Cell surface hydrophobicity and biofilm formation of candida yeast species in different culture media / Hidrofobicidade da superfície celular e formação de biofilme de Candida sp em diferentes meios de cultura

Cell surface adhesion is considered an essential step in the spread, infection and persistence of Candida yeasts in the host. Their ability to adhere on biotic and abiotic surfaces depends on several factors, including hydrophobicity. Once attached, these yeasts are capable of growing in biofilms, which are constituted of structured communities of encapsulated cells within an extracellular matrix, resistant to antifungal agents. In this context, this study aimed to analyze the cell surface hydrophobicity and specific biofilm formation of six Candida strains in different culture media: Sabouraud dextrose broth (SDB), artificial saliva (AS), Roswell Park Memorial Institute medium (RPMI 1640) and N-acetylglucosamine-yeast nitrogen base proline (NYP). Six yeasts of the genus Candida were studied: three C. albicans (Ca): Ca ATCC 10231 and the clinical isolates Ca34 and Ca05 and C. parapsilosis (Cp): Cp ATCC 22019 and the clinical isolates Cp120 and Cp38. Hydrophobicity was calculated as the percentage reduction in turbidity of the aqueous phase, due to the retention of the hydrophobic cells in hydrocarbon by the hydrocarbon-water biphasic assay following the MATH (Microbial Adhesion to Hydrocarbon) method. The biofilm formation index was calculated as the optical density obtained by the growth of the yeasts in the culture media in a polystyrene microtiter plate, subsequently stained with 1% violet crystal. The results showed that hydrophobicity varied according to the media and the yeasts studied, and two of these (Ca34 and Ca10231) presented significant variation between the media. A more hydrophobic character was observed in yeasts grown on RPMI-1640 medium, and those grown on Sabouraud dextrose broth appeared more hydrophilic. The specific biofilm formation index was more intense for RPMI 1640 than in other media, which was expected, due to its ability to induce the transition between yeast-hyphae morphology, which is one of the key factors involved in the adhesion of C. albicans on different surfaces. RPMI 1640 was the best medium for obtaining biofilm in vitro, due to its greater hydrophobicity, which can enhance cell adhesion to the polystyrene plate, and due to its nutrient content, necessary for complete cell growth and biofilm formation.

A adesão é considerada um passo essencial para a disseminação, infecção e persistência das leveduras do gênero Candida nos hospedeiros. A habilidade dessas leveduras em se aderir a superfícies bióticas e abióticas depende de fatores, incluindo a hidrofobicidade da superfície celular. Uma vez aderidas, estas leveduras são capazes de crescer como biofilmes, os quais são caracterizados como comunidades estruturadas de células encapsuladas dentro de uma matriz extracelular, resistentes a drogas antifúngicas. Neste contexto, objetivou-se analisar a hidrofobicidade da superfície celular e a formação específica de biofilme de Candida spp. em diferentes meios de cultura: caldo Sabouraud dextrose (CSD), saliva artificial (SA), Roswell Park Memorial Institute medium (RPMI 1640) e N-acetylglucosamineyeast nitrogen base-proline (NYP). Foram estudadas seis leveduras do gênero Candida, sendo três C. albicans (Ca): Ca ATCC 10231 e os isolados clínicos Ca34 e Ca05 e C. parapsilosis (Cp): Cp ATCC 22019 e os isolados clínicos Cp120 e Cp38. A hidrofobicidade foi calculada como a porcentagem da redução da turbidez da fase aquosa, devido a retenção das células hidrofóbicas no hidrocarboneto pelo método bifásico água-hidrocarboneto MATH (Teste de Adesão Microbiana a Hidrocarbonetos). O índice de formação de biofilme foi calculado com as densidades ópticas obtidas por meio do crescimento das leveduras nos meios de cultura em poços de placa de microtitulação de poliestireno e posteriormente corados com cristal violeta a 1%. Os resultados demonstraram que a hidrofobicidade variou de acordo com os meios e as leveduras estudadas, sendo que duas (Ca34 e Ca10231) apresentaram variação significativa entre os meios. Foi verificado um caráter mais hidrofóbico das células crescidas em RPMI 1640 e mais hidrofílico nas células crescidas em caldo Sabouraud dextrose. A formação específica de biofilme apresentou-se mais intensa em RPMI 1640 do que nos outros meios, o que já era esperado pela sua capacidade de induzir o processo de transição levedura-hifa, o qual é considerado um dos fatores cruciais envolvidos na adesão de leveduras. Com os resultados obtidos, infere-se que o RPMI 1640 é o melhor meio para obtenção de biofilme in vitro, pois as células foram mais hidrofóbicas, o que pode aumentar a adesão das

Avaliação pré-operatória: triagem por meio de questionário / Preoperative evaluation: screening using a questionnaire / Evaluación preoperatoria: selección por medio de cuestionario

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Antes de cirurgia eletiva é indispensável conhecer com antecedência as condições clínicas do paciente. O objetivo deste estudo foi comparar a avaliação pré-operatória (APO) por meio do preenchimento de um questionário com a consulta realizada pelo anestesiologista. MÉTODO: Antes da consulta pré-operatória, os pacientes responderam a um questionário com informações sobre idade, peso, altura, cirurgia planejada, história médica e cirúrgica pregressa, alergias, medicamentos e doses usadas, história social (drogas ilícitas, álcool, tabagismo), capacidade funcional e tolerância ao exercício. A consulta pré-operatória foi realizada por anestesiologista que não tinha acesso aos dados do questionário nem conhecimento da pesquisa. Os dados obtidos por meio do questionário foram comparados com a consulta pré-operatória por dois pesquisadores independentes, com a finalidade de responder às perguntas: 1) A avaliação pelo questionário foi suficiente - o paciente poderia ser conduzido à cirurgia sem necessidade da avaliação presencial? 2) Houve alguma informação relevante - capaz de mudar a conduta anestésica - que o questionário não aferiu, mas que a consulta presencial avaliou? 3) Houve alguma informação acrescentada pelo questionário de saúde que a consulta presencial não obteve? Para análise estatística usou-se o teste t de Student pareado para dados paramétricos e o teste Qui-quadrado para dados categóricos com P < 0,05. RESULTADOS: Dentre os 269 pacientes elegíveis houve uma recusa, quatro aceitaram participar mas não preencheram o questionário e houve 52 perdas, totalizando 212 participantes. O questionário acrescentou dados à consulta em 109 casos (51,4%). A triagem apenas pelo questionário foi suficiente - não necessitou de consulta presencial - em 144 pacientes (67,93%). A avaliação realizada pelo anestesiologista liberou para a cirurgia na primeira consulta em 178 oportunidades (84%). Na identificação dos casos de não liberação para cirurgia, o questionário apresentou valor preditivo negativo de 94,4%, valor preditivo positivo de 38,2%, sensibilidade de 76,5% e especificidade de 76,4%. Houve fatores clínicos estatisticamente significativos (P < 0,05) associados com não liberação para a cirurgia: idade acima de 65 anos, IMC > 30, baixa capacidade funcional, hipertensão arterial, diabetes mellitus, asma, insuficiência renal, hepatite e cardiopatia isquêmica. CONCLUSÕES: O uso do questionário foi efetivo para triagem de pacientes que necessitam de avaliação complementar e/ou alteração de regime terapêutico previamente ao procedimento eletivo. Além disso, o questionário acrescentou dados não contemplados pela avaliação clínica.

BACKGROUND AND OBJECTIVE: Prior to elective surgery it is essential to know in advance the patient’s clinical condition. The aim of this study was to compare the preoperative evaluation (POE) through questionnaire responses with preanesthetic evaluation by the anesthesiologist. METHOD: Prior to their preoperative evaluation, patients answered a questionnaire with information regarding age, weight, height, scheduled surgery, past medical and surgical history, allergies, medications and doses used, social history (illicit drugs, alcohol, smoking), functional capacity and exercise tolerance. Preoperative evaluation was performed by an anesthesiologist who had no access to the questionnaire data or knowledge about the research. The questionnaire data were compared with the preoperative evaluation by two independent investigators, in order to answer the questions: 1) Was the questionnaire evaluation effective - could the patient undergo surgery without the need for face-to-face consultation? 2) Has been there any relevant information - ability to change the anesthetic approach - not assessed by the questionnaire, but assessed by the face-to-face consultation? 3) Has been there any information added by the health questionnaire that was missed by face-to-face consultation? For statistical analysis, the paired Student’s t-test was used for parametric data and chi-square test for categorical data, with p < 0.05 considered significant. RESULTS: Of the 269 eligible patients there was one refusal, and four agreed to participate but did not complete the questionnaire, in addition to 52 losses, totaling 212 participants. Questionnaire data added to the consultation in 109 cases (51.4%). The screening questionnaire alone was effective for 144 patients (67.93%), with no need for consultation. The anesthesiologist evaluation referred patients for surgery on their first visit in 178 opportunities (84%). In the identification of cases of non-referral to surgery, the questionnaire showed a negative predictive value of 94.4%, positive predictive value of 38.2%, sensitivity of 76.5%, and specificity of 76.4%. Statistically significant (P < 0.05) clinical factors associated with non-referral to surgery were: age over 65 years, BMI > 30, low functional capacity, hypertension, diabetes mellitus, asthma, renal failure, hepatitis, and ischemic heart disease. CONCLUSION: The questionnaire was effective for screening patients who needed further evaluation and/or changes in treatment regimen prior to elective surgery. Moreover, the questionnaire added data not covered by clinical evaluation.

JUSTIFICATIVA Y OBJETIVOS: Antes de iniciar la cirugía electiva se hace indispensable conocer con anterioridad las condiciones clínicas del paciente. El objetivo de este estudio, fue comparar la evaluación preoperatoria (EPO) por medio de la realización de un cuestionario con la consulta realizada por el anestesiólogo. MÉTODO: Antes de la consulta preoperatoria, los pacientes respondieron a un cuestionario con informaciones sobre edad, peso, altura, cirugía planificada, historial médico y quirúrgico anterior, alergias, medicamentos y dosis usadas, historial social (drogas ilícitas, alcohol, tabaquismo), capacidad funcional y tolerancia al ejercicio. La consulta preoperatoria fue realizada por un anestesiólogo que no tenía acceso a los datos del cuestionario ni sabía nada sobre la investigación. Los datos obtenidos por medio del cuestionario se compararon con la consulta preoperatoria por dos investigadores independientes, con la finalidad de responder a las preguntas: 1) ¿La evaluación por el cuestionario fue suficiente y el paciente podría haber sido derivado a la cirugía sin necesidad de la evaluación presencial? 2) ¿Hubo alguna información relevante capaz de cambiar la conducta anestésica que el cuestionario no comprobó, pero que fue tenido en cuenta por la consulta presencial? 3) ¿Hubo alguna información añadida por el cuestionario de salud que la consulta presencial no obtuvo? Para el análisis estadístico se usó el test t de Student pareado para los datos paramétricos, y el test X² para los datos categóricos con P < 0,05. RESULTADOS: De los 269 pacientes elegidos, se produjo una negativa, cuatro aceptaron participar pero no rellenaron el cuestionario, y hubo 52 pérdidas, totalizando 212 participantes. El cuestionario añadió datos a la consulta en 109 casos (51,4%). La selección hecha por el cuestionario fue suficiente y no necesitó consulta presencial en 144 pacientes (67,93%). La evaluación realizada por el anestesiólogo autorizó ya para operación en la primera consulta en 178 oportunidades (84%). En la identificación de los casos de no autorización para la cirugía, el cuestionario tuvo un valor predictivo negativo de un 94,4%, valor predictivo positivo de un 38,2%, sensibilidad del 76,5% y una especificidad de un 76,4%. Hubo factores clínicos estadísticamente significativos (P < 0,05), asociados con la no autorización para la cirugía: edad por encima de los 65 años, IMC > 30, baja capacidad funcional, hipertensión arterial, diabetes mellitus, asma, insuficiencia renal, hepatitis y cardiopatía isquémica. CONCLUSIONES: El uso del cuestionario fue efectivo para la selección de pacientes que necesitan una evaluación complementaria y/o alteración de régimen terapéutico anteriormente al procedimiento electivo. Además, el cuestionario añadió datos no contemplados por la evaluación tradicional.

Thermostable saccharogenic amylase produced under submerged fermentation by filamentous fungus Penicillium purpurogenum

The effect of several nutritional and environmental parameters on Penicillium purpurogenum growth and sacharogenic amylase production was analyzed. High enzyme levels (68.2 U mg-1) were obtained with Khanna medium at initial pH 6.0, incubated at 30ºC for 144 hours. The optimum pH and temperature activities were 5.0 and 65ºC, respectively. The enzyme presented a half-life (t50) of 60 min, at 65ºC. Only glucose was detected after 24 hours of reaction using soluble starch as substrate.

Parâmetros operacionais na secagem intermitente de grãos de aveia branca cultivar UPFA 20 Teixeirinha / Operational parameters in intermittent drying of white oat grains UPFA 20 Teixeirinha cultivar

Objetivou-se, no trabalho, avaliar o desempenho energético no processo de secagem intermitente de grãos de aveia branca, realizado em diferentes temperaturas do ar e umidade final. Grãos de aveia branca (Avena sativa L.) da cultivar UPFA 20 Teixeirinha, produzidos no Campo Experimental da Palma da UFPel, safra agrícola de 2003/2004 foram submetidos à secagem intermitente, em três temperaturas (60, 85, 110 ºC) na relação de intermitência de 1:6 até a umidade final de 11, 13 e 15 por cento, em delineamento experimental inteiramente casualizado. A secagem foi realizada em secador piloto, de câmara cilíndrica e fundo cônico centrado. A taxa de secagem foi calculada pela variação horária do grau de umidade da massa de grãos e a eficiência energética pela relação entre a energia consumida para o aquecimento do ar e a variação do grau de umidade da massa de grãos. A temperatura do ar de secagem e as umidades inicial e final dos grãos são fatores determinantes para estimar o consumo energético e a taxa de secagem de grãos de aveia branca a qual aumenta com a elevação da temperatura do ar de entrada no secador intermitente. A temperatura do ar na entrada do secador, umidade final e inicial dos grãos são fatores que influenciam no tempo de secagem intermitente de aveia branca.

The aim of this study was to evaluate the energetic performance in the process of intermittent drying of white oat grains at three different air temperatures and final moisture. White oat grains (Avena sativa L.), UPFA 20 Teixeirinha cultivar produced at Palma Experimental Station of the Federal University of Pelotas, 2003/2004 crop, were submitted to intermittent drying at three temperatures (60, 85, 110 ºC) at 1:6 rate of intermittence up to final moisture of 11, 13 and 15 percent, in totally randomized experimental delineation. Drying was performed in a pilot dryer, with cylindrical chamber and centered conic bottom. The drying rate was calculated by the time variation of the mass of grains' rate of moisture, and energetic efficiency by the ratio between the amount of energy used to heat the air and the variation of the mass of the grain rate of moisture. Drying air temperature, as well as initial and final moisture, are key factors to measure the energy consumption and the drying rate of white oat grains. The drying rate increases following the increase of temperature of air at the entrance of the intermittent dryer. The air temperature at the dryer entrance, final grain moisture and initial moisture are the variables that affect the time of intermittent drying of white oat.