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1.
Braz. arch. biol. technol ; 51(spe): 121-126, Dec. 2008. ilus, tab
Article in English | LILACS | ID: lil-508865

ABSTRACT

Reactive oxygen species (ROS) can induce lesions in different cellular targets, including DNA. Stannous chloride (SnCl2) is a ROS generator, leading to lethality in Escherichia coli (E. coli), with the base excision repair (BER) mechanism playing a role in this process. Many techniques have been developed to detect genotoxicity, as comet assay, in eukaryotic cells, and plasmid DNA agarose gel electrophoresis. In this study, an adaptation of the alkaline gel electrophoresis method was carried out to ascertain the induction of strand breaks by SnCl2 in bacterial DNA, from E. coli BER mutants, and its repair pathway. Results obtained show that SnCl2 was able to induce DNA strand breaks in all strains tested. Moreover, endonuclease IV and exonuclease III play a role in DNA repair. On the whole, data has shown that the alkaline gel electrophoresis assay could be used both for studying DNA strand breaks induction and for associated repair mechanisms.


Espécies reativas de oxigênio (ERO) podem induzir lesões em diferentes alvos celulares, incluindo o DNA. O cloreto estanoso (SnCl2) é um gerador de ERO que induz letalidade em E. coli, sendo o reparo por excisão de bases (BER) um mecanismo importante neste processo. Técnicas como o ensaio cometa (em eucariotos) e a eletroforese de DNA plasmidial em gel de agarose têm sido utilizadas para detectar genotoxicidade. No presente estudo, uma adaptação do método de eletroforese em gel alcalino de agarose foi usada para verificar a indução de quebras, pelo SnCl2, no DNA de E. coli, bem como a participação de enzimas do BER na restauração das lesões. Os resultados mostraram que o SnCl2 induziu quebras no DNA de todas as cepas testadas. Além disso, endonuclease IV e exonuclease III estão envolvidas na reparação dos danos. Em resumo, os dados obtidos indicam que a metodologia de eletroforese em gel alcalino de agarose pode ser empregada tanto para o estudo de quebras no DNA, quanto para avaliação dos mecanismos de reparação associados.

2.
Braz. arch. biol. technol ; 47(2): 199-204, June 2004. tab
Article in English | LILACS | ID: lil-362280

ABSTRACT

Ratos Wistar jovens e adultos foram submetidos a esplenectomia total e comparados a animais não submetidos a qualquer procedimento cirúrgico para avaliar essa função fagocitária do baço. Dezesseis semanas após, os animais foram inoculados, por via intravenosa, com uma suspensão de Escherichia coli marcada com tecnécio-99m e, vinte minutos após, foram mortos. Fígado, pulmão, baço e uma amostra de coágulo sangüíneo foram retirados para determinação da captação bacteriana. Não foram encontradas diferenças significativas no percentual de captação bacteriana nos órgãos do SMF entre ratos esplenectomizados jovens ou adultos. Entretanto, o índice fagocitário dos macrófagos dos órgãos do Sistema Mononuclear Fagocitário (SMF) foi menor nos animais esplenectomizados que no grupo controle. Ratos esplenectomizados apresentaram um percentual de captação de bactérias na corrente sangüínea maior que os animais do grupo controle (p<0,0001), devido a um maior remanescente de bactérias na corrente sangüínea. Esse achado sugere que, na asplenia, ocorre alguma falha no SMF, demonstrando a necessidade do desenvolvimento de técnicas operatórias alternativas à esplenectomia total para pacientes que necessitam da remoção do baço.

3.
Acta cir. bras ; 17(6): 388-393, 2002. tab
Article in Portuguese | LILACS | ID: lil-325073

ABSTRACT

OBJETIVO: O baço, como maior órgão linfóide do corpo humano, apresenta funções imunológicas relevantes, tais como depuração de bactérias da corrente sangüínea e produção precoce de anticorpos contra várias partículas antigênicas. Fígado, pulmão e baço apresentam mais de 95 por cento da atividade fagocitária em humanos. MÉTODOS: Ratos jovens e adultos de ambos os sexos foram submetidos a esplenectomia total e comparados com animais não submetidos a tratamento cirúrgico, visando a avaliação dessa função. Após 16 semanas, os ratos de ambos os grupos foram inoculados, por via intravenosa, com suspensão de Escherichia coli marcada com tecnécio-99m, e depois de 20 minutos, foram mortos. Fígado, pulmão, baço e uma amostra de coágulo sangüíneo foram removidos para determinação da contagem radioativa. O estudo estatístico foi realizado pelo teste t de Student. RESULTADOS: Não ocorreram diferenças no percentual de captação obtido em ratos esplenectomizados jovens ou adultos. Entretanto, esses animais apresentaram contagens sangüíneas mais elevadas que os ratos do grupo controle (p<0,0001), devido a maior remanescente bacteriano na corrente sangüínea. CONCLUSÃO: Esse achado sugere ocorrer alguma falha no sistema mononuclear fagocitário em sua adaptação à ausência do baço e ratifica a necessidade de desenvolvimento de técnicas cirúrgicas alternativas à esplenectomia total para emprego em pacientes em que seja necessária a remoção esplênica.


Subject(s)
Animals , Male , Female , Rats , Spleen/physiology , Escherichia coli , Phagocytosis , Rats, Wistar , Splenectomy , Technetium
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