Molecular characterization of Bacillus thuringiensis strains to control Spodoptera eridania (Cramer) (Lepidoptera: Noctuidae) population

Abstract The main objective of this study was to characterize the toxicity and genetic divergence of 18 Bacillus thuringiensis strains in the biological control of Spodoptera eridania. Bacterial suspensions were added to the S. eridania diet. Half of the selected B. thuringiensis strains caused high mortality seven days after infection. The genetic divergence of B. thuringiensis strains was assessed based on Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus (ERIC) and Repetitive Extragenic Palindromic (REP) sequences, and five phylogenetic groups were formed. Despite their genetic diversity B. thuringiensis strains did not show any correlation between the collection sites and toxicity to larvae. Some B. thuringiensis strains are highly toxic to S. eridania, thus highlighting the potential of their endotoxins as biopesticides.

Evaluating the "satisfaction" and "self-confidence" in nursing students in undergoing simulated clinical experiences / Evaluación de la "satisfacción" y "autoconfianza" en los estudiantes de enfermería que vivieron experiencias clínicas simuladas / Avaliação da "satisfação" e "autoconfiança" em estudantes de enfermagem que vivenciaram experiências clínicas simuladas

Abstract Objective: To evaluate the "satisfaction" and "self-confidence" constructs in nursing students who underwent simulated clinical experiences in semiology and semiotechnique disciplines. Method: A descriptive study developed with Nursing students from a federal public university in the interior of Minas Gerais through weekly simulated workshops. The "satisfaction" and "self-confidence" constructs were evaluated by the "Student Satisfaction and Self-Confidence with Learning Scale" and "Simulated Clinical Experiences Satisfaction Scale". Results: The final sample was 45 students. Most were more satisfied (overall average = 4.18) than self-confident (overall average = 4.12). The Spearman correlation test identified a significant and positive association between the "satisfaction" and "self-confidence" constructs. Conclusion: Students feel self-confident and satisfied with the use of simulation as an active teaching-learning methodology, highlighting that the higher the satisfaction level, the greater the student's self-confidence.

Resumen Objetivo: Evaluar los constructos de "satisfacción" y "autoconfianza" en los estudiantes de enfermería que vivieron experiencias clínicas simuladas en la enseñanza de la semiología y semiotécnica. Método: Se realizó un estudio descriptivo, desarrollado con los estudiantes del curso de enfermería de una universidad pública en el interior de Minas Gerais, a través de talleres simulados sobre una base semanal. Los constructos de "satisfacción" y "autoconfianza" fueron evaluados por la "Escala Satisfacción de los Estudiantes y Autoconfianza con el Aprendizaje" y "Escala de Satisfacción con las Experiencias Clínicas Simuladas". Resultados: La muestra final estuvo compuesta por 45 estudiantes. La mayoría se presentó más satisfecha (media = 4.18) que autoconfiada (media = 4.12). Se identificó, a través de la prueba de correlación de Spearman una asociación significativa y positiva entre los constructos de "satisfacción" y "autoconfianza". Conclusión: Los estudiantes se sientan seguros y satisfechos con el uso de la simulación como una metodología activa del proceso de enseñanza-aprendizaje, destacando que el mayor nivel de satisfacción aumentó la confianza de los estudiantes.

Resumo Objetivo: Avaliar os constructos "satisfação" e "autoconfiança" em estudantes de Enfermagem que vivenciaram experiências clínicas simuladas no ensino de semiologia e semiotécnica. Método: Estudo descritivo, desenvolvido com estudantes do curso de Enfermagem de uma universidade pública federal do interior de Minas Gerais, através de oficinas simuladas semanalmente. Os constructos "satisfação" e "autoconfiança" foram avaliados pela "Escala de Satisfação de Estudantes e Autoconfiança com a Aprendizagem" e "Escala de Satisfação com as Experiências Clínicas Simuladas". Resultados: A amostra final foi de 45 estudantes. A maioria apresentou mais satisfeito (média geral = 4,18) do que autoconfiante (média geral = 4,12). Identificou-se pelo teste de correlação de Spearman uma associação significativa e positiva entre os constructos "satisfação" e "autoconfiança". Conclusão: Os estudantes se sentem autoconfiantes e satisfeitos com o uso da simulação como metodologia ativa de ensino-aprendizagem, destacando-se que quanto maior o nível de satisfação, maior a autoconfiança do aluno.

Vivência do homem diante do adoecimento pelo câncer: implicações para o cuidado em saúde / La experiencia del hombre frente a la enfermedad por cáncer: implicaciones para la atención en salud / Man's experience facing cancer illness: implications for health care

Objetivo: compreender como o homem vivencia o processo de adoecimento do câncer, desde o diagnóstico até o tratamento. Método: estudo descritivo, exploratório e qualitativo, realizado com dez homens em tratamento oncológico, em um município do interior de Minas Gerais, entre março e maio de 2017. Os dados foram coletados a partir de entrevistas gravadas, posteriormente transcritos na íntegra e submetidos a análise temática do conteúdo. Resultados: emergiram duas categorias: ''A descoberta do diagnóstico, o tratamento e as mudanças no cotidiano: enfrentamentos e ressignificações'' e ''O cuidado oferecido pela equipe de saúde''. Conclusão: a vivência de uma doença oncológica é permeada por negação, raiva, angústia, tristeza e temor. O homem se depara com possibilidade de morte, ameaça ao seu futuro e dificuldades para se adaptar à nova vida. A família, amigos e os profissionais de saúde são importantes para o controle e o enfrentamento da doença.

Objective: to understand how men experience the process of becoming ill with cancer, from diagnosis to treatment. Method: a descriptive, exploratory and qualitative study, conducted with ten men undergoing cancer treatment, in a municipality in the interior of Minas Gerais, between March and May 2017. Data were collected from recorded interviews, later transcribed in full and submitted to thematic analysis of the content. Results: two categories emerged: "The discovery of diagnosis, the treatment and the changes in daily life: coping and resignification'' and; ''The care offered by the health team''. Conclusion: the experience of an oncological disease is permeated by denial, anger, anguish, sadness and fear. The man faces the possibility of death, threat to his future and has difficulty adapting to his new life. Family, friends and health professionals are important for the control and coping with the disease.

Objetivo: comprender cómo los hombres experimentan el proceso de la enfermedad del cáncer, desde el diagnóstico hasta el tratamiento. Método: estudio descriptivo, exploratorio y cualitativo, realizado con diez hombres sometidos a tratamiento, en un municipio del interior de Minas Gerais, entre marzo y mayo de 2017. Los datos fueron recolectados a partir de entrevistas grabadas, transcritas en su totalidad y sometidas al Análisis Temático de Contenido. Resultados: emergieron dos categorías: "El descubrimiento del diagnóstico, el tratamiento y los cambios en la vida cotidiana: afrontamiento y nuevas significaciones" y; "La atención ofrecida por el equipo de salud". Conclusión: la experiencia de una enfermedad oncológica está impregnada de negación, ira, angustia, tristeza y miedo. El hombre enfrenta la posibilidad de la muerte, amenaza a su futuro y tiene dificultades para adaptarse a su nueva vida. Familia, amigos y profesionales de salud son importantes para controlar y hacer frente a la enfermedad.

Da decisão à vivência da cesariana: a perspectiva da mulher / From decision to cesarian: the woman perspective / De la decisión a la vivencia de la cesárea: la perspectiva de la mujer

OBJETIVO: descrever o processo de decisão da mulher primípara pela via de nascimento, compreendendo a vivência da cesariana pela mesma. MÉTODO: trata-se de uma pesquisa do tipo descritiva, com abordagem qualitativa. As participantes foram dez puérperas primíparas que vivenciaram a cesariana. Na coleta de dados, utilizou-se a técnica de entrevista aberta com posterior análise temática, aplicando a técnica Laurence Bardin. RESULTADOS: Foram levantadas duas categorias: A decisão pela via de nascimento e o momento da cesariana. Na primeira, foi possível perceber que a maioria das mulheres já chega ao consultório decidida sobre a via de nascimento, no entanto, nem todas conseguiram prosseguir com a escolha inicial. Na segunda, retrata-se como foi vivenciar a cesariana, estando a mulher amparada pelos entes queridos e apoiada pelos profissionais de saúde. CONCLUSÃO: Ressalta-se a importância de a equipe de saúde atuar efetivamente no compartilhamento de informações e na construção do vínculo, desde o pré-natal até o puerpério, em que a mulher exerce o real protagonismo do parto

OBJECTIVE: to describe the primiparous woman's decision process for the birth way, understanding the cesarean experience by the same woman. METHOD: This is a descriptive research with a qualitative approach. The participants were ten primiparous women who underwent cesarean section. In the data collection, the technique of open interview with thematic analysis, applying the Laurence Bardin's technique. RESULTS: There were two categories: the decision by birth and the time of cesarean section. In the first decision, it was possible to notice that most of the women already arrive at the office decided about the birth way, however, not all of them were able to proceed with the initial choice. The second one portrays how it was to experience the cesarean section, the woman supported by their loved ones and supported by health professionals. CONCLUSION: It is important to emphasize the importance of the health team to act effectively in information sharing and in the bond building, from the prenatal to the puerperium, in which the woman performs the real role of childbirth

OBJETIVO: describir el proceso de decisión de la mujer primípara por la vía de nacimiento y comprender la vivencia de la cesárea por la misma. MÉTODO: se trata de una investigación del tipo descriptivo, con abordaje cualitativo. Las participantes fueron diez mujeres que hubieran dado a luz primíparas que experimentaron la cesárea. En la recolección de datos, se utilizó la técnica de entrevista abierta con posterior análisis temático utilizando la técnica Laurence Bardin. RESULTADOS: Se levantaron dos categorías: La decisión por la vía de nacimiento y el momento de la cesárea. En la primera, fue posible percibir que la mayoría de las mujeres ya llega al consultorio decidida sobre la vía de nacimiento, sin embargo, no todas han logrado proseguir con la elección inicial. La segunda retrata cómo fue vivir la cesárea, estando la mujer amparada por los seres queridos y apoyados por los profesionales de la salud. CONCLUSIÓN: Se resalta la importancia del equipo de salud actuar efectivamente en el intercambio de informaciones y en la construcción del vínculo, desde el prenatal hasta el puerperio, en que la mujer ejerce el real protagonismo del parto

O uso da simulação no ensino da técnica de aspiração de vias aéreas: ensaio clínico randomizado controlado / Use of simulations in the teaching of the airway aspiration technique: controlled randomized clinical trial / El uso de la simulación en la enseñanza de la técnica de aspiración de vias aéreas: ensayo clínico randomizado

Estudo com o objetivo de avaliar o efeito do uso da simulação no ensino da habilidade de aspiração de vias aéreas inferiores. Trata-se de ensaio clínico controlado randomizado realizado em uma universidade pública federal em outubro de 2016. Amostra de 33 estudantes alocados mediante sorteio aleatório nos grupos intervenção (n=17) e controle (n=16). A intervenção avaliada foi o ensino da técnica de aspiração de vias aéreas inferiores utilizando a simulação (oficinas individuais e debriefing), e o controle foi o ensino da técnica pelo método tradicional (aula expositiva e treinamento em grupo). Os desfechos avaliados foram o conhecimento teórico e prático sobre a habilidade ensinada, cujas pontuações máximas eram, respectivamente, 19 e 29 pontos. Os dados foram analisados utilizando-se estatística descritiva e inferencial. No conhecimento teórico, a média de acertos do grupo intervenção foi de 15,1 pontos e no grupo-controle foi de 15,5 pontos. Na avaliação prática, a pontuação média no grupo intervenção foi de 22,9 pontos e no grupo-controle foi de 20,8 pontos. Não houve diferença na média de acertos no conhecimento teórico e prático sobre a habilidade ensinada entre os grupos intervenção e controle. Entretanto, alunos que participaram das atividades simuladas relataram mais confiança e segurança no desenvolvimento da técnica em laboratório. Sugere-se a replicação do estudo com amostra maior para comparação dos achados. Registro Brasileiro de Ensaios Clínicos: RBR-8bsmyz.

This study aimed to evaluate the effect of the use of simulations to teach lower airway aspiration. This is a randomized controlled clinical trial conducted at a federal public university in October 2016. The sample was composed of 33 students randomly assigned to intervention (n = 17) and control (n = 16) groups. The intervention evaluated the teaching of the lower airway aspiration technique using simulations (individual workshops and debriefing), and the control situation was represented by the teaching of the technique through the traditional method (expository class and group training). The outcomes evaluated were the theoretical and practical knowledge about the skill taught, whose maximum scores were, respectively, 19 and 29 points. Data were analyzed using descriptive and inferential statistics. In the theoretical knowledge, the average number of correct answers in the intervention group was 15.1 points and in the control group it was 15.5 points. In the practical evaluation, the mean score in the intervention group was 22.9 points and in the control group it was 20.8 points. There was no difference in the average of correct theoretical and practical knowledge about the ability taught between the intervention and control groups. However, students who participated in the simulated activities reported more confidence and reliability in the development of the technique in laboratory. We suggest the replication of the study with a larger sample for comparison of the findings. Brazilian Registry of Clinical Trials: RBR-8bsmyz.

Morpho and Cytological Differentiation of Calli of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla During Somatic Embryogenesis

ABSTRACT The aim of this study was to induce and analyze embryogenic calli from two types of explants (leaves and meristems) of the hybrid Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. Leaves and meristems of plants kept in a nursery were disinfected and inoculated in Petri dishes containing MS culture medium supplemented with different concentrations of the growth regulator dicamba (1.13, 4.52, and 9.04 µM) and without it. At 60 days of culturing, the calli were analyzed by scanning electron microscopy and at 90 days were evaluated by light microscopy in regard to the embryogenic characteristics of the cells. Different type of calli were induced in leaf explants, designated as Type I with light yellow coloring, Type II with dark yellow coloring, and Type III of brown coloring; however, only Type I had embryogenic characteristics. In the meristematic explants, only one type of callus was induced, and it had embryogenic characteristics. At 90 days of culturing, the formation of somatic embryos in the different embryogenic stages was observed and the formation of procambium, protoderm, and ground meristem tissues. At 150 days of culturing, the concentration of 1.13 µM of dicamba was prominent in the formation of somatic embryos in the different embryogenic stages.

Molecular epidemiology of Streptococcus agalactiae isolated from mastitis in Brazilian dairy herds

Abstract Streptococcus agalactiae is one of the most common pathogens leading to mastitis in dairy herds worldwide; consequently, the pathogen causes major economic losses for affected farmers. In this study, multilocus sequence typing (MLST), genotypic capsular typing by multiplex polymerase chain reaction (PCR), and virulence gene detection were performed to address the molecular epidemiology of 59 bovine (mastitis) S. agalactiae isolates from 36 dairy farms located in the largest milk-producing mesoregions in Brazil (Minas Gerais, São Paulo, Paraná, and Pernambuco). We screened for the virulence genes bac, bca, bibA, cfb, hylB, fbsA, fbsB, PI-1, PI-2a, and PI-2b, which are associated with adhesion, invasion, tissue damage, and/or immune evasion. Furthermore, five capsular types were identified (Ia, Ib, II, III, and IV), and a few isolates were classified as non-typeable (NT). MLST revealed the following eight sequence types (STs): ST-61, ST-67, ST-103, ST-146, ST-226, ST-314, and ST-570, which were clustered in five clonal complexes (CC64, CC67, CC103, CC17, and CC314), and one singleton, ST-91. Among the virulence genes screened in this study, PI-2b, fbsB, cfb, and hylB appear to be the most important during mastitis development in cattle. Collectively, these results establish the molecular epidemiology of S. agalactiae isolated from cows in Brazilian herds. We believe that the data presented here provide a foundation for future research aimed at developing and implementing new preventative and treatment options for mastitis caused by S. agalactiae.

Morphological characteristics and cell viability of coffee plants calli / Características morfológicas e viabilidade celular de calos de cafeeiro

The aim of this research was to characterize and compare two types of calli from leaf explants of Coffea arabica (cultivar Catiguá). Cells of different types of callus were successfully characterized regarding viability and internal and external morphological characteristics. It was obtained two morphologically distinct types of callus: (i) yellow friable and (ii) transparent watery. The yellow friable calli showed higher cell viability and embryogenic characteristics. Scanning and transmission electron microscopy showed embryogenic characteristics in cells of the yellow friable calli evidenced by the presence of small and isodiametric cells, while transparent watery calli showed elongated cells and large cytoplasm vacuolization.

O objetivo deste trabalho foi caracterizar e comparar dois tipos de calos de explantes foliares de Coffea arabica (cultivar Catiguá). Células de diferentes tipos de calos foram caracterizadas quanto a viabilidade e características morfológicas externas e internas. Foram obtidos dois tipos de calos morfologicamente distintos: (a) amarelo friável e (b) transparente aquoso. Os calos amarelos friáveis apresentaram maior viabilidade celular e características embriogênicas. Microscopia eletrônica de varredura e transmissão mostraram características embriogênicas em calos amarelos friáveis evidenciadas pela presença de células pequenas e isodiamétricas. Os calos transparentes aquosos apresentaram células alongadas e vacuolizadas.

Growth curve and development of the internal calli structure of Eucalyptus camaldulensis Dehn

The objective of this work was to elucidate the growth curve of Eucalyptus camaldulensis Dehn. calli analyzing their anatomical modifications. A sigmoid aspect of the growth curve of the calli fresh matter was observed, with five different phases (lag, exponential, linear, deceleration and decline). In the lag phase, the highest growth percentage 87%, was observed, which reduced during the evaluation period to 17% in the linear phase. As for the anatomical analyses, cellular multiplications was observed during the lag and exponential phases and increase in cell size during the linear phase, promoting the calli volume growth and the establishment of the globular conformation.

Teste de alelismo entre os mutantes de amadurecimento alcobaça e non-ripening em tomateiro / Allelism test between the alcobaça and non-ripening mutants in tomato plants

Desde o início da década de 1980, são relatadas na literatura divergências quanto às relações de alelismo ou não entre os mutantes de amadurecimento de frutos de tomateiro denominados alc (= alcobaça) e nor (=non-ripening). Para dirimir tais dúvidas, foi realizado um teste de alelismo entre os genes considerados. Foram avaliadas 364 plantas F2 provenientes do cruzamento entre as linhagens de tomateiro TOM-559 (alc/alc) e TOM-613 (nor/nor), além de vinte plantas de cada uma das linhagens TOM-559 (alc/alc), TOM-613 (nor/nor), de cada um dos híbridos F1 [(TOM-559 x TOM-613), alc+/alc nor+/nor], F1 [(Floradade x TOM-559), alc+/alc nor+/nor+] e F1 [(Floradade x TOM-613), alc+/alc+nor+/nor], bem como da linhagem de genótipo normal Floradade (alc+/alc+nor+/nor+ rin+/rin+). TOM-559 e TOM-613 são linhagens isogênicas à cv. Floradade, da qual diferem apenas quanto à presença dos genes alc e nor, respectivamente. Frutos de Floradade colhidos no estádio breaker apresentam coloração vermelha normal quando maduros (fenótipo normal), enquanto frutos de TOM-559 ou de TOM-613 permanecem amarelados ou amarelo-alaranjados (fenótipo mutante). De cada planta, foram colhidos quatro frutos no estádio breaker de maturação, que foram avaliadas quanto ao fenótipo (normal ou mutante) quando maduros. Os resultados dos testes de alelismo indicam que a hipótese mais provável é a de que alc e nor sejam alélicos. Dessa maneira, alc é considerado um terceiro alelo no loco nor, e sugere-se a substituição de seu símbolo para norA.

Since the early 1980's there are conflicting reports on the possible allelic relations between the tomato ripening mutants alc (=alcobaça) and nor (=non-ripening). In order to end these controversies, a test of allelism between the genes alc and nor was performed. A total of 364 plants of the F2 population between the tomato lines TOM-559 (alc/alc) and TOM-613 (nor/nor) were screened, along with 20 plants each of lines TOM-559 (alc/alc) and TOM-613 (nor/nor), of hybrids F1 [(TOM-559 x TOM-613), alc+/alc nor+/nor], F1 [(Floradade x TOM-559), alc+/alc nor+/nor+] and F1 [(Floradade x TOM-613), alc+/alc+nor+/nor], and of the normal phenotype line Floradade (alc+/alc+nor+/nor+). TOM-559 and TOM-613 are near-isogenic lines to Floradade, and differ from the latter only due to the presence of genes alc and nor, respectively. Floradade fruit harvested at the breaker stage show normal red color (normal phenotype) when fully ripe, whereas fruit of either TOM-559 or TOM-613 remain yellow or yellowish-orange (mutante phenotype). Four fruits per plant were harvested at the breaker stage and subsequently evaluated for their mature fruit color phenotype (normal or mutant). The results of the test of allelism indicate that the most likely hypothesis is that alc and nor are allelic to each other. Therefore, alc was considered to be a third allele at the nor locus, and the symbol norA was substituted for alc.

Anomalia de Peters, seus aspectos clínicos e terapêuticos: relato de caso / Peter's anomaly, clinical and therapeutic aspects: case report

A anomalia de Peters consiste na mais comum opacidade corneana congênita e é secundária à malformação do segmento anterior do olho. Suas principais características são opacidade corneana central e sinéquias da íris e/ou do cristalino com a região do leucoma. Pode apresentar-se de forma isolada ou associada a outras anomalias oculares e sistêmicas, tendo prognóstico mais sombrio nestes casos. A etiologia da anomalia Peters permanece incerta, sendo aventadas causas genéticas, infecciosas, traumáticas e tóxicas. O tratamento varia com a apresentação do quadro, sendo importante a pronta detecção da doença, possibilitando o tratamento precoce, com bom desenvolvimento da visão. Este trabalho relata um caso de anomalia de Peters diagnosticado tardiamente e discute as características da doença e possibilidades de tratamento.

Peter's anomaly consists in the most common congenital corneal opacity related to a malformation of the anterior segment of the eye. Its main characteristics are central leukoma and iridocorneal adherences at the area affected by the leukoma. It can be identified isolated or in association with other ocular or systemic abnormalities, and the prognostic tend to be worse in the latter cases. The etiology of Peter's anomaly remains uncertain, but the most likely causes are related to genetic, infectious, traumatic and toxic factors. A range of possible treatment strategies exists, though the effectiveness of each of them depends on how the disease occurs and whether it is identified in early or advanced stages - the earlier the diagnosis, the higher the possibility of a successful intervention, given that precocious treatments are more likely to result in a good development of the vision. This work reports a case of Peter's anomaly that was diagnosed in an advanced stage, discussing the characteristics of the case and treatment possibilities.

Inibição da tripsina de bicho-mineiro do cafeeiro por um fator não-protéico presente em extratos de folhas de mamona / Coffee leaf miner trypsin inhibition with castor bean leaf extracts mediated by a non-protein agent

Inibidores de tripsina representam uma estratégia de controle de insetos e, por isso, a identificação e caracterização desses inibidores são etapas muito importantes para que novas formas de controle de pragas sejam desenvolvidas. Os inibidores de tripsina atuam na digestão primária de proteínas e comprometem o processo digestivo por completo, reduzindo a disponibilidade de aminoácidos ao inseto. A incorporação de inibidores de tripsina na dieta de insetos-praga é uma forma de controle cuja eficácia foi verificada por diferentes autores. Este projeto foi conduzido a fim de se observar a eficiência de extratos de folhas de mamona na inibição "in vitro" de proteinases do tipo tripsina do bicho-mineiro do cafeeiro. Após testes realizados com os extratos de folhas de mamona não-fervidos e fervidos com e sem a adição de β-mercaptoetanol 0,2 por cento (v/v) e mediante precipitações com acetona, verificou-se que o inibidor é uma molécula termoresistente e não-protéica. Desta forma, iniciou-se um processo de purificação da molécula inibidora por meio de cromatografia de adsorção com posterior análise em espectrômetro de massas. Os resultados dos testes de inibição indicaram a presença de um inibidor de tripsina eficaz contra o bicho-mineiro do cafeeiro nos extratos de folhas de mamona capaz de inibir 2,48 + 0,15 UTI, o que representa aproximadamente 40 por cento de inibição. Em testes realizados com tripsina bovina observou-se que o extrato de folhas de mamona não apresenta poder de inibição sobre essa enzima.

Trypsin inhibitors stand for a strategy of insect control and, therefore, the identification and characterization of these inhibitors are very important steps for new forms of pest control to be developed. Trypsin inhibitors act in the primary digestion of proteins and endanger the digestive process wholly, reducing the availability of aminoacids to the insect. The incorporation of trypsin inhibitors in the diet of pest insects is a control form whose efficacy was verified by different authors. In order to observe the efficiency of castor bean leaf extracts in inhibiting trypsin-like enzymes of the coffee leaf miner, an experiment was carried out with the purpose of observing an "in vitro" inhibition phenomenon. The results of the trypsin inhibition tests with normal and boiled with and without β-mercaptoethanol 0.2 percent (v/v) castor bean leaf extracts and the results of the acetone precipitation process indicated that the inhibitor is a heat-resistant molecule and it is not a protein. This way, the purification process was made by adsorption chromatography with later analysis in mass spectrometer. The reached results indicated that the presence of a trypsin inhibitor of the coffee leaf miner in the castor bean leaf extracts is capable of inhibiting 2.48 + 0.15 UTI, which stands for about 40 percent of inhibition. Tests performed with bovine trypsin indicated that the castor bean leaf extract have no inhibiting power on this enzyme.

Evaluation of a simplified key for the identification of coagulase-positive Staphylococcus isolated from bovine mastitis / Avaliação de uma chave de identificação simplificada para Staphylococcus coagulase-positivos isolados de mastite bovina

Evaluation of a simplified key for the identification of coagulase-positive Staphylococcus isolated from bovine mastitis. Three hundred fourty four strains of coagulase-positive Staphylococcus (CPS), isolated from mastitis cases, underwent phenotypic and genotypic tests to evaluate the efficiency of a simplified key, based on phenotypic tests for the discrimination of these microorganisms. The tests consisted of amplification of the femA gene and hemolysis in blood agar, production of acetoin and fermentation of maltose, mannitol and trehalose. Strains that showed negative results in the amplification test of the femA gene or that were not identified as Staphylococcus aureus (S. aureus) by phenotypic tests were tested with the APISTAPH kit (Biomériux-France), for precise identification of species. Phenotypic tests revealed 338 strains (98.25%) as S. aureus, three strains (0.86%) as Staphylococcus hyicus, and three microorganisms (0.86%) as Staphylococcus intermedius. PCR demonstrated that 338 (98.25%) strains belonged to the S. aureus species, confirming the results for 336 strains from 338 identified, through a simplified phenotypic key. A high rate of correlation (98.83%) was verifeid between the results of genotypic and phenotypic tests for the identification of S. aureus, demonstrating the applicability of the proposed key, for the discrimination of this microorganism in CPS isolated from bovine mastitis.

Visando testar a eficiência de uma chave simplificada baseada em testes fenotípicos para a discriminação de Staphylocococcus coagulase positivos (SCP) isolados de infecções intramamárias de bovinos, 344 amostras destes microrganismos foram submetidas a testes fenotípicos e genotípicos. Estes consistiram na amplificação do gene femA, na observação de hemólise em ágar sangue, produção de acetoína e fermentação de maltose, manitol e trealose. Amostras que apresentaram resultado negativo na amplificação do gene femA ou que foram identificadas com não Staphylococcus aureus (S. aureus) por meio dos testes fenotípicos foram submetidas ao kit APISTAPH (Biomériux-França) para identificação mais precisa. Os testes fenotípicos utilizados na chave simplificada permitiram identificar 338 amostras (98,25%) como S. aureus, três amostras (0,86%) como Staphylococcus hyicus e três (0,86%) como Staphylococcus intermedius. Por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) 338 (98,25%) amostras foram identificadas como S. aureus, ratificando os resultados para 336 das 338 amostras identificadas por meio da chave fenotípica simplificada. Observou-se elevada concordância (98,83%) entre os resultados dos testes genotípicos e fenotípicos para a identificação de S. aureus, demonstrando a aplicabilidade da chave de identificação proposta para a discriminação deste microrganismo entre SCP isolados de casos de mastite bovina.

Divergência genética entre cultivares de gérbera utilizando marcadores RAPD / Genetic divergence among cultivars of gerbera using RAPD markers

No processo de produção comercial de mudas de gérbera, a cor da flor é uma das principais características morfológicas de interesse agronômico, sendo uma característica importante em programas de melhoramento genético. A utilização de marcadores moleculares pode servir para direcionar cruzamentos, confirmar novos híbridos ou genótipos mutantes e identificar novos genótipos para fins comerciais. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi analisar a divergência genética entre seis cultivares de Gerbera jamesonii ('Jaguar Yellow', 'Jaguar Cream', 'Jaguar Lemon', 'Jaguar Salmon Pastel', 'Jaguar Red', 'Jaguar Deep Rose'). A análise de divergência genética entre as cultivares de gérbera foi realizada utilizando-se 21 primers, os quais amplificaram 37 fragmentos polimórficos de DNA, que foram usados para estimar o coeficiente de Jaccard, o qual apresentou uma média de 0,38, variando de 0,28 a 0,56. A estrutura genética entre as cultivares foi estimada pelo UPGMA, revelando dois grupos distintos, a 38 por cento de similaridade genética. A maior similaridade genética encontrada (56 por cento) foi entre as cultivares 'Jaguar Yellow' e 'Jaguar Lemon'. Os resultados demonstram que a técnica RAPD oferece uma maneira rápida, relativamente barata e útil para a caracterização da divergência genética entre as diferentes cultivares de Gerbera jamesonii com relação à cor da flor.

During the commercial production of gerbera seedlings, flower color is one of the main morphological aspects that have an agronomic interest and becoming an important feature in genetic breeding programs. The use of molecular markers may serve to direct crossings, new hybrids and mutants, besides confirm and identify new genotypes for commercial purposes. In that context, this work aimed to analyze the genetic divergence among six cultivars of Gerbera jamesonii ('Jaguar Yellow', 'Jaguar Cream', 'Jaguar Lemon', 'Jaguar Salmon Pastel', 'Jaguar Red', 'Jaguar Deep Rose'). The genetic divergence among cultivars of gerbera was carried out with 21 primers, which amplified 37 DNA polymorphic fragments, used to estimate the Jaccard index and presented an average of 0,38, ranging from 0,28 to 0,56. The genetic structure among cultivars was estimated by UPGMA and revealed two distinct groups, at 38 percent genetic similarity. The largest genetic similarity found (56 percent) was between cultivars 'Jaguar Yellow' and 'Jaguar Lemon'. The results showed that the RAPD is a fast, relatively inexpensive and useful technique for genetic divergence characterization between different cultivars of Gerbera jamesonii.

Identificação de variantes somaclonais em bananeiras 'Prata Anã', utilizando técnicas moleculares e citogenéticas / Identification of somaclonal variants in 'Prata Anã' banana using molecular and cytogenetic techniques

Variação somaclonal é uma variação fenotípica de origem genética, ou seja, uma variação cromossômica que se torna herdável nas gerações seguintes, ou epigenética, que é uma variação transitória devido ao estresse fisiológico que o material sofre, quando submetido ao cultivo in vitro. Um problema específico envolvendo a variação somaclonal em bananeiras 'Prata Anã' foi observado em Andradas, Minas Gerais, em plantas oriundas de micropropagação. A maior dificuldade na separação dos indivíduos normais e variantes é que os caracteres morfológicos, que são inerentes a este tipo de variação, só se tornam evidentes quando a planta está adulta, o que impossibilita a eliminação dos indivíduos variantes ainda em viveiro. Com o objetivo de identificar, ainda em viveiro aqueles indivíduos variantes somaclonais, técnicas moleculares (RAPD e SSR) e citogenéticas (contagem cromossômica e citometria de fluxo) foram utilizadas. Cento e três primers RAPD, 11 combinações de dois primers RAPD, e 33 pares de primers SSR foram utilizados na tentativa de se encontrar marcadores polimórficos capazes de distinguir os indivíduos normais dos variantes, além de distinguir bananeiras 'Prata Anã' de 'Prata'. O primer OPW-08 gerou um fragmento polimórfico que distinguiu uma planta variante de todas as demais, provando que a variação não ocorre de maneira uniforme no genoma dos indivíduos variantes e que não há um retorno à cultivar Prata. As análises com marcadores SSR e a contagem cromossômica não possibilitaram a distinção dos indivíduos variantes, nem a separação das cultivares Prata e Prata Anã. As análises de citometria de fluxo evidenciaram a grande instabilidade cromossômica das bananeiras, porém elas não foram eficientes na identificação de variantes somaclonais.

Somaclonal variation is a phenotypical variation of genetic origin, that is, a chromosomal variation that becomes inheritable in the generations to follow, or of epigenetic origin, in this case being a transitory variation due to the physiological stress suffered when the material is submitted to in vitro cultivation. A specific problem involving somaclonal variation in 'Prata Anã' banana was observed in Andradas, Minas Gerais, in plants originated from tissue culture. The main difficulty in the distinction between the normal and variant plants is the fact that the morphological characters that allow the separation of these two types are only visible and distinguishable when the plants are in their adult phase, which makes it impossible to eliminate the variant seedlings at the nursery stage. For the early distinction of the variants, molecular (RAPD - Random Amplified Polymorphic DNA and SSR - Simple Sequence Repeat) and cytogenetic (chromosome counting and flow cytometry) techniques were used. In the attempt to find polymorphic markers that distinguished the normal plants from the variants as well as the Prata cultivar from the Prata Anã cultivar, 103 RAPD primers, 11 combinations of two RAPD primers, and 33 pairs of SSR primers were used. Primer OPW-08 generated a polymorphic fragment that distinguished a variant from all of the other plants, proving that the variation does not occur uniformly in the genome of all variants, and that there is no return to Prata cultivar. Analyses with SSR markers and chromosome counting were not efficient in separating normal plants from variants or 'Prata' from 'Prata Anã'. Flow cytometry analyses showed an evident instability in the banana genome in terms of number of chromosomes, however, they were not efficient in identifying the somaclonal variants.

Níveis de potássio em fertirrigação interferindo no crescimento/desenvolvimento e qualidade do crisântemo / Levels of potassium in fertirrigation interfering in the growth/development and quality of chrysanthemum

O crisântemo ocupa lugar de destaque entre as flores de vaso comercializadas no Brasil. Adubação e nutrição mineral estão entre os fatores essenciais para promover o bom desenvolvimento das plantas e flores de boa qualidade. Avaliou-se o efeito de dois substratos e cinco concentrações de potássio na solução nutritiva no crescimento/desenvolvimento do crisântemo (Dendranthema grandiflorum cv. Puritan). Após 90 dias do enraizamento, foram feitas determinações de número de inflorescências, folhas e hastes vaso, o diâmetro médios de inflorescência (cm) e a altura de planta (cm), e determinação da massa seca de inflorescências, folhas, hastes e relações folha/haste e folha/inflorescência. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x5 e com quatro repetições, sendo dois substratos: comercial (para cultivo de crisântemo - Vida Verde®) (SC) e fibra de coco (Golden Mix Mixto, T-40, Amafibra®) (FC) lixiviada e cinco concentrações de potássio (25; 50; 100; 200 e 400 mg L -1). O uso de 400 mg L-1 de potássio na solução nutritiva proporcionou a maior produção em ambos os substratos, porém FC lixiviada se destacou proporcionando plantas de melhor qualidade em relação ao substrato comercial.

The Chrysanthemum is one of the most important vase flowers in the Brazilian market. Fertilisation and mineral nutrition are amongst the essential factors for promoting plant development and good quality flowers. One evaluated the effect of two substrates and concentrations of potassium in nutritive solutions during the growth/development of chrysanthemums (Dendranthema grandiflorum cv. Puritan). After 90 days of rooting, the number of inflorescences, leaves, stems per plant and vase, inflorescences diameter and plant height (cm) and dry matter of inflorescences, leaves, stems and the ratios leaf/stem and leaf/inflorescence were determined. A completely randomized experimental outline in 2x5 factorial scheme with four replications was used with two substrates: Vida Verde® - commercial substrate for chrysanthemum growth (SC) and coconut fiber [Golden Mix Mixto, T-40, Amafibra®] (FC) lixiviate and five concentrations of K (25, 50, 100, 200 and 400 mg L-1). The use of 400 mg L-1 of potassium in nutritive solution provided the highest production in both substrates however, the substrate FC lixiviate formed plants with better quality compared with the commercial substrate.

Organogênese em capítulos florais e avaliação de características anatômicas da folha de Gerbera jamesonii Adlam / Capitulum organogenesis and anatomical characterization of Gerbera jamesonii Adlan leaves

Objetivou-se determinar um protocolo de micropropagação por organogênese indireta em capítulos florais de gérbera (Gerbera jamesonii Adlam) e comparar as características anatômicas de folhas de gérbera obtidas in vitro com as mantidas em condições in vivo. Capítulos florais de gérbera foram utilizados como fonte inicial de explantes para a indução de calos e regeneração. As brotações obtidas foram enraizadas in vitro e, após 30 dias, as plântulas foram aclimatizadas. Posteriormente, foram realizados estudos anatômicos de folhas provenientes do cultivo in vivo e in vitro. Obtiveram-se em média 3,2 brotações e 6,6 folhas a partir da indução de calos em capítulos florais de gérbera. Foi observada a formação de raízes na ausência e na presença de ANA, obtendo-se 100 por cento de enraizamento. A suplementação do meio de cultura com doses crescentes de ANA promoveram um aumento linear no número de raízes e no comprimento médio de raízes. As plântulas provenientes do cultivo in vitro apresentaram taxa de 100 por cento de sobrevivência na aclimatização. As estruturas foliares desenvolvidas in vivo apresentaram as epidermes adaxial e abaxial, parênquimas paliçádico e esponjoso mais espessos que no cultivo in vitro. O sistema vascular em folhas produzidas in vivo é mais desenvolvido que in vitro.

The objective was to determine a micropropagation protocol for indirect organogenesis and to compare the anatomical characteristics of leaves of gerbera (Gerbera jamesonii Adlam) obtained in vitro with the leaves maintained in vivo conditions. Capitulum explants of gerbera were taken as an initial source of explants to induce callus and regeneration. The obtained shoots were rootted in vitro and after 30 days seedlings were acclimatized.Thus, anatomical studies of leaves originating from of the in vivo and in vitro cultivation were taken. On average it was obtained 3,2 shoots and 6,6 leaves from the induction of callus in capitulum explants of gerbera. The formation of roots was observed in the presence and absence of NAA, obtaining 100 percent of rooting. The supplementation of NAA to the medium promoted a linear increase in the number of roots and in the mean length of roots. Seedlings from the in vitro cultivation showed rate of 100 percent of survival in the acclimatization. The foliar structures developed in vivo showed adaxial epidermis, palisade parenchyma, spongy parenchyma and abaxial epidermis thicker than in the in vitro cultivation. The vascular system in leaves produced in vivo is more developed than in vitro.

PR gene families of citrus: their organ specific-biotic and abiotic inducible expression profiles based on ESTs approach

In silico expression profiles, of the discovered 3,103 citrus ESTs putatively encoding for PR protein families (PR-1 to PR-17), were evaluated using the Brazil citrus genome EST CitEST/database. Hierarchical clustering was displayed to identify similarities in expression patterns among citrus PR-like gene families (PRlgf) in 33 selected cDNA libraries. In this way, PRlgf preferentially expressed by organ and citrus species, and library conditions were highlighted. Changes in expression profiles of clusters for each of the 17 PRlgf expressed in organs infected by pathogens or drought-stressed citrus species were displayed for relative suppression or induction gene expression in relation to the counterpart control. Overall, few PRlgf showed expression 2-fold higher in pathogen-infected than in uninfected organs, even though the differential expression profiles displayed have been quite diverse among studied species and organs. Furthermore, an insight into some contigs from four PRlgf pointed out putative members of multigene families. They appear to be evolutionarily conserved within citrus species and/or organ- or stress-specifically expressed. Our results represent a starting point regarding the extent of expression pattern differences underlying PRlgf expression and reveal genes that may prove to be useful in studies regarding biotechnological approaches or citrus resistance markers.