Phlebotomine sandfly (Diptera: Psychodidae) diversity and their Leishmania DNA in a hot spot of American Cutaneous Leishmaniasis human cases along the Brazilian border with Peru and Bolivia

In this study, we identified the phlebotomine sandfly vectors involved in the transmission of American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) in Assis Brasil, Acre, Brazil, which is located on the Brazil-Peru-Bolivia frontier. The genotyping of Leishmania in phlebotomines was performed using polymerase chain reaction (PCR) and PCR-restriction fragment length polymorphism. A total of 6,850 sandflies comprising 67 species were captured by using CDC light traps in rural areas of the municipality. Three sandfly species were found in the state of Acre for the first time: Lutzomyia georgii, Lu. complexa and Lu. evangelistai. The predominant species was Lu. auraensis/Lu. ruifreitasi and Lu. davisi (total 59.27%). 32 of 368 pools were positive for the presence of Leishmania DNA (16 pools corresponding to Lu. davisi, and 16 corresponding to Lu. auraensis/Lu. ruifreitasi), with a minimal infection prevalence of 1.85% in Lu. davisi and 2.05% in Lu. auraensis/Lu. ruifreitasi. The Leishmania species found showed maximum identity with L. (Viannia) guyanensis and L. (V.) braziliensis in both phlebotomine species. Based on these results and similar scenarios previously described along the Brazil/Peru/Bolivia tri-border, the studied area must take into consideration the possibility of Lu. davisi and Lu. auraensis/Lu. ruifreitasi as probable vectors of ACL in this municipality.

Sandfly fauna (Diptera: Psychodidae) from caves in the state of Rondônia, Brazil / Fauna de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) em cavernas do estado de Rondônia, Brasil

Abstract This study had the aim of ascertaining the sandfly fauna and possible presence ofLeishmania in these insects, collected in caves in the state of Rondônia, Brazil. Collections were conducted in eight caves located in two different areas of this state. Leishmania in the sandflies collected was detected using the polymerase chain reaction (PCR). This was the first study on sandflies from caves in Rondônia and, among the total of 1,236 individuals collected, 24 species and 10 genera were identified. The speciesEvandromyia georgii was collected for the first time in Rondônia and the most abundant species were Trichophoromyia ubiquitalis with 448 individuals (36.2%), followed by T. octavioi with 283 (22.9%) and E. georgii with 179 (14.5%). For the PCR, 17 pools were analyzed and five pools were positive (forT. auraensis in three pools and for Nyssomyia shawi and N. antunesi in one pool each). The kDNA region was amplified and the presence of Leishmania DNA was confirmed. The sandfly fauna in these caves can be considered diverse in comparison with similar studies in other regions. It may be that some species use caves as a temporary shelter and breeding site, while other species live exclusively in this environment. The detection of LeishmaniaDNA indicates that this pathogen is circulating in cave environments and that further studies are needed in order to ascertain the risks of infection by leishmaniasis in these locations with high touristic potential.

Resumo O objetivo deste estudo foi conhecer a fauna de flebotomíneos, e possível presença de Leishmania nestes insetos, coletados em cavernas do Estado de Rondônia. As coletas foram realizadas em oito cavernas localizadas em duas áreas diferentes do Estado. A detecção de Leishmania nos flebotomíneos foi realizada por reação em cadeia da polimerase (PCR). Este foi o primeiro trabalho com flebotomíneos em cavernas de Rondônia e um total de 1,236 indivíduos foram coletados e identificados em 24 espécies e 10 gêneros.Evandromyia georgii foi coletada pela primeira vez em Rondônia, e as espécies mais abundantes foram Trichophoromyia ubiquitalis com 448 indivíduos (36.2%) seguida por T. octavioi com 283 (22.9%) e E. georgii com 179 (14.5%). No estudo de PCR, 17 pools foram analisados, sendo cinco positivos (T. auraensis - 3, Nyssomyia shawi eN. antunesi - 1 cada). A região do kDNA foi amplificada confirmando a presença de DNA de Leishmania. A fauna de flebotomíneos nestas cavernas foi considerada diversa quando comparada com estudos semelhantes de outras regiões. É possível que algumas espécies utilizem cavernas como abrigo temporário e local de procriação e outras sejam exclusivas deste ambiente. A detecção de DNA de Leishmania indica que este patógeno está circulando no ambiente cavernícola, sendo necessários mais estudos para conhecer o risco de transmissão de leishmanioses nestes locais com alto potencial turístico.

Canine heartworm disease in Porto Velho: first record, distribution map and occurrence of positive mosquitoes / Dirofilariose canina em Porto Velho: primeiro registro, mapa de distribuicao e ocorrencia de mosquitos positivos

The aim of this study was to make the first report on canine heartworm disease in the state of Rondônia and confirm its transmission in this state. Blood samples were randomly collected from 727 dogs in the city of Porto Velho. The samples were analyzed to search for microfilariae and circulating antigens, using three different techniques: optical microscopy on thick blood smears stained with Giemsa; immunochromatography; and PCR. Mosquitoes were collected inside and outside the homes of all the cases of positive dogs and were tested using PCR to search for DNA of Dirofilaria immitis. Ninety-three blood samples out of 727 (12.8%) were positive according to the immunoassay technique and none according to the thick smear method. Among the 93 positive dogs, 89 (95.7%) were born in Porto Velho. No difference in the frequency of infection was observed between dogs raised indoors and in the yard. PCR on the mosquitoes resulted in only one positive pool. This result shows that the transmission of canine heartworm disease is occurring in the city of Porto Velho and that there is moderate prevalence among the dogs. The techniques of immunochromatography and PCR were more effective for detecting canine heartworm than thick blood smears. The confirmation of canine heartworm disease transmission in Porto Velho places this disease in the ranking for differential diagnosis of pulmonary nodules in humans in Rondônia.

O objetivo deste estudo foi de registrar pela primeira vez a dirofilariose canina no estado de Rondônia e confirmar sua transmissão neste estado. Amostras de sangue de 727 cães foram colhidas aleatoriamente na cidade de Porto Velho. As amostras foram analisadas em busca de microfilárias e antígenos circulantes usando três técnicas diferentes: microscopia ótica de gota espessa corada com Giemsa e imunocromatografia de fluxo lateral e PCR. Mosquitos foram colhidos no domicilio e peridomicílio de todos os casos de cães positivos, estes mosquitos foram testados pela PCR na detecção de DNA de Dirofilaria immitis. Noventa e três das 727 amostras de sangue foram positivas na técnica de imunoensaio (12,8%). Nenhuma amostra foi positiva na gota espessa. Entre os 93 cães positivos, 89 (95,7%) foram nascidos em Porto Velho. Nenhuma diferença na frequencia de infecção foi observada entre cães criados dentro da casa ou no quintal. O PCR dos mosquitos resultou em apenas um pool positivo. Este resultado mostra que a transmissão de dirofilariose canina está ocorrendo na cidade de Porto Velho e a frequência que ocorre nos cães é considerada moderada. As técnicas de imunocromatografia e PCR são mais eficazes na detecção de dirofilariose comparadas a gota espessa. A confirmação de transmissão de dirofilariose canina em Porto Velho, coloca esta doença no ranking de diagnóstico diferencial de nódulos pulmonares em seres humanos em Rondônia.

Subconjunctival Loa loa worm: first case report in Brazil / Verme subconjuntival da espécie Loa loa: primeiro caso no Brasil

We report the first case of ocular infestation by Loa loa in Brazil. Loiasis is caused by infestation with Loa loa, a filarial parasite originally found in the rainforests of western and central Africa. It is transmitted by the bite of the fly Chrysops and has been recently described in other places other than Africa, in African immigrants or travellers. Our case is a 33 year-old woman from Cameroon who was living in São Paulo, Brazil, for 5 years. She was asymptomatic until one morning she started feeling "something moving" in the left eye. Under topical anesthesia, on the slit lamp, a moving worm was removed from the subconjunctival space, which later was confirmed to be a male Loa loa adult specimen. Blood tests revealed microfilaraemia of 129 mf/mL. The patient was treated with 400 mg oral albendazole for 3 weeks and 60 mg prednisone. This report illustrates an unusual ocular disease, which is extremely rare outside of Africa, but easily diagnosed and treated. Ophthalmologists should be aware of it, in face of an increasingly globalized world.

Este é o primeiro relato na literatura nacional e internacional de infestação ocular por Loa loa no Brasil. A loíase é uma filariose causada pelo parasita Loa loa, encontrado nas florestas tropicais da África equatorial. A transmissão se dá pela picada do mosquito Chrysops e casos têm sido descritos em países não africanos, em imigrantes e viajantes. O presente caso trata-se de uma paciente de 33 anos natural de Camarões e residente em São Paulo, Brasil, há 5 anos. Até então assintomática, uma manhã sentiu algo "se mexendo" em seu olho esquerdo. Sob anestesia tópica, na lâmpada de fenda, um verme altamente móvel foi removido do espaço subconjuntival e enviado para identificação, que confirmou tratar-se de um espécime macho adulto de Loa loa. Testes sanguíneos revelaram microfilaremia de 129 mf/mL. A paciente foi tratada com albendazol 400 mg e prednisona 60 mg esquema regressivo por 3 semanas. Este relato ilustra uma doença excepcionalmente rara no Brasil, e praticamente desconhecida dos oftalmologistas em nosso país.

Investigation of the occurrence of Mansonella ozzardi in the State of Rondônia, Western Amazonia, Brazil / Investigação da ocorrência da Mansonella ozzardi no Estado de Rondônia, Amazônia Ocidental

INTRODUCTION: Mansonella ozzardi, a human filarial nematode transmitted by Diptera Simuliidae flies (black flies), is widely spread in the Amazon, while the occurrence of mansonelliasis in the State of Rondônia (Western Amazonia) has not been reported thus far. The existence of this parasitic disease in this state is investigated in this study. METHODS: A total of 4,452 people who lived alongside the Madeira, Mamore, Guapore, Machado and Preto Rivers, in the State of Rondônia, were examined using the thick blood smear method. Alongside the Machado and Guapore rivers, 2,112 adult simuliid specimens were captured. RESULTS: Infected people were not reported, although simuliids with vector potential such as Cerqueirellum pydanielli, C. argentiscutum and C. amazonicum were found. CONCLUSIONS: This study registered no infected people. This finding may be explained by the individuals' low level of microfilaremia that is below the limit of detection of the diagnostic method used in the study or insufficient migration of people infected with M. ozzardi from endemic areas, making it impossible to introduce the disease into Rondônia. Further studies using more sensitive diagnostic techniques could shed light on this question.

INTRODUÇÃO: Mansonella ozzardi é uma filária humana que tem como vetor dípteros simulídeos e é amplamente distribuída na Amazônia. Não há informações sobre a ocorrência de casos de mansonelose no Estado de Rondônia, e neste trabalho procurou-se investigar a situação epidemiológica desta parasitose em áreas urbanas e ribeirinhas na Amazônia Ocidental. MÉTODOS: Foram examinados 4.452 moradores às margens dos rios Madeira, Mamoré, Guaporé, Machado e Preto em Rondônia, através da técnica da gota espessa de sangue. Capturou-se às margens do rio Machado e Guaporé 2.112 simulídeos adultos das espécies Cerqueirellum pydanieli e Chirostilbia pertinax. RESULTADOS: Não foram encontradas pessoas infectadas com M. ozzardi e foram encontradas diferentes espécies de simulídeos com potencial de transmissão da mansonelose. CONCLUSÕES: Não foram encontrados indivíduos infectados com M. ozzardi neste estudo. Este fato pode ser explicado pela existência de pacientes com baixas microfilaremias, associado à técnica diagnóstica de baixa sensibilidade utilizada no estudo. Pode-se ainda aventar a possibilidade de ter ocorrido migração insuficiente de pacientes infectados de áreas endêmicas, impossibilitando a implantação da endemia. Estudos posteriores com técnicas diagnósticas mais sensíveis podem ajudar a esclarecer esta questão.

Ocorrência da Mansonella ozzardi (Nematoda, Onchocercidae) em comunidades ribeirinhas do rio Purus, Município de Boca do Acre, Amazonas, Brasil / Occurrence of Mansonella ozzardi (Nematoda, Onchocercidae) in riverine communities of the Purus river, Boca do Acre municipality, Amazonas State, Brazil

Este estudo teve o objetivo de estimar as prevalências de Mansonella ozzardi e calcular taxa de infecção parasitária nos simulídeos. O trabalho foi realizado em comunidades ribeirinhas do rio Purus, Boca do Acre, Amazonas, Brasil. As prevalências foram obtidas por meio do método de gota espessa de sangue obtido por porção digital. Os simulídeos coletados foram dissecados para estimar a taxa de infecção parasitária. A prevalência de M. ozzardi foi de 27,3 por cento (282/77). Foram observadas maiores prevalências nos homens (31,97 por cento) que nas mulheres (22,22 por cento), nos agricultores (48 por cento) e nos indivíduos entre: 38-47 (60 por cento), 48-57 (66,66 por cento) e 58-67 (75 por cento). A microfilaremia foi maior nos indivíduos entre 58-67 anos (média = 58,41mf/40µL), sexo masculino (41,44mf/40µL) e nos agricultores (49,94mf/40µL). Somente o simulídeo Cerqueirellum amazonicum foi encontrado infectado com taxa de infecção parasitária de 0,98 por cento.

The study aimed to estimate the prevalence of Mansonella ozzardi and calculate the parasitic infection rate in simuliid blackflies. The research was conducted in communities on the Purus River, Boca do Acre municipality, Amazonas State, Brazil. Prevalence was measured using the thick smear method. Captured blackflies were dissected to verify the parasitic infection rate. M. ozzardi prevalence was 27.30 percent (77/282). The study showed higher prevalence in men (31.97 percent) than women (22.22 percent), farmers (48.99 percent), and individuals in the 38-47 (60.00 percent), 48-57 (66.66 percent), and 58-67-year age brackets (75.00 percent). Microfilaremia was higher in individuals 58 to 67 years of age (average= 58.41mf/40µl), men (41.44mf/40µl), and farmers (49.94mf/40µl). Only the simuliid Cerqueirellum amazonicum was found infected with a parasitic infection rate of 0.98 percent.

Current profile of Mansonella ozzardi (Nematoda: Onchocercidae) in communities along the Ituxi river, Lábrea municipality, Amazonas, Brazil

The objective of this paper was to describe the current status of Mansonella ozzardi prevalence among the inhabitants of 12 communities along the Ituxi river, in Lábrea municipality, state of Amazonas. The prevalence of M. ozzardi was determined using thick blood smears obtained by digital punctures. M. ozzardi was found in 30.23 percent of the samples collected (39/129), with similar prevalence between genders (males: 30.30 percent; females: 30.16 percent); the highest prevalence was found in homemakers (45.45 percent) followed by farmers (38.77 percent). Among age groups, males and females older than 48 exhibited the highest rates. These results show a significative increase in the prevalence when compared to a epidemiological study made 26 years ago in the same area as well as a different epidemiological profile (gender and occupation) in relation to other areas in Amazonas.