ABSTRACT
La fusión de protoplastos ha facilitado la obtención de nuevas cepas de levaduras con propiedades biotecnológicas muy interesantes. El principal objetivo de esta investigación fue obtener una levadura híbrida intergénica con potencialidades enológicas características de dos géneros diferentes. Para ello se fusionaron protoplastos de Saccharomyces cerevisiae autóctona de la región zuliana con Hanseniaspora guillermondii CECT 11102 de origen comercial. Saccharomyces es una levadura que produce altas concentraciones de etanol pero el perfil aromático es sencillo y común. Hanseniaspora no resiste las concentraciones de etanol, pero puede generar aromas agradables e intensos. La identificación de las levaduras antes y después de la fusión de protoplastos se realizó con la técnica PCR-RFLP del gen 5.8S rADN y las regiones intergénicas adyacentes ITS1 e ITS2 del ADN extraído, sometiendo los productos amplificados a un análisis de restricción con las enzimas HinfI, HaeIII, CfoI y DdeI. El polietilenglicol fue usado para inducir la fusión de protoplastos. La cepa híbrida presentó características de ambas levaduras parentales debido a que resistió altas concentraciones de etanol como S. cerevisiae y fue capaz de metabolizar el salicín como H. guillermondii. El análisis molecular PCR-RFLP de la levadura híbrida mostró un patrón de bandas diferente al de las levaduras parentales.
Protoplast fusion has facilitated the development of new yeast strains with very interesting biotechnological properties. The main objective of this research was to obtain hybrid yeast with potentialities of two different genera, that could be used in the wine manufacture. Saccharomyces cerevisiae protoplasts from the Zulian region were fused with Hanseniaspora guillermondii CECT 11102 of commercial origin. Saccharomyces is a yeast that produces high levels of ethanol but the aromatic profile is simple and common. Hanseniaspora does not withstand ethanol concentrations, but it can generate pleasant and intense aromas. Identification of yeast before and after the fusion of protoplasts was performed using the PCR-RFLP technique of the 5.8S rDNA gene and the adjacent ITS1 and ITS2 intergenic regions of the extracted DNA, subjecting the amplified products to a restriction with the enzymes HinfI, HaeIII, CfoI and DdeI. Polyethylene glycol was used to induce fusion of protoplasts. The hybrid strain showed characteristics of both parental yeasts because it resisted high concentrations of ethanol as S. cerevisiae and was able to metabolize the salicin as H. guillermondii. PCR-RFLP molecular analysis of hybrid yeast showed a different band pattern than those pertaining to parental yeasts.
ABSTRACT
Propósito: Buscar diferencias cinéticas y dinámicas cardiopulmonares (CPs) entre atletas de resistencia (RES = 10) y no atletas (NON = 19) mexicanos. Método: Del volumen espirado (V. e), medido por espirometría de circuito abierto, se calculó V. O2 y V. CO2 durante una prueba en cicloergómetro mientras cada voluntario pedaleaba sentado al inicio 50 Wú 2min-1 seguido de incrementos de 25 Wú 2min-1 hasta lograr un V. O2máx . El curso temporal (min) transitorio de la respuesta (V. O2 , V. CO2 , V. e, frecuencia cardiaca, FC; y pulso de O2 , PulO2 ) al ejercicio se transformó a segundos y se modeló por computadora mediante regresión lineal, por el método iterativo de los mínimos cuadrados, en el que el tiempo de respuesta media (TRM) se usó de indicador cinético global CP. Resultados: Los TRMs transitorios de V. O2 , V. CO2 y V. e fueron lentos en RES comparado con NON. La dinámica CP transitoria en el grupo NON fue: TRM_V.O2 < (TRM_PulO2 , TRM_FC) < TRM_V. CO2 < TRM_V.e; los RES desplazaron hacia la derecha su TRM_PulO2 y TRM_FC ((TRM_V.O2 ,TRM_V.CO2) < (TRM_PulO2, TRM_FC) < TRM_V. e). La correlación entre la velocidad promedio del mejor desempeño fisicodeportivo con TRM_V. O2 , TRM_V. CO2 y TRM_PulO2 (CIG = cinética del intercambio gaseoso), mostró RES_rápidos de CIG_lenta y RES_lentos de CIG_rápida. Conclusión: La cinética CP transitoria fue lenta en RES comparado con NON. Es posible distinguir diferencias cinéticas cardiopulmonares entre atletas de resistencia con desempeño fisicodeportivo competitivo diferente.