ABSTRACT
El objetivo del presente trabajo fue la producción, caracterización y aplicación de anticuerpos monoclonales anti-antígeno carcinoembrionario. Ratones Balb/c fueron inmunizados con 2 dosis ip de 5 y 10 microng de antígeno carcinoembrionario en adyuvante completo de Freund cada 30 días, y 3 dosis de refuerzo durante días consecutivos. Las células esplénicas fueron fusionadas con células de mieloma X63/Ag8.653 en presencia de polietilenglicol, y los híbridos rescatados en medio selectivo conteniendo hipoxantina-methotrexate-timidina. La detección de híbridos productores de anticuerpos monoclonales dirigidos contra el antígeno se realizó por radioinmunoanálisis en fase sólida, utilizando como trazador imunoglobulina de conejo anti-ratón marcada con 125I. Se obtuvo una eficiencia del 65% en crescimiento y del 13% en positividad. Los híbridos fueron clonados y estabilizados por miniclonado repetitivo, con un 65% de crecimiento y 40% de positividad. De 11 hibridomas productores se seleccionaron 3 que fueron inyectados en ratones BALB/c para la obtención de tumores ascíticos. La inmuno-especificidad de los anticuerpos monoclonales A4, A15 y A19 fue determinada por inmunoelectroforesis crozada, detectándose la formación de inmunoprecipitados específicos entre los anticuerpos monoclonales y el antígeno carcinoembrionario marcado con 125I. El anticuerpo monoclonal A4, de altas afinidad (K=1,60x10*10 litros/mol) fue activo en el radioinmunoensayo hasta la dilución 1: 10 000 testada, permitiendo detectar valores de aproximadamente 0,5ng/ml. En ensayos de competición contra el anticuerpo policlonal, el rango de inhibición obtenido fue del 28 al 35% utilizando antígeno purificado, y del 10 al 15% con sueros de pacientes afectados por cáncer de colon...
Subject(s)
Mice , Animals , Humans , Female , Antibodies, Monoclonal/biosynthesis , Antibody Specificity/methods , Carcinoembryonic Antigen/isolation & purification , Hybridization, Genetic , Hybridomas/immunology , In Vitro Techniques , Antibodies, Monoclonal/isolation & purification , Culture Techniques , Hybridomas/transplantation , Mice, Inbred BALB CSubject(s)
Child, Preschool , Child , Adolescent , Adult , Middle Aged , Humans , Male , alpha-Fetoproteins , Chorionic Gonadotropin , Testicular Neoplasms , DysgerminomaSubject(s)
Adult , Middle Aged , Humans , Esophageal Neoplasms , Dinitrochlorobenzene , Lymphocytes , Skin TestsSubject(s)
Adult , Middle Aged , Humans , Male , Female , Immunocompetence , Lung Neoplasms , DinitrochlorobenzeneABSTRACT
Desde un punto de vista clinico-quirurgico frente a un paciente que presenta uno o varios nodulos pulmonares que se acompanan de lesiones cutaneas o viscerales, con o sin alteraciones inmunologicas demostrables, se debe pensar en una granulomatosis linfamotoidea. Ante la sospecha clinica,la confirmacion del diagnostico se establece unicamente por el estudio histomorfologico La naturaleza y comportamiento de esta enfermedad se deben investigar con tecnicas inmunologicas e histoquimicas las que proveen una orientacion terapeutica. Se presenta un enfermo de 39 anos de edad, con una granulomatosis linfomatoidea de localizacion pulmonar, muscular, ganglios mesentericos e intestino delgado. Esta ultima no ha sido descripta en la literatura a nuestro alcance. Se efectuo estudio inmunohistoquimico, estableciendose como caracteristicas del infiltrado, ser linfoideo B policlonal