Hemolytic, anticancer and antigiardial activity of Palythoa caribaeorum venom

Cnidarian venoms and extracts have shown a broad variety of biological activities including cytotoxic, antibacterial and antitumoral effects. Most of these studied extracts were obtained from sea anemones or jellyfish. The present study aimed to determine the toxic activity and assess the antitumor and antiparasitic potential of Palythoa caribaeorum venom by evaluating its in vitro toxicity on several models including human tumor cell lines and against the parasite Giardia intestinalis. Methods: The presence of cytolysins and vasoconstrictor activity of P. caribaeorum venom were determined by hemolysis, PLA2 and isolated rat aortic ring assays, respectively. The cytotoxic effect was tested on HCT-15 (human colorectal adenocarcinoma), MCF-7 (human mammary adenocarcinoma), K562 (human chronic myelogenous leukemia), U251 (human glyoblastoma), PC-3 (human prostatic adenocarcinoma) and SKLU-1 (human lung adenocarcinoma). An in vivo toxicity assay was performed with crickets and the antiparasitic assay was performed against G. intestinalis at 24 h of incubation. Results: P. caribaeorum venom produced hemolytic and PLA2 activity and showed specific cytotoxicity against U251 and SKLU-1 cell lines, with approximately 50% growing inhibition. The venom was toxic to insects and showed activity against G. intestinalis in a dose-dependent manner by possibly altering its membrane osmotic equilibrium. Conclusion: These results suggest that P. caribaeorum venom contains compounds with potential therapeutic value against microorganisms and cancer.(AU)

Hemolytic, anticancer and antigiardial activity of Palythoa caribaeorum venom

Background Cnidarian venoms and extracts have shown a broad variety of biological activities including cytotoxic, antibacterial and antitumoral effects. Most of these studied extracts were obtained from sea anemones or jellyfish. The present study aimed to determine the toxic activity and assess the antitumor and antiparasitic potential of Palythoa caribaeorum venom by evaluating its in vitro toxicity on several models including human tumor cell lines and against the parasite Giardia intestinalis. Methods The presence of cytolysins and vasoconstrictor activity of P. caribaeorum venom were determined by hemolysis, PLA2 and isolated rat aortic ring assays, respectively. The cytotoxic effect was tested on HCT-15 (human colorectal adenocarcinoma), MCF-7 (human mammary adenocarcinoma), K562 (human chronic myelogenous leukemia), U251 (human glyoblastoma), PC-3 (human prostatic adenocarcinoma) and SKLU-1 (human lung adenocarcinoma). An in vivo toxicity assay was performed with crickets and the antiparasitic assay was performed against G. intestinalis at 24 h of incubation. Results P. caribaeorum venom produced hemolytic and PLA2 activity and showed specific cytotoxicity against U251 and SKLU-1 cell lines, with approximately 50% growing inhibition. The venom was toxic to insects and showed activity against G. intestinalis in a dose-dependent manner by possibly altering its membrane osmotic equilibrium. Conclusion These results suggest that P. caribaeorum venom contains compounds with potential therapeutic value against microorganisms and cancer.

Prevalencia de Giardia intestinalis y predominio de genotipos zoonóticos en ovinos y bovinos de traspatio de cinco estados de la República Mexicana / Prevalence of Giardia intestinalis and zoonotic genotype predominance in small scale sheep and cattle farms in five states of the Mexican Republic

The aim of this paper was to discover the prevalence and assemblages of Giardia intestinalis, harbored in sheep and cows on familiar farms from five states of the Mexican Republic. Stool samples from 265 sheep and 174 cows were analyzed by centrifugation and flotation in zinc sulfate to search for cysts and ova. The samples with Giardia cysts were processed in a Sheather solution in order to isolate them. Afterwards, cultures were established in TYI-S-33, each one of which was the Giardia DNA source. The DNA was obtained and used as a template to amplify a fragment of the glutamate dehydrogenase (gdh) enzyme. The 430 bp amplicons were restricted with Nla IV and Rsa I in order to identify the restriction fragments length polymorphisms (RFLP's) patterns. From the cyst analysis, Giardia cysts in nine cows (5.1%) and 30 sheep (11.3%) were found. Then 10 axenic cultures (5 from sheep and 5 from cows) were set up. From the RFLP's pattern it was found that one cow had assemblage (AI), another two had a mixture of assemblages (AI + BIII) and the other two had (E + BIII). In sheep, it was found that two sheep had assemblage (AI) and the other three had a mixture of assemblages (AI + BIII). This is the first report in which zoonotic assemblages (A-I and BIII) predominance in ruminants from five states of Mexico have been demonstrated. Therefore, it is necessary to carry out further studies aimed at discovering other Giardia genotypes and transmission patterns between animals and humans in Mexico.

Con el fin de determinar la frecuencia y genotipos de Giardia intestinalis en ovinos y bovinos de traspatio de algunos estados de la República Mexicana, en este trabajo se colectaron heces de 265 ovinos y 174 bovinos, para la búsqueda de Giardia mediante coproparasitoscópicos (CPS) de concentración flotación. De las muestras fecales que resultaron positivas se obtuvieron los quistes por el método de Sheather. Los quistes se desenquistaron in vitro y los trofozoítos se mantuvieron en cultivo TYI-S-33 axénico. El ADN de los trofozoítos se obtuvo mediante extracciones fenólicas y se amplificó un segmento de ≈ 430 pb del gen de la enzima glutamato deshidrogenasa (gdh) por medio de la reacción en cadena de la ADN polimerasa (PCR), el producto se restringió con las enzimas Nla IV y Rsa I y se obtuvieron los polimorfismos de los fragmentos de restricción (RFLP). En los CPS se encontró a Giardia en nueve bovinos (5.1%) y 30 ovinos (11.3%). Se establecieron 10 cultivos axénicos (5 de bovinos y 5 de ovinos). En un bovino se encontró el genotipo (AI), dos tuvieron mezcla de los genotipos (AI + BIII) y los otros dos fueron (E + BIII). Un ovino fue genotipo (AI) y tres tuvieron mezcla de los genotipos (AI + BIII). Éste es el primer informe que presenta predominio de genotipos zoonóticos (AI y BIII) en ovinos y bovinos de México. Es necesario investigar los genotipos de Giardia y patrones de transmisión entre animales y humanos en México.

Determinación in vitro de la susceptibilidad a la nitazoxanida de cuatro aislados de Giardia duodenalis obtenido de diferentes huéspedes / In vitro determination of the sensitivity to nitazoxanide of four isolates of Giardia duodenalis from different hosts

Antecedentes: En México la giardiosis es la protozoosis intestinal más frecuente en los niños, para el tratamiento se utilizan los nitrofuranos, nitroimidazoles y benzimidazoles. Recientemente se introdujo un antiparasitario polivalente: la Nitazoxanida (Ntz); del cual hay pocos estudios sobre su actividad antigiardiásica. Objetivo: Determinar in vitro la sensibilidad de G. duodenalis a la Nitazoxanida y compararla con el Tinidazol (Tnz). Material y métodos: La susceptibilidad se estudió en cuatro aislados axénicos de G. duodenalis: INP231087MM y INP210897-AXA1 (humanos), INP170693HG8 y INP300693-CP5 (gato y perro respectivamente). Se expusieron 500,000 trofozoítos a diferentes concentraciones de Ntz o Tnz. La viabilidad se determinó por el método colorimétrico de la reducción de sales de tetrazolio (MTT) a MTT-formazán y los resultados se analizaron por ANOVA. Los cambios estructurales se determinaron por microscopia electrónica de transmisión. Los experimentos se realizaron por triplicado y se repitieron cuatro veces en un diseño experimental ciego.Resultados: Para alcanzar el 100 por ciento de mortalidad (sensibilidad o susceptibilidad) se necesitó una concentración de 1 a 7 mg/mL de Ntz y de 1 a 4 mg/mL de Tnz. Cuando se comparó la susceptibilidad de los aislados a la Ntz se encontró que hubo diferencias significativas entre ellos (P<0.001). Los fármacos produjeron aumento de volumen y menor electrodensidad del citoplasma y núcleos. Conclusiones: Este es el primer reporte de la sensibilidad, in vitro, de G. duodenalis a Ntz, en aislados de diferentes huéspedes. Se observó mayor susceptibilidad al Tnz que a la Ntz. Debido a la deformación de los trofozoítos, se sugiere que la Ntz induce modificaciones en la membrana y lisis celular.

Búsqueda de Cyclospora cayetanensis en los familiares de dos niños con cyclosporidiosis / Search of Cyclospora cayetanensis in two families of patients with cyclosporidiosis

Introducción. En México si ignora la frecuencia de Cyclospora cayetanensis; como se trata de un parásito recientemente descrito, quizá pasa inadvertido y por lo tanto no se diagnóstica. Objetivo. Buscar C. cayetanensis en las familias de 2 pacientes con cyclosporidiosis. Material y métodos. Las muestras fecales de los familiares de los pacientes infectados con C. cayetanensis se colectaron por triplicado y se procesaron mediante las técnicas de: concentración-flotación con sulfato de zinc, directo en fresco y con la tinción de Ziehl-Neelsen. Resultados. En la familia del primer paciente, constituida por 7 adultos y 12 infantes, no se encontró Cyclospora. La familia del segundo paciente estuvo integrada por 4 personas, econtrándose sólo en el hermano C. cayetanensis. Conclusión. Los pacientes que dieron origen al estudio presentaron síntomas; sin embargo, el hallazgo de otro niño infectado con C. cayetanensis pero sin manifestaciones clínicas, pone de manifiesto la necesidad de estudiar a todos aquellos sujetos que permanecen asintomáticos

Cyclospora en dos niños mexicanos / Two cases of cyclospora in children

Se informa el hallazgo de dos pacientes -uno sintomático y otro asintomático- infectados por Cyclospora, un enteropatógeno de reciente aparición. La sintomatología involucró: dolor abdominal, hiporexia, vómito, bruxismo y 3 ó 4 evacuaciones diarreicas que se autolimitaron después de 24 a 72 horas. En ambos casos se identificaron ooquistes no esporulados cuyo diámetro fue de 8.44 ñ 0.146 µm; el método coproparasitoscópico de flotación de Faust permitió detectar al parásito; la confirmación diagnóstica se logró con la tinción de Ziehl-Neelsen y por la esporulación (dos esporoblastos por ooquiste). En México Cyclospora probablemente pasa inadvertida en los laboratorios de parasitología o quizás se reporta como ooquiste de Cryptosporidium