ABSTRACT
SUMMARY The genus Brucella is a globally distributed intracellular pathogen that affects animals and humans and presents low genetic variability, which is a challenge for its phylogenetic reconstruction. Genus differentiation originally occurred due to its preference for a certain host and analyses throughout the years to classify the genus Brucella and its strains, depended on the techniques used, the number of strains or the methods of phylogenetic reconstruction. Its history goes from recognizing the entire genus as unique B. mellitensis species with multiple varieties, to recognizing more than ten species. This review shows the journey through the techniques that have been used to differentiate the genus Brucella, which, although they have generated clarity in the grouping of some species, still leaves doubts in related to the oldest species, their divergence and the type of grouping of the new species discovered. The application of new technologies such as phylogenomics is contributing to solve these questions.
RESUMEN Las especies del género Brucella son patógenos de distribución mundial que afecta, tanto a los animales como al hombre, los cuales, presentan baja variabilidad genética, convirtiéndolo en un reto para su reconstrucción filogenética y diferenciación. La diferenciación originalmente se dio, debido a su preferencia por cierto hospedero. A través de los años, se han realizado diferentes análisis para clasificar el género Brucella y las variaciones que presenta, que dependen de las técnicas empleadas para su clasificación, las especies, el número de cepas o los métodos de reconstrucción filogenética. La historia pasa desde reconocer a todo el género como una única especie B. mellitensis con múltiples variedades, a reconocer más de diez especies. En esta revisión, se hace una travesía, a través de las diferentes técnicas que se han utilizado en el tiempo, para clasificar el género Brucella que, aunque han generado claridad en el agrupamiento de algunas especies, aun dejan dudas en relación a las especies más antiguas, su divergencia y el tipo de agrupación de las nuevas especies descubiertas. La aplicación de nuevas tecnologías, como la filogenómica, está contribuyendo a resolver estos interrogantes.
ABSTRACT
Background: recently, isolates of Brucella canis (B. canis ) were classified into two groups, Group 1 and Group 2, based on a 794 bp deletion in the polysaccharide deacetylase gene in Group 1, or absence of this deletion in Group 2. In Colombia, B. canis was first isolated from sick or clinically healthy seropositive dogs in 2005. Objective: to determine Brucella canis genotype in isolates from Medellín Metropolitan Area. Methods: 49 isolates from a study involving 193 dogs in 10 kennels were analyzed by Polymerase Chain Reaction (PCR) using three primer pairs of eight previously reported. Results: all isolates were positive for 152, 272, and 794 bp fragments, indicating that they belong to Group 2. Conclusion: this article presents strong evidence based on the new molecular marker used to classify B. canis isolates from Medellín (Colombia) into Group 2. This is a pioneer molecular study on the presence of B. canis in Colombia and it would be interesting to apply this method to characterize the infection epidemiology and explore its domestic clinical dynamics.
Antecedentes: recientemente, las cepas de Brucella canis (B. canis ) fueron clasificadas dentro de dos grupos, Grupo 1 y Grupo 2, de acuerdo a la presencia o ausencia de una deleción de 794 bp en el gen de la polisacárido deacetilasa, respectivamente. En Colombia Brucella canis se aisló por primera vez en 2005 de perros seropositivos, enfermos o clínicamente sanos. Objetivo: determinar el genotipo de aislamientos de Brucella canis provenientes del Area Metropolitana de Medellín. Método: 49 aislamientos de un estudio con 193 perros en 10 criaderos fueron sometidos a tres Reacciones en Cadena de la Polimerasa (PCR) simple, empleando 3 pares de cebadores de 8 previamente reportados. Resultados: todos los aislamientos amplificaron los fragmentos de 152, 272 y 794 bp, indicando que pertenecen al Grupo 2. Conclusiones: este artículo presenta evidencia sólida para clasificar las cepas de Brucella canis aisladas en Medellín (Colombia) en el Grupo 2, basado en el uso del nuevo marcador molecular. Este es un estudio molecular pionero de B. canis en Colombia y sería interesante aplicar este método para caracterizar la dinámica epidemiológica y clínica de la infección en el país.
Antecedentes: atualmente, as cepas de Brucella canis foram classificadas em dois grupos, chamados de grupo 1 e 2, de acordo com a presença de uma deleção de 794 pb em seu genoma. No ano 2005, isolaram-se a Brucella canis pela primeira vez na Colômbia, obtida de cães doentes e soropositivos. Neste artigo descrevem-se a classificação de cepas de B. canis isolados em Medellín (Colômbia), de acordo com a nova norma. Objetivo: determinar o genotipo de isolamentos de Brucella canis a partir de amostras da Área Metropolitana de Medellín. Métodos: neste estudo utilizaram-se 49 isolamentos obtidos de 193 cães de 10 criadouros diferentes, os quais foram submetidos para três analises de Reação em Cadeia da Polimerase PCR simples com a utilização de três pares primers dos anteriormente informados. Resultados: todos os isolamentos analisados amplificaram fragmentos de 152, 272 e 749 pb, comprovando que pertencem ao grupo 2. Conclusões: este artigo apresenta evidencia solida para clasificar as cepas de Brucella canis isoladas em Medellín (Colombia) no grupo 2, baseados no uso do novo marcador molecular. Seria de grande importância que os estudos de epidemiologia molecular ampliarem-se para outras áreas de pesquisa na Colômbia, com a finalidade de seguir os patrões das infecções e fazer as correlações clinicas.