Marcaje indirecto de anticuerpos monoclonales empleando la N2-dietilentriamino-pentaacetil lisina amida como agente quelatante del 99mTc / Indirect labeling of monoclonal antibodies with 99mTc, using N2-diethylentriamine-pentaacetil lysine amide as chelating agent

Los anticuerpos monoclonales y sus fragmentos marcados se han empleado ampliamente en el diagnóstico y seguimiento de diferentes tipos de neoplasias. El objetivo del trabajo fue desarrollar una metodología para el marcaje indirecto de anticuerpos con 99mTc, partiendo de la N2-dietilentriamino-pentaacetil lisina amida como agente quelatante. Mediante reacción con un exceso molar de 2-iminotiolano (1:200) y reducción con un exceso de 2-mercaptoetanol (1:2000) se generaron en el anticuerpo 3.5 +/- 0.6 y 5.8 +/- 0.5 grupos –SH, respectivamente, por lo que se continuó el trabajo con la segunda metodología. Se incubó el h-R3 reducido durante 12 h con N6-ciclohexilmaleimido-N2-dietilentriaminopentaacetil lisina amida, obtenida previamente mediante la reacción de la N2-dietilentriamino-pentaacetil lisina amida con sulfosuccinimidil–4(N-maleimido-metil) ciclohexano-1-carboxilato de sodio. La eficiencia de marcaje con 99mTc del anticuerpo monoclonal h-R3 modificado según este método fue de (98.6 +/-1.4) por ciento, manteniendo una estabilidad satisfactoria hasta 24 h frente al exceso de L-cisteína (1:300). Conclusiones: La metodología desarrollada permitió el marcaje indirecto del anticuerpo monoclonal humanizado h-R3 con 99mTc de forma satisfactoria, empleando la N2- dietilentriaminopentaacetil lisina amida como agente quelatante bifuncional.

Labeled monoclonal antibodies and their fragments are been widely employed for the diagnosis and follow up of different kinds of neoplasm. The aim of the present work was to develop a method for indirect labeling of antibodies with 99mTc, using N2-diethylentriamine-pentaacetil lysine amide as chelating agent. By reactions with a 200-fold molar excess of 2-iminothiolane, and the reduction using a 2000-fold molar excess of 2-mercaptoethanol, 3.5 +/- 0.6 and 5.8 +/- 0.5 sulfhydril groups, respectively, were generated in the antibody. Thus, work was continued using the second procedure. Reduced h-R3 was incubated for 12 h with N6-cyclohexylmaleimide-N2-diethylentriamine-pentaacetil lysine amide, previously obtained by the reaction of N2-diethylentriamine-pentaacetil lysine amide with sodium sulfosuccinimidyl–4(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate. Labeling efficiency of h-R3 monoclonal antibody, modified by this method with 99mTc, was (98.6 +/- 1.4) percent. A satisfactory stability of the label was observed up to 24 h in presence of a 300-fold molar excess of L-cysteine. Conclusions: Developed procedure allowed satisfactory indirect labeling of the humanized monoclonal antibody h-R3 with 99mTc, using N2-diethylentriamine-pentaacetil lysine amide as bifunctional chelating agent.

Radiation induced graft copolymerization of acrylamide onto poly (3-hydroxybutyrate) / Copolimerización por injerto radioinducido de acrilamida en el poli (3-hidroxibutirato)

The graft copolymer poly (3-hydroxybutyrate)-g- polyacrylamide[P (HB-g-AAm)] was synthesized by radiation induced graft copolymerization of acrylamide onto poly (3-hydroxybutyrate). The study was conducted by the simultaneous irradiation method. The structure of [P (HB-g-AAm)] was identified by Fourier Transform Infrared (FTIR) spectroscopy. Thermal behavior of the graft copolymer was also studied by Thermal Gravimetric Analysis (TGA) and Differential Scanning Calorimetry (DSC). According to the results, FTIR studies showed new signals (stretching-N-H) as an important evidence of grafting. The grafting degree, determined by ATG, was 10% and changes in thermodynamic parameter obtained from the DSC were detected. Such changes show a decrease in crystallinity and an increase in the glass transition temperature. These results demonstrate that the gamma radiation-induced graft copolymerization reaction of acrylamide onto PHB was successively achieved.

En el trabajo se realizó la síntesis del copolímero por injerto poli (3-hidroxibutirato)-g- poliacrilamida [P (HB-g-AAm)] por copolimerización de injerto radioinducido del monómero acrilamidaen el PHB. El estudio se llevó a cabo por el método de la irradiación simultánea. La estructura del copolímero se identificó por espectroscopía Infrarrojo por Transformada de Fourier (FTIR). Además, se realizó el estudio térmico del compuesto obtenido por análisis termogravimétrico (TGA) y calorimetría diferencial de barrido (DSC). De los resultados se encontraron señales (vibraciones de valencia -N-H) por FTIR que constituyen una importante evidencia de la reacción de injerto. El grado de injerto determinado por ATG fue de 10% y se detectaron cambios en los parámetros termodinámicos estudiados por DSC, que muestran una disminución de la cristalinidad y un aumento de la temperatura de transición vítrea. Los resultados demostraron la formación del copolímero por injerto inducido por radiaciones gamma.