para imunohistoquímica e fixados em formol para microscopia óptica. A fibrose hepática foi classificada como fibrose perivenular, fibrose septal completa, incompleta e cirrose. Determinação da concentração de laminina circulante foi realizada pela técnica de ensaio imunoenzimático com anticorpo desenvolvido a partir de laminina isolada de tumor Engelbreth-Holm-Swarm, purificado em coluna de afinidade. O anticorpo foi também utilizado para imunohistoquímica, com anticorpo secundário biotinilado (titulação 1/500). A microscopia eletrônica mostrou alterações estruturais na fibrose septal e principalmente na cirrose, com substância amorfa eletrondensa depositada no espaço de Disse e desaparecimento das fenestrações sinusoidais. A pressão portal correlacionou-se com grau de fibrose hepática (r = O,82; P < O,OO1; n=45) e seus níveis nos grupos fibrose septal (1O,8 + 1,2 cmH2O) e cirrose (l3,6 + 3,1 CmH2O) foram estatisticamente superiores aos grupos controle (7,9 + 1,5 cmH2O) e flbrose perivenular (9,1 + O,8 cmH2O). A concentração de laminina no sangue periférico do grupo cirrose (40,0 + 18,7 mg/dL) foi significantemente superior aos grupos controle (l3,8 + 12,1 mg/dL), fibrose perivenular (l9,l + 15,5 mg/dL) e fibrose septal (22,2 + 27,0 mg/dL). A laminina circulante correlacionou-se com grau de flbrose hepática (r O,59; P < O,01; n= 49) e em menor grau com a pressão portal (r = O,29; P O,05; n=45). Houve correlação estatisticamente significante entre as ...(au)

O diagnóstico do carcinoma hepatocelular (CHC) realizado através da pesquisa de marcadores sorológicos tumorais / Diagnosis of hepatocellular carcinoma performed by the search of serologic tumor markers

Níveis séricos de fosfatase alcalina, gama-glutamiltransferase, alfa-L-fucosidase e glutation-S-transferase, encontram-se elevados em 60, 90, 75 e 64% dos pacientes com carcinoma hepatocelular. Nestes hepatopatas, a concentraçäo plasmática de fibrinogênio atinge 461,78 mg/dl, enquanto a cupremia situa-se em torno de 200,50 mg/dl. Já a Des-gama-carboxiprotrombina aumenta, atingindo 900 mg/ml em 67% deles, 60% dos quais säo portadores do vírus da hepatite B, geralmente anti "e" positivos. Cerca de 40-95% deles revelam níveis séricos elevados de alfa fetorproteína (AFP). Os autores enfatizam que os cirróticos, sejam ou näo portadores do vírus da hepatite B, sobretudo os que apresentam alteraçöes desta proteína oncofetal, realizem periodicamente ultra-som do fígado, ou seja, a cada 6 meses. Este método de imagem mostra-se mais sensível que AFP (72% x 25%) respectivamente na detecçäo desta neoplasia maligna, com diâmetro menor que 2 cm