O desafio para compreender a morfologia cerebral: da visualização à quantificação / Challenges in understanding brain morphology: from visualization to quantification

O objetivo deste trabalho é estudar a morfologia neuronal a partir de modelos animais, fornecer informações biológicas difíceis de serem obtidas em humanos, permitindo estudar condições neuropsiquiátricas como doença de Alzheimer, ansiedade, dentre outras. O presente trabalho descreveu metodologia de estudo para cérebro de roedores, duas técnicas neuroanatômicas, Klüver-Barrera e Golgi-Cox, e seus respectivos processos de quantificação. A técnica de Klüver-Barrera permitiu visualização da substância branca e cinzenta com destaque na bainha de mielina. A técnica de Golgi-Cox, adaptada para realidade de nosso laboratório, mostrou-se eficiente para visualização de neurônios e seus prolongamentos, como dendritos e espinhas dendríticas, permitindo assim a quantificação. A partir de imagens obtidas de microscópio descreveu-se os diferentes passos para quantificação, a determinação de volume de estruturas internas cerebrais (corpo caloso e camada celular do hipocampo) assim como a quantificação das espinhas dendríticas em neurônios piramidais. Os métodos descritos e detalhados poderão ser utilizados em vários campos da neurociência

Neuronal morphology is analyzed in animal models to provide biological information difficult to obtain in humans. The above makes possible the study of neuro-psychiatric, such as Alzheimer´s disease, anxiety and others. Current study described methodology for rodents´ brains, two neuro-anatomic techniques, Klüver-Barrera and Golgi-Cox, and their respective quantification processes. Klüver-Barrera technique visualized the white and gray matter, particularly the myelin sheath. Golgi-Cox technique, adapted for current research, was efficient to visualize neurons and their prolongations, such as dendrites and dendritic spines, with quantification. Images by microscope described the different steps for the quantification, determination of volume of the brain´s internal structures (callous body and the hypocampus´s cell layer) coupled to the quantification of dendritic spines in pyramid neurons. Described and detailed methods will be useful in several fields of neuroscience

Histological evaluation of the rat dental pulp after indirect capping with sildenafil or L-NAME incorporated into a bioadhesive thermoresponsive system / Avaliação histológica da polpa dental do rato após capeamento pulpar indireto usando sildenafil ou L-NAME incorporados a um sistema bioadesivo termorresponsivo

We evaluated the histological dental pulp state in vivo after indirect pulp capping using sildenafil or LG-nitro-L-arginine (L-NAME), incorporated into a new bioadhesive thermoresponsive system (BTS). Male Wistar rats were subjected to an upper and lower first molar class I cavity preparation followed by indirect pulp capping with sildenafil or L-NAME. Calcium hydroxide (CaOH2) was used as a control. The teeth and surrounding bone were properly dissected and processed for Nissl's staining. Pulp state was evaluated considering the morphological aspects of the inflammatory response, type of inflammatory infiltrate, organization of the odontoblast layer, blood vessel condition, and presence of abscesses or necrosis. The results were expressed as average of observations. The most intense inflammatory response was observed 3 days after the cavity preparation. No identified changes were detected in the dental pulp response of the molars treated with L-NAME compared with those treated with CaOH2. A dual effect was observed in the teeth treated with sildenafil. While low sildenafil concentration (0.015% w w-1) promoted effects comparable to CaOH2, at a higher concentration (0.15% w w-1), sildenafil caused a severe inflammatory response and pulp necrosis. This pioneering suggest that NO pathway activity may be a determinant in the process of dental pulp healing.

Avaliou-se o estado histológico da polpa dental in vivo após capeamento pulpar indireto usando sildenafil ou LG-nitro-L-arginine (L-NAME), incorporados num novo sistema bioadesivo termorresponsivo (BTS). Ratos Wistar machos foram sujeitos ao preparo cavitário, classe I nos primeiros molares superiores e inferiores, seguido de capeamento pulpar indireto com sildenafil ou L-NAME incorporados em BTS. Hidróxido de cálcio (CaOH2) foi usado como controle positivo. Os dentes e tecidos adjacentes foram adequadamente dissecados e processados para a coloração de Nissl. O estado da polpa foi avaliado quanto aos aspectos morfológicos e tipo do infiltrado inflamatório, organização da camada de odontoblastos, condições dos vasos sanguíneos e presença de abcesso ou necrose. A reposta inflamatória mais intensa foi observada três dias após o preparo cavitário. Nenhuma alteração foi detectada na polpa dental dos molares tratados com L-NAME comparados com aqueles tratados com CaOH2. Um efeito dual foi observado nos dentes tratados com sildenafil. Enquanto baixas concentrações de sildenafil (0.015% v v-1) promoveram efeitos comparáveis com o CaOH2, altas concentrações (0.15% v v-1) causaram uma severa resposta inflamatória e necrose pulpar. Este estudo pioneiro sugere que a atividade da via do NO pode ser determinante no processo de cicatrização.

Sedative and anxiolytic effects of methanolic extract from the leaves of Passiflora actinia

Leaves from several Passiflora species are largely employed in the Brazilian folk medicine as anxiolytic and sedative. In this work the anxiolytic, sedative-like properties and liquid chromatography analysis of methanolic extract of Passiflora actinia were evaluated. The methanol extract and all of its fractions presented significant sedative-like effect in elevated plus-maze and open field tests. Only the aqueous fraction of the methanol extract showed selective anxiolytic activity (30 mg/kg). Chromatographic analysis of the active fractions showed the presence of isovitexin and absence of the classical Passiflora beta-carboline alkaloids or flavonoids such as vitexin, rutin, swertisin, hesperidin and orientin. The tincture obtained from P. actinia leaves presented 0.27 mg/ml of isovitexin and absence of vitexin.

Folhas de diversas espécies de Passiflora são amplamente empregadas na medicina popular brasileira como ansiolítica e sedativa. Neste trabalho, as propriedades ansiolíticas e sedativas e análise por cromatografia líquida dos extratos metanólicos de Passiflora actinia foram avaliados. O extrato metanólico e todas as suas frações apresentaram efeitos sedativos significativos nos testes de labirinto em cruz elevada e campo aberto. Somente a fração aquosa do extrato metanólico mostrou seletiva atividade sedativa (30 mg/kg). Análise cromatográfica das frações ativas mostraram a presença de isovitexina e ausência dos alcalóides beta-carbolínicos clássicos de Passiflora ou flavonóides como vitexina, rutina, swertisina, hesperidina e orientina. A tintura obtida de P. actinia (folhas) apresentou 0,27 mg/ml de isovitexina e ausência de vitexina.