Comparison of the excretory capacities of erythropoietin and U-74389G concerning serum creatinine levels / Comparación de las capacidades excretoras de eritropoyetina y U-74389G respecto a los niveles de creatinina sérica

Introduction This study compared the excretory effects, the erythropoietin (Epo) and antioxidant drug U-74389G exert on serum creatinine levels through kidneys. 2 preliminary studies were used for this purpose including respectively one drug used in a renal ischemia­reperfusion (IR) protocol of an animal model. The preliminary studies are part of the present work. The subjects were pretreated in preliminary studies but the results of the same subjects were simply compared in the current work. Materials and methods The serum creatinine levels were evaluated at the 60th reperfusion min (for groups A, C and E) and at the 120th reperfusion min (for groups B, D and F) after IR in the 60 rats. Groups A and B received no drugs, rats from groups C and D were administered with Epo, whereas rats from groups E and F were administered with U-74389G. Results The first preliminary study recommended a non-significant excretory effect of Epo (p-value = 0.4430 > 0.05) than placebo for serum creatinine levels. The second preliminary study proved a very significant excretory effect of U-74389G (p-value = 0.0005 < 0.05) than placebo for serum creatinine levels. These 2 studies were co-evaluated since they came from the same experimental setting. The outcome of the co-evaluation was that U-74389G has at least 5-fold significant excretory action (p-value = 0.0000 < 0.05) than Epo for serum creatinine levels. Conclusions The U-74389G presents surprising effective excretory potencies for serum creatinine levels maybe of great importance in hemodialysis patients.

Introducción Este estudio comparó los efectos excretores que la eritropoyetina (Epo) y el fármaco antioxidante U-74389G ejercen sobre los niveles de creatinina sérica a través de los riñones. Se utilizaron 2 estudios preliminares incluyendo, respectivamente, un fármaco utilizado en una rata protocolo de reperfusión de isquemia renal. Los estudios preliminares son parte del presente trabajo. Los sujetos fueron pretratados en estudios preliminares, pero los resultados de los mismos sujetos fueron comparados simplemente en el trabajo actual. Materiales y métodos Se evaluaron los niveles de creatinina sérica en la 60.ª reperfusión en minutos (para los grupos A, C y E) y en la 120.ª reperfusión en minutos (para los grupos B, D y F) después de isquemia renal en las 60 ratas. Los grupos A y B no recibieron fármacos, a las ratas de los grupos C y D se les administró Epo, mientras que las ratas de los grupos E y F se les administró U-74389G. Resultados El primer estudio preliminar recomendó un efecto excretor no significativo de la Epo (valor p = 0,4430 > 0,05) comparado con el placebo para los niveles de creatinina sérica. El segundo estudio preliminar demostró un efecto excretor muy significativo del U-74389G (valor p = 0,0005 < 0,05) comparado con el placebo para los niveles de creatinina sérica. Estos 2 estudios fueron coevaluados, ya que procedían del mismo entorno experimental. El resultado fue que el U-74389G tiene una acción excretora significativa de al menos 5 veces (p = 0,0000 < 0,05) la Epo para los niveles de creatinina sérica. Conclusiones El U-74389G presenta sorprendentes potencias excretoras efectivas para los niveles de creatinina sérica, tal vez de gran importancia en pacientes en hemodiálisis.

Acute effect of the antioxidant drug U-74389G on hematocrit levels during hypoxia and reoxygenation injury in rats / Efeito agudo do fármaco antioxidante U-74389G sobre os níveis de hematócrito durante a lesão induzida por hipóxia e reoxigenação em ratos

Aims: This experimental study evaluated the effect of the antioxidant drug U-74389G on hematocrit levels using a rat model of hypoxia and reoxygenation following an established protocol. Methods: Forty rats with a mean weight of 231.875 g were employed in the study. Hematocrit levels were determined at 60 min (groups A and C) and at 120 min (groups B and D) after starting reoxygenation. Groups A and B received no drugs, whereas U-74389G was administered to rats for groups C and D. Results: U-74389G administration significantly increased hematocrit levels by 4.73%±2.25% (p=0.0435). Reoxygenation time increased hematocrit levels non significantly by 3.96%±2.29% (p=0.1025). U-74389G administration combined with reoxygenation time significantly increased hematocrit levels by 3.16%±1.33% (p=0.0196). Conclusions: U-74389G administration, whether it interacted or not with reoxygenation time, significantly increased hematocrit levels in the short term in a rat model of hypoxia and reoxygenation.

Objetivos: Este estudo experimental avaliou o efeito da droga antioxidante U-74389G nos níveis de hematócrito, utilizando um modelo murino de hipóxia e reoxigenação, de acordo com um protocolo estabelecido. Métodos: Quarenta ratos com um peso médio de 231,875 g foram utilizados no estudo. Os níveis de hematócrito foram determinados aos 60 min (grupos A e C) e aos 120 minutos (grupos B e D) após o início da reoxigenação. Os grupos A e B não receberam nenhuma droga, enquanto que a U-74389G foi administrada aos ratos dos Grupos C e D. Resultados: A administração de U-74389G aumentou significativamente os níveis de hematócrito em 4,73%±2,25% (p=0,0435). O tempo de reoxigenação aumentou não significativamente os níveis de hematócrito em 3,96%±2,29% (p=0,1025). Aadministração de U-74389G combinada com o tempo de reoxigenação aumentou significativamente os níveis de hematócrito em 3,16%±1,33 (p=0,0196). Conclusões: A administração de U-74389G, quer interagindo ou não com o tempo de reoxigenação, aumentou significativamente, no curto prazo, os níveis de hematócrito em um modelo murino de hipóxia e reoxigenação.

The effect of erythropoietin on creatine phosphokinase levels during ischemia reperfusion injury in rats / Efecto de la eritropoyetina en niveles de creatine fosfoquinasa durante daño por isquemia reperfusión en ratas

Objective: to examine the effect of erythropoietin testing on rat model and particularly the ischemia reperfusion protocol. Methods: experimental study of 40 rats weighing 247.7 g as average. The beneficial effect or non-effectiveness of the erythroproietin molecule on the blood creatine phosphokinase levels was biochemically studied. It was measured 60 min (groups A and C) and 120 min (groups B and D) after reperfusion with no administration of erythropoietin in groups C and D. Results: Erythropoietin administration significantly increased the creatine phosphokinase levels to 3586.05 IU/L (1873.115 IU/L-5298.985 IU/L;p= 0.0001). This finding was in accordance with the result of paired t-test (p= 0.0001). Reperfusion time significantly increased the CPK levels to 557.35 IU/L (-1513.284 IU/L-2627.984 IU/L; p= 0.5890), also in accordance with paired t-test (p= 0.4661). The interaction of erythropoietin administration and reperfusion time significantly increased the creatine phosphokinase levels to 1988.282 IU/L (918.2646 IU/L-3058.299 IU/L; p= 0.0006). Conclusions: Erythropoietin administration, reperfusion time and their interaction generally increase short-term effects on blood creatine phosphokinase after ischemia reperfusion injury.

Objetivo: examinar el efecto del test de eritropoyetina en un modelo de rata, particularmente el protocolo de isquemia reperfusión. Métodos: estudio experimental en el que se usaron 40 ratas con un peso medio de 247,7 g. Se estudió bioquímicamente el beneficio o el no efecto de la molécula de eritropoyetina en la creatín fosfokinasa sanguínea. Esta se midió en dos momentos: 60 min después de la reperfusión (grupos A y C) y 120 min después de esta (grupos B y D). No se administraron eritropoyetina en los grupos A y B, contrario a los grupos C y D. Resultados: la administración de eritropoyetina aumentó significativamente la creatín fosfokinasa sanguínea a 3586,05 UI/L (1873,115 IU/L-5298,985 UI/L; p= 0,0001), de acuerdo también con el test pareado t-test (p= 0,0001). El tiempo de reperfusión incrementó significativamente la creatín fosfokinasa sanguínea a 557,35 UI/L (-1513,284 UI/L-2627,984 UI/L; p= 0,5890), de acuerdo con el test aplicado t-test (p= 0,4661). La interacción de la administración de eritropoyetina y el tiempo de reperfusión elevó significativamente los niveles de creatín fosfokinasa sanguínea a 1988,282 UI/L (918,2646 IU/L-3058,299 IU/L; p= 0,0006). Conclusión: la administración de eritropoyetina, el tiempo de reperfusión y su interacción, generalmente incrementa los efectos a corto plazo en la creatín fosfokinase sanguínea después del daño por isquemia reperfusión.

Hypoxia/reoxygenation-induced myocardial lesions in newborn piglets are related to interindividual variability and not to oxygen concentration

OBJECTIVE: Evaluation of myocardial histological changes in an experimental animal model of neonatal hypoxiareoxygenation. METHODS: Normocapnic hypoxia was induced in 40 male Landrace/Large White piglets. Reoxygenation was initiated when the animals developed bradycardia (HR <60 beats/min) or severe hypotension (MAP <15 mmHg). The animals were divided into four groups based on the oxygen (O2) concentration used for reoxygenation; groups 1, 2, 3, and 4 received 18%, 21%, 40%, and 100% O2, respectively. The animals were further classified into five groups based on the time required for reoxygenation: A: fast recovery (<15 min); B: medium recovery (15-45 min); C: slow recovery (45-90 min); D: very slow recovery (>90 min), and E: nine deceased piglets. RESULTS: Histology revealed changes in all heart specimens. Interstitial edema, a wavy arrangement, hypereosinophilia and coagulative necrosis of cardiomyocytes were observed frequently. No differences in the incidence of changes were observed among groups 1-4, whereas marked differences regarding the frequency and the degree of changes were found among groups A-E. Coagulative necrosis was correlated with increased recovery time: this condition was detected post-asphyxia in 14%, 57%, and 100% of piglets with fast, medium, and slow or very slow recovery rates, respectively. CONCLUSIONS: The significant myocardial histological changes observed suggest that this experimental model might be a reliable model for investigating human neonatal cardiac hypoxia-related injury. No correlation was observed between the severity of histological changes and the fiO2 used during reoxygenation. Severe myocardial changes correlated strictly with recovery time, suggesting an unreported individual susceptibility of myocardiocytes to hypoxia, possibly leading to death after the typical time-sequence of events.

Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células não-parenquimatosas / Allogenic islet transplantation on the rat liver after allogenic nonparenchymal cells injection in the thymus

RACIONAL: A maior indicação do transplante de pâncreas ou de ilhotas de Langerhans é o diabetes mellitus do tipo I. O processo deve suprir as necessidades de insulina, mantendo os níveis glicêmicos dentro da normalidade OBJETIVOS: Estudar o alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos Lewis (RT1¹), tendo como doadores de ilhotas ratos Wistar (RT1u). No grupo controle (n = 8) injetava-se, no timo, solução de Hanks e no grupo de estudo(n = 8), células não-parenquimatosas hepáticas MATERIAL E MÉTODOS: No grupo controle com o método de separação e purificação das ilhotas de Langerhans obteve-se 3.637 ± 783,3 ilhotas com pureza de 85 ± 3,52 por cento. No grupo de estudo obteve-se 3.270 ± 770 ilhotas de Langerhans com pureza de 84,25 ± 2,76 por cento e com o método de isolamento e purificação das células não-parenquimatosas hepáticas obteve-se 2 x 10(6) células RESULTADOS: No grupo controle, o transplante de 3.637 ± 783,3 ilhotas de Langerhans no fígado, quase normalizou a glicemia que chegou a 17,95 ± 5,33 mmol/L no 2° dia do pós-operatório (diferença significante com relação ao pré-operatório). Do pós-operatório imediato até o 8° dia do pós-operatório a glicemia não se elevou significativamente, porém a partir do 10° dia do pós-operatório houve aumento significativo deste parâmetro, o que pode ser compatível com rejeição aguda do enxerto. No grupo de estudo, o transplante de 3.270 ± 770 ilhotas de Langerhans no fígado, quase normalizou a glicemia que chegou a 17,95 ± 5,33 mmol/L no 2° dias do pós-operatório (diferença significante com relação ao pré-operatório). Do 4° ao 10° pós-operatório a glicemia elevou-se significativamente, o que pode ser compatível com quadro de rejeição aguda do enxerto e certamente precoce CONCLUSÃO: A inoculação de células alogênicas apresentadoras de antígenos (células não-parenquimatosas hepáticas) no timo de ratos imunossuprimidos e diabéticos, antes...

BACKGROUD: The major indication for pancreas or islet transplantation is diabetes mellitus type I. This process has to supply the insulin necessity keeping glucose under control AIM: We studied allogenic islet transplantation on the rat liver, Wistar (RT1u) to Lewis (RT1¹) as a recipient. Control group (n = 8) and nonparenchymal cell group (n = 8) respectively with injection of Hanks solution and nonparenchymal cells in the thymus before islet transplantation. MATERIAL AND METHODS: With the method of isolation and purification of the islets we obtained both in the control group 3.637 ± 783,3 islets with purity of 85 ± 3,52 percent and nonparenchymal cell group 3.270 ± 770 islets with purity of 84,25 ± 2,76 percent. The nonparenchymal cells were retrieved from the liver and we obtained 2 x 106 cells. Diabetes was induced by i.v. streptozotocin RESULTS: Control group the transplantation of 3.637 ± 783,3 islets in the rat liver normalized glucose test, 7,21 ± 0,57 mmol/L in the 2nd postoperative day. Acute rejection came in the 6th postoperative day with significantly increase of glucose test in nonparenchymal cell group, the transplantation of 3.270 ± 770 islets in the rat liver, almost normalized the glucose test was 17,95 ± 5,33 mmol/L in the 2nd postoperative day. From the 4th postoperative day to 10th postoperative day. The glucose test increase significantly showing an early acute rejection CONCLUSION: The injection of nonparenchymal cells in the thymus before allogenic islet transplantation in the rat liver lead to an early acute rejection.

Alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos submetidos a manipulação tímica com células dendríticas / Alogenic islet transplantation on the rat liver after alogenic dendritic cells injection in the thymus

RACIONAL: A maior indicação do transplante de pâncreas ou de ilhotas de Langerhans é o diabetes mellitus do tipo I. O processo deve suprir as necessidades de insulina, mantendo os níveis glicêmicos dentro da normalidade. OBJETIVOS: Estudou-se o alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado de ratos Lewis, tendo como doadores de ilhotas ratos Wistar. No grupo controle (n = 8) injetava-se, no timo, solução de Hanks e no grupo de estudo (n = 9), células dendríticas. MATERIAL E MÉTODOS: No grupo controle com o método de separação e purificação das ilhotas de Langerhans obteve-se 3637 ± 783,3 ilhotas com pureza de 85 por cento ± 3,52 por cento. No grupo de estudo obteve-se 3268 ± 378 ilhotas de Langerhans com pureza de 87 por cento ± 4,47 por cento e com o método de isolamento e purificação das células dendríticas do baço obteve-se 3,34 x 105 ± 1,16 células. RESULTADOS: No grupo controle, o transplante de 3637 ± 783,3 ilhotas de Langerhans no fígado, normalizou a glicemia que chegou a 7,21 ± 0,57 mmol/L no segundo pós-operatório (diferença significativa com relação ao pré-operatório). Do pós-operatório imediato até o 8° pós-operatório a glicemia não se elevou significativamente, porém a partir do 10° pós-operatório houve aumento significativo deste parâmetro, o que pode ser compatível com rejeição aguda do enxerto. No grupo de estudo, o transplante de 3258 ± 378 ilhotas de Langerhans no fígado, normalizou a glicemia, que chegou a 9,3 ± 2,85 mmol/L no segundo pós-operatório (diferença significativa com relação ao pré-operatório). Do 4° ao 10° pós-operatório, a glicemia elevou-se significativamente, o que pode ser compatível com quadro de rejeição aguda do enxerto e certamente precoce. CONCLUSÃO: A inoculação de células alogênicas apresentadoras de antígenos (células dendríticas) no timo de ratos imunossuprimidos e diabéticos, antes do alotransplante de ilhotas de Langerhans no fígado, ao contrário de inibir a reação do receptor contra o enxerto, prolongando a sobrevida média das ilhotas e, possivelmente, levando ao estado de tolerância imunológica, induziu ao processo de rejeição aguda precoce.