Efecto de la temperatura de refrigeración y calentamiento de fórmulas lácteas Infantiles en el crecimiento de cronobacter sakazakii / Effect of temperature cooling and heating of powered infant formula on the growth of cronobacter sakazakii

Cronobacter sakazakii (C. sakazakii) es un microorganismo perteneciente a la familia Enterobacteriaceae asociado con patologías como meningitis y septicemia en recién nacidos. Las fórmulas lácteas infantiles (FLI) han sido reconocidas como el vehículo más importante de transmisión de C. sakazakii, por condiciones inadecuadas durante su producción o preparación. El objetivo de la presente investigación fue evaluar el efecto de la temperatura de refrigeración y el calentamiento de las FLI en el crecimiento de C. sakazakii. Las muestras de FLI reconstituidas se contaminaron con 102, 104 y 106 UFC/mL de C. sakazakii y se refrigeraron durante cuatro horas a 4°C, 6°C y 10°C, posterioriormente, se calentaron en baño hidrotérmico hasta 37°C. Las muestras fueron sembradas al tiempo “0” (postrefrigeración) y luego del calentamiento hasta 37°C en placas con agar cromogénico y se incubaron a 35°C por 24h. Para el análisis de los datos se utilizó la prueba de Wilcoxon. Según los datos obtenidos no hubo variación significativa en la población de C. sakazakii en las FLI luego de 4 horas en refrigeración a 4°C, 6°C y 10°C; sin embargo, al calentar las fórmulas hasta 37°C, hubo en todos los casos una reducción de un ciclo logarítmico en la población de C. sakazakii con un valor de p = 0.0056 y Z= 2.752. Se concluye que el calentamiento a 37°C post-refrigeracion de las muestras, disminuye la población de C. sakazakii en FLI (p<0,05)(AU)

Cronobacter sakazakii (C. sakazakii) is a microorganism belonging to the family Enterobacteriaceae associated with diseases such as meningitis and sepsis in newborns. The powdered infant formula (PIF) have been recognized as the most important vehicle of transmission of C. sakazakii, by inadequate conditions during production or during its preparation. The aim of this investigation was to assess the effect of the cooling temperature and the heating of PIF in the growth of C. sakazakii. For this, PIF reconstituted samples were contaminated with 102, 104 and 106 CFU / mL of C. sakazakii and refrigerated for four hours at 4 ° C, 6 ° C or 10 ° C after this hydrothermal bath heated to 37 ° C. Samples were cultured at time “0” (after- cooling) and then heating to 37 ° C in chromogenic agar plates and incubated at 35 ° C for 24h . For data analysis we used the Wilcoxon test. According to the data there was no significant variation in the population of C. sakazakii in PIF after 4 hours in the refrigerator at 4 ° C, 6°C and 10 ° C , however , by heating the formulas to 37 ° C , in all cases there was a reduction of one log cycle in population C. sakazakii with a value of p = 0.0056 and Z = 2.752 . We conclude that heating at 37°C post- cooling of the samples, decreases the population of C. sakazakii in FLI ( p < 0,05 )(AU)

Comparación de la técnica de Inmunoseparación Magnética y el Método Convencional para el aislamiento de Salmonella spp. en leche pasteurizada contaminada artificialmente / Comparison of Magnetic Immunoseparation technique and the conventional method for isolation of Salmonella spp. from artificially contaminated pasteurized milk

La leche pasteurizada es un excelente sustrato para Salmonella por lo que requiere un minucioso control de calidad que garantice la inocuidad para su consumo. El objetivo de la presente investigación fue comparar las técnicas de Inmunoseparación Magnética (ISM) y el Método Convencional (MC) para la detección de Salmonella spp. en leche pasteurizada contaminada artificialmente. Se trabajó con seis grupos de muestras de leche pasteurizada inoculadas con 50 cel/mL de Salmonella spp. más1x 10³ cel/mL de un “coctel” de Enterobacterias (Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Shigella boydii y Enterobacter cloacae). Se evaluó el crecimiento de Salmonella mediante el MC (COVENIN 1291-2004) e ISM, utilizando diferentes protocolos de esta última, variando el factor de dilución de la muestra (sin dilución y 10³) y el número de lavados (3 y 5). Resultados: Se logró recuperar Salmonella spp. mediante ISM a partir del caldo de enriquecimiento selectivo y pre-enriquecimiento del MC. La ISM redujo a tres días el tiempo de obtención de resultados con respecto al MC. Aplicando ISM directamente en leche pasteurizada inoculada, no se logró recuperación bacteriana. Se demostró que el factor dilución de la muestra no influyó en los resultados de la ISM, mientras que el número de lavados durante la técnica sí fue determinante. El MC logró recuperar Salmonella spp en 100% (n=30) de las muestras. Conclusión: La aplicación de la ISM para el aislamiento de Salmonella spp. en muestras de leche pasteurizada reduce significativamente el tiempo de obtención de resultados con respecto al MC.

Pasteurized milk is an excellent substrate for Salmonella and therefore requires a thorough quality control to ensure its safety for human consumption. The aim of this study was to compare the techniques of Magnetic Immunoseparation (MIS) and the conventional method (CM) for the detection of Salmonella spp. in artificially contaminated pasteurized milk. Six groups of pasteurized milk samples were artificially contaminated with 50 cells/mL of Salmonella spp. plus 1 x 10³ cells/mL of a "cocktail" of Enterobacteriaceae (Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Shigella boydii and Enterobacter cloacae). Salmonella growth by MC (COVENIN 1291-2004) and MIS was evaluated using different protocols of the latter, varying the dilution factor (without dilution and 10³) and the number of washes (3 and 5). Results: We succeeded in recovering Salmonella spp. by MIS from selective enrichment broth and pre-enrichment of CM. The MIS reduced the time for obtaining results down to three days with respect to CM. Bacterial recovery was not achieved by applying MIS directly into inoculated pasteurized milk. It was shown that the sample dilution factor did not influence MIS results, while the number of washings during the procedure greatly influenced them. The CM was able to recover Salmonella spp. in 100% (n=30) of the samples. Conclusion: The application of the MIS for the isolation of Salmonella spp. in samples of pasteurized milk significantly reduces the time for obtaining results with respect to CM.