Cultura de embriöes até o estágio de blastocisto: comparaçäo entre o uso de meios seqüenciais e de co-cultura / Embryo culture to blastocyst stage: comparison using sequential medium and coculture

Objetivos: comparar o desenvolvimento embrionário entre o uso de dois métodos diferentes de cultura (meio seqüencial ou co-cultura em células Vero). Métodos: foram incluídas 110 pacientes que tiveram ovócitos aspirados e submetidos à fertilizaçäo in-vitro. Metade das pacientes teve seus embriöes cultivados juntamente com células Vero e a outra metade em meio seqüencial G1:2/G2:2. Os embriöes foram transferidos no dia 5 pós-fertilizaçäo, após avaliaçäo morfológica, verificando-se a taxa de blastulaçäo. A gravidez foi definida por meio de ultra-sonografia, verificando-se batimento cardíaco após a 13ª semana pós-transferência. Resultados: a taxa de blastocistos expandidos encontrada em nosso estudo foi de 15,9 por cento e 14 por cento com células Vero e G1:2/G2:2, respectivamente. Com células Vero 36,0 por cento das pacientes engravidaram com taxa de implantaçäo de 18,9 por cento. Quando se utilizou G1:2/G2:2 as taxas de gravidez e implantaçäo foram 28,9 por cento e 14,9, por cento, respectivamente. Em apenas 17 casos obtiveram-se blastocistos após co-cultivo em células Vero, apresentando 76,5 por cento de taxa de gravidez e 63,0 por cento de implantaçäo. Quando o cultivo foi em G1/G2 21 pacientes apresentaram blastocistos e as taxas de gravidez e implantaçäo foram de 57,1 e 76,0 por cento, respectivamente. Conclusäo: näo houve diferença significativa entre as taxas de gravidez ou implantaçäo nos 2 tipos de cultivo. Nos casos em que blastocistos expandidos foram transferidos, as taxas de implantaçäo e gravidez aumentaram com ambos os tipos de cultivo. Nestas pacientes, independente do tipo de cultivo utilizado, um número maior de ovócitos foi obtido, o que nos leva a pensar que näo apenas as condiçöes de cultura influenciam as taxas de implantaçäo e gravidez, mas a qualidade dos óvulos também é importante, pois as "boas respondedoras" tiveram melhores resultados.

Avaliaçäo do desenvolvimento de embriões bovinos pós-biópsia: um modelo para treinamento / Evaluation of the post-biopsy development of bovine embryos: proposal of a training model

Objetivo: montar um protocolo animal para estudo e treinamento em biópsia embrionária. Métodos: ovários de vaca obtidos em abatedouro eram transportados ao laboratório onde os oócitos aspirados eram maturados. Posteriormente eram submetidos à fertilizaçäo in vitro. No dia 5 pós fertitizaçäo, os embriões eram biopsiados, com a abertura da zona pelúcida realizada mediante lâmina de corte ajustada ao microscópio óptico. Após abertura da zona pelúcida 1 ou 2 blastômeros eram removidos dos embriões. Após a biópsia, os embriões permaneciam em co-cultivo por mais três dias. Ao final deste tempo, o desenvolvimento dos embriões era avaliado e comparado ao do grupo controle por meio de estudo morfológico e contagem do número de células, usando coloraçäo específica para núcleos. Resultados: dos 57 embriões biopsiados, 40 atingiram o estágio de blastocisto (70,2 por cento) e em 11 foi observado o "hatching" (27,5 por cento). No grupo controle obtiveram-se 42 blastocistos (73,7 por cento) e, destes, 11 chegaram a "hatching" (26,2 por cento). Após contagem do número de células, observou-se que näo houve diferença estatisticamente significante entre os 2 grupos. Conclusäo: podemos verificar por meio dos resultados que o protocolo proposto foi tecnicamente viável, além de fornecer bom número de embriões, pela facilidade de obtençäo de oócitos bovinos, podendo ser adotado para treinamento