Microscopio and PCR-based detection of microsporidia spores in human stool samples

Abstract Microsporidia are obligate intracellular fungi with a remarkable ability to infect a wide range of invertebrate and vertebrate hosts. Namely, Enterocytozoon bieneusi is the most frequently microsporidia reported worldwide, and mainly associated with chronic diarrea and wasting syndrome in AIDS patients. Microscopy and PCR-based detection techniques are effective for diagnosis and identification of species and genotypes; however, these methods should be standardized in each laboratory. In this study, we performed microscopy and nested PCR techniques with PCR product sequencing to detect E. bieneusi in human stool samples. These techniques, if applied together, might prove useful for diagnosis and future epidemiological studies of intestinal microsporidiosis in Argentina.

Resumen Los microsporidios son hongos intracelulares obligados con una notable capacidad para infectar una amplia gama de hospedadores invertebrados y vertebrados. Enterocytozoon bieneusi es el microsporidio más frecuentemente reportado en todo el mundo, principalmente tricrómicaasociado con diarrea crónica y síndrome debilitante en pacientes con sida. Las técnicas dedetección basadas en microscopía y PCR son útiles para el diagnóstico y la identificación deespecies y genotipos, pero estos métodos deben estar estandarizados en cada laboratorio.En este estudio evaluamos técnicas de microscopía y PCR anidada, con secuenciación de losproductos, para detectar E. bieneusi en muestras de heces humanas. Estas técnicas, usadas con-juntamente, podrían ser útiles para su aplicación en el diagnóstico de microsporidiosis intestinaly para realizar estudios epidemiológicos de esta afección en Argentina.

Ascaridiosis en la vía biliar intrahepática: a propósito de un caso pediátrico / Ascariasis in the intrahepatic biliary duct: about a case in pediatrics

El 25 % de la población mundial se encuentra infectada por Ascaris lumbricoides. La ascaridiosis hepatobiliar ocurre en zonas con alta endemicidad y gran carga parasitaria, y genera desde intensa inflamación hasta fibrosis. Se presenta a un paciente de 2 años, que consultó por distensión abdominal y tos de 1 mes de evolución asociada a fiebre en las últimas 72 h. Se realizó una ecografía abdominal que evidenció áscaris en la vía biliar, en el estómago y en el intestino delgado, y una radiografía de tórax con infiltrado inflamatorio intersticial, asociado a hiperleucocitosis con hipereosinofilia y gamma-glutamiltranspeptidasa elevada. Se administró un tratamiento antibiótico, antihelmíntico, sin lograr la eliminación de los parásitos de la vía biliar, por lo que se requirió su extracción mediante colangiografía percutánea

Twenty five percent of the world population is affected by Ascaris lumbricoides. Hepatobiliary ascariasis occurs in areas with high endemicity and great amount of parasitic load, generating intense inflammation to fibrosis. We report a two-year-old patient that consults about abdominal distension and cough of one month of evolution associated with 72 hours of fever. Abdominal ultrasound is performed, which shows bile duct, stomach, small intestine with ascaris and chest x-ray with interstitial inflammatory infiltrate, associated with hyperleukocytosis with hypereosinophilia and elevated gamma-glutamyl transpeptidase. Antibiotic, anthelminthic treatment is administered, without achieving the elimination of the bile duct parasites, requiring their removal by percutaneous cholangiography.

Prevalencia de parásitos intestinales en muestras de pacientes atendidos en el Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan", Argentina, 2018-2019 / Prevalence of intestinal parasites in samples of patients attending the Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan", Argentina, 2018-2019 / Prevalência de parasitas intestinais em amostras de pacientes atendidos no Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan", Argentina, 2018-2019

Resumen Se evaluaron retrospectivamente los resultados obtenidos de estudios parasitológicos en muestras de heces y escobillados anales remitidos al Laboratorio de Parasitología y Gastroenterología del Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan" de la Ciudad de Buenos Aires, Argentina. El objetivo del trabajo fue conocer la prevalencia de los parásitos intestinales observados en las muestras remitidas a este hospital y su distribución en rangos etarios. En el período comprendido entre mayo de 2018 y abril de 2019 se analizó un total de 4713 muestras pertenecientes a 3311 pacientes, que arrojó un resultado total de 29% de positivos (1371/4713). De los exámenes coproparasitológicos el 30% fueron positivos (1193/4025) y se hallaron huevos de Enterobius vermicularis en el 26% (178/688) de los escobillados anales. En las muestras seriadas de heces se obtuvo un 37% de positividad mientras que en muestras únicas un 21%. En la totalidad de muestras fecales, los enteroparásitos más prevalentes fueron Blastocystis spp. en un 14% (579/4025), Giardia duodenalis 11% (456/4025) y Dientamoeba fragilis 7% (291/4025). Los resultados demostraron diferencias significativas con mayor prevalencia de parásitos intestinales en pacientes en edad escolar comprendidos entre los 6 y 10 años, en relación a los de edad preescolar. En las muestras fecales analizadas se evidenció un predominio de parasitismo de protozoos sobre helmintos, por lo que se debería considerar reforzar el diagnóstico de laboratorio de esas especies mediante técnicas, como coloraciones, que posibiliten su hallazgo y confirmación.

Abstract The results obtained of the coproparasitological studies and anal swab submitted to the laboratory of the Parasitology Section of the Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan" of the Buenos Aires City, Argentina, were retrospectively evaluated The aim of this study was to determine the prevalence of intestinal parasites found on the submitted samples and to evaluate their frequency according to the age of the patients. Within the period between May 2018 and April 2019, a total of 4713 samples corresponding to 3311 patients were analyzed and intestinal parasites were present in 29% (1371/4713). In 30% of coproparasitological studies parasite estructures were found (1193/4025) and 26% of anal swab samples were positive for the presence of Enterobius vermicularis eggs (178/688). In serial fecal samples, 37% positive results were obtained, while in single samples, 21%. The most prevalent enteroparasites calculated from the total fecal samples were: Blastocystis spp. with 14% (579/4025), followed by Giardia duodenalis 11% (456/4025) and Dientamoeba fragilis 7% (291/4025). The incidence of intestinal parasites was higher in the group of patients between 6 and 10 years, and the existence of significant differences between proportions of parasitized patients in preschool and school infants, was observed. In the faecal samples analyzed, a greater prevalence of parasitism caused by protozoa than by helminths was evidenced, for which reason it should be considered, reinforcing the laboratory diagnosis using techniques such as stains that allow its finding and confirmation.

Resumo Os resultados obtidos de estudos parasitológicos em amostras fecais e esfregaços anais enviados ao Laboratório de Parasitologia e Gastroenterologia do Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan" da Cidade de Buenos Aires, Argentina, foram avaliados retrospectivamente. O objetivo do estudo foi avaliar a prevalência dos parasitas intestinais observados nas amostras enviadas a este hospital e sua distribuição por faixas etárias. Durante o período compreendido entre maio de 2018 a abril de 2019 foram analisadas 4713 amostras, correspondentes a 3311 pacientes, o que deu um resultado total de 29% de positivos (1371/4713). 30% dos exames coproparasitológicos foram positivos (1193/4025) e foram encontrados ovos de Enterobius vermicularis em 26% (178/688) dos esfregaços anais. Nas amostras seriadas fecais foram obtidos 37% de resultados positivos, enquanto que em amostras únicas, 21%. Os enteroparasitas mais prevalentes na totalidade das amostras fecais foram Blastocystis spp. em 14% (579/4025), Giardia duodenalis 11% (456/4025) e Dientamoeba fragilis 7% (291/4025). Os resultados demonstraram diferenças significativas com maior prevalência de parasitas intestinais em pacientes em idade escolar da faixa etária entre 6 e 10 anos, em relação aos da pré-escola. Nas amostras fecais analisadas, evidenciou-se um predomínio de parasitismo por protozoários por sobre helmintos, pelo qual deve ser considerado o reforço do diagnóstico laboratorial dessas espécies por meio de técnicas, como colorações que permitam a sua localização e confirmação.

Hidatidosis en niños: experiencia en un hospital de alta complejidad fuera del área endémica / Echinococcosis in children: Experience in a tertiary care hospital outside the endemic area

La hidatidosis es una zoonosis con una amplia distribución en Argentina y en el mundo. Se adquiere en la infancia, pero se presenta, más frecuentemente, en la edad adulta. La población pediátrica representa el 10%-20% del total de los casos. Se presentan 47 niños con diagnóstico de hidatidosis durante un período de 20 años. La mediana de edad fue de 8 años (rango: 3-17) y, en su mayoría, tenían algún antecedente epidemiológico orientador, como la procedencia de un área endémica, rural y/o la tenencia de perros alimentados con visceras. El 85% fueron quistes únicos localizados en un solo parénquima. Las localizaciones quísticas pulmonares y hepáticas fueron las más frecuentemente encontradas. El tratamiento fue médico-quirúrgico en 45 pacientes (96%). Trece (28%) presentaron alguna complicación posterior, que fue más frecuente en aquellos con localización pulmonar. Tres (6%) recayeron entre el mes y los 24 meses, y requirieron una nueva cirugía. Ninguno falleció a causa de la enfermedad parasitaria.

Echinococcosis is a zoonotic disease that is widely spread across Argentina and worldwide. It is acquired during childhood but it is more common during adulthood. The pediatric population accounts for 10-20% of all cases. This study included 47 children diagnosed with echinococcosis over a 20-year period. Their median age was 8 years old (range: 3-17); most patients had some epidemiological history, such as having lived or living in an endemic or rural area and/or having dogs that are fed with viscera. Findings included 85% of single cysts in only one parenchyma. Cysts were most commonly located in the liver and lungs. Medical/surgical treatment was carried out in 45 patients (96%). Subsequent complications were observed in 13 patients (28%), which were more common in those with lung cysts. Three patients (6%) relapsed 1-24 months later and required a new surgery. No patient died as a result of the parasitic disease.

Hidatidosis cerebral: comunicación de seis casos pediátricos / Cerebral hydatid disease: report of six pediatric cases

Hydatid disease is a parasitic infection whose etiologic agent is Echinococcus granulosus. Human is an accidental intermediate host and the most common site is the liver. The brain involvement is unusual and up to 75% of cases are described in the pediatric population. We present six children with cerebral hydatid disease admitted to the Pediatric Hospital J.P. Garrahan. All had neurological involvement on admission. The images showed single cystic lesion in the brain. They did not present involvement in other organs. Serology was negative in all cases. Medical and surgical treatment in all cases. The clinical outcome was favorable without sequelae in five of them and one had a residual paresis right faciobrachiocrural. This infection should be considered in the differential diagnosis of cystic tumor lesions of the central nervous system.

La hidatidosis es una infección parasitaria causada por Echinococcus granulosus. El ser humano es un hospedero intermediario accidental. La localización más frecuente es la hepática. El compromiso cerebral es inusual, se describe que hasta 75% ocurre en población pediátrica. Se presenta una serie de seis niños con hidatidosis cerebral internados en el Hospital de Pediatría J. P. Garrahan. Todos presentaron compromiso neurológico al ingreso. Las imágenes mostraron lesiones quísticas únicas en el cerebro. No tuvieron compromiso de otros órganos. La serología fue negativa en todos los casos. El tratamiento fue médico-quirúrgico. La evolución clínica fue favorable sin secuelas en cinco de ellos y uno presentó una hemiparesia faciobraquiocrural derecha como secuela. Esta infección debe considerarse entre los diagnósticos diferenciales de lesiones tumorales quísticas del sistema nervioso central.

Compromiso ocular en la enfermedad de Chagas congénita: Cases report / Ocular involvement in congenital Chagas disease

El compromiso ocular es una forma de presentación infrecuente en los niños con la enfermedad de Chagas congénita. Se presentan tres pacientes menores de dos meses de edad con compromiso ocular, todos ellos derivados al hospital para control oftalmológico por prematuridad. El diagnóstico oftalmológico fue de vitreítis bilateral intensa (uveítis posterior) asociada a enfermedad de Chagas. Se realizó tratamiento antiparasitario, con buena respuesta en los tres casos. Debe considerarse la enfermedad de Chagas como diagnóstico diferencial de una patología ocular en los lugares donde la enfermedad es endémica y solicitar una evaluación oftalmológica en los niños con diagnóstico de la enfermedad, en especial aquellos sintomáticos y con antecedente de prematuridad.

Ophthalmic compromise is infrequent in children with congenital Chagas disease. We present 3 patients under 2 months of age, with ocular involvement, all of them referred to the hospital for ophthalmic evaluation of the premature newborn. The ophthalmic finding was bilateral severe vitreitis (posterior uveitis) related to Chagas disease. They received antiparasitic therapy with a good outcome in all cases. Chagas disease must be considered as differential diagnosis of ocular pathology in those countries where the pathology is endemic, and fundoscopic evaluation must be done in those children with the diagnosis, especially those symptomatic and prematurely born.

Alergia al latex en un niño con mielomeningocele / Allergy to latex in a child with menningomyelocele

De acuerdo con los datos de la bibliografía Internacional los pacientes con mielomeningocele se deben considerar como de alto riesgo para desarrollar alergia al látex. En este trabajo describimos el primer caso de alergia al látex, mediada por IgE, en un niño en Argentina y comentamos los resultados preliminares obtenidos en la población con MMC del Hospital de Niños Ricardo Gutierrez

Angiodema hereditario (AEH): acción del danazol sobre el C4 y C1INH funcional

Sobre 51 pacientes diagnosticados con AEH, se tomaron cuatro pacientes que no hubieron tenido tratamiento androgénico anterior, lo que determino una población heterogénea. Se evaluó el C4, CH50, C1NH funcional y antigénico, CIC (complejos inmunes circulantes), el día uno o basal. Se indica 400 mg/día de Ladogal (Danazol) y se extrae muestra de sangre los días 4, 7, 10, 14, y se mide cada uno de los parámetros iniciales, para valorar los efectos de la droga sobre cada uno de ellos. Al día 14, desaparecen los CIC, se incrementa el C4 y CH50, mientras que el C1NH, antigénico y funcional no varía en forma significativa. Por ello, consideramos que el Ladogal, actúa incrementando el C4 y CH50, aclarando el plasma de CIC y/o enzimas activantes del C1 y Factor Hageman. Simultaneamente estimula la síntesis del C1NH, que no se pone en evidencia, hasta que no desaparezca la activación. Proponemos el esquema de 14 días de 400 mg/día de Ladogal, seguidos de cúatro días de descanso, en pacientes Tipo I y II de AEH