Potencial antioxidante de un extracto acuoso de hojas del NIM (Azadirachta Indica A. Juss) / Antioxidant potential of an aqueous leaf extract of Neem (Azadirachta Indica A. Juss)

INTRODUCCIÓN: la planta medicinal Azadirachta indica A. Juss conocida ancestralmente como el Árbol del Nim ha sido empleada desde la antigüedad para el tratamiento de múltiples afecciones, sin embargo, es en la actualidad con el desarrollo tecnológico que se han realizado las investigaciones científicas de sus propiedades terapéuticas. OBJETIVO: evaluar el potencial antioxidante de los extractos acuosos de hojas del Árbol del Nim. MÉTODOS: el extracto de las hojas secas del Nim se obtuvo empleando un equipo Soxhlet y fue caracterizado mediante un análisis fitoquímico preliminar y espectroscopia UV/VIS. El contenido de fenoles totales fue determinado por el ensayo de Folin-Ciocalteu y la determinación de la actividad antioxidante fue desarrollada por el método del reactivo de fosfomolibdeno. RESULTADOS: el espectro UV/VIS del extracto acuoso obtenido exhibe un máximo de absorción a las longitudes de onda 217 y 245 nm, característicos de los principios activos de la planta (azadiractina y nimbina). El contenido de fenoles del extracto de la planta expresados en equivalentes de ácido tánico fue de 54,87 mg/g y mostró una actividad antioxidante a través del ensayo del fosfomolibdeno (215,01 mmol/g), comparable al ácido ascórbico. CONCLUSIONES: los resultados obtenidos demuestran que las hojas Árbol del Nim son una fuente rica en compuestos fenólicos con propiedades antioxidantes y un candidato potencial para el desarrollo de nuevos fitofármacos.

INTRODUCTION: the medicinal plant Azadirachta indica A. Juss, traditionally known as neem tree, has been used since ancient times to treat numerous conditions. However, it is only at present and thanks to current technological development that scientific research has been conducted into its therapeutic properties. OBJECTIVE: evaluate the antioxidant potential of aqueous leaf extracts of the neem tree. METHODS: extract from neem dry leaves was obtained with a Soxhlet device and characterized by preliminary phytochemical analysis and UV/VIS spectroscopy. Total phenol content was determined by the Folin-Ciocalteu assay, and antioxidant activity by the phosphomolybdenum method. RESULTS: the UV/VIS spectrum of the aqueous extract exhibited an absorption peak at wavelengths of 217 and 245 nm, characteristic of the active principles in the plant (azadirachtin and nimbin). Phenol content expressed as tannic acid equivalents was 54.87 mg/g, revealing an antioxidant activity in the phosphomolybdenum assay of 215.01 mol/g, comparable to that of ascorbic acid. CONCLUSIONS: the results obtained show that neem leaves are a rich source of phenolic compounds with antioxidant properties, and a potential candidate for the development of new phytomedicines.

Abstinencia espontánea en ratones tratados con Mimosa pudica / Spontaneous abstinence in mice treated with Mimosa pudica

La planta Mimosa pudica (moriviví, como comúnmente se le conoce), ha sido empleada tradicionalmente como anestésico, antidepresivo, sedante, antialopécico, entre otras propiedades farmacológicas; sin embargo, en los últimos años su consumo se ha convertido en excesivo. Con el objetivo de conocer el potencial adictivo de esta planta se desarrolló un ensayo de abstinencia espontánea en ratones de la línea NMRI, llevado a cabo durante 20 días, para lo cual se administró una dosis de 1 000 mg/kg de peso de la decocción de la planta 2 veces al día, por vía oral. Como control negativo y positivo se emplearon agua y morfina (32 mg/kg de peso por vía intraperitoneal, respectivamente). Finalmente se comprobó que dicha decocción mostró signos de dependencia física y los animales en estudio manifestaron disminución del peso corporal y aumento de la temperatura rectal con respecto al control negativo, una vez suspendida la administración. Por su parte, estos signos fueron más significativos en el control positivo, de manera que se puede plantear que la decocción de la planta Mimosa pudica a la dosis empleada evidenció signos de dependencia física.

The plant Mimosa pudica (moriviví, as it is commonly known), has been traditionally used as anesthetic, antidepressant, sedative, antialopecic, among other pharmacological properties; however, in the last years its use has become excessive. With the objective of knowing the addictive potential of this plant a trial of spontaneous abstinence was developed in mice of the strain NMRI, carried out during 20 days, for which a dose of 1 000 mg/kg of weight of the decoction of the plant was administered orally twice at day. As negative and positive control water and morphine were used (32 mg/kg of weight intraperitoneally, in both cases). Finally, it was shown that this decoction showed signs of physical dependence and the animals in study showed a decrease of the body weight and an increase of the rectal temperature with regard to the negative control, once the decoction was discontinued. On the other hand, these signs were more significant in the positive control, so that it can be stated that the decoction of the plant Mimosa pudica evidenced signs of physical dependence with the used dose.

Toxicidad aguda oral de Azadirachta indica (árbol del Nim) / Acute oral toxicity of Azadirachta indica (Neem Tree)

Introducción: el árbol de Nim, cuyo nombre científico es Azadirachta indica, es una planta medicinal empleada por sus propiedades antisépticas, antivirales, antipiréticas, antimicrobianas, antiinflamatorias, entre otras. No se reportan estudios de toxicidad aguda oral, solo aparecen reportados de toxicidad a largo plazo. Objetivos: evaluar la toxicidad aguda oral por el método de las clases de la decocción de hojas y tallos de la planta Azadirachta indica, por vía oral en ratas Sprague Dawley. Métodos: se realizó un ensayo de toxicidad aguda oral por el método de las clases. La administración se hizo por vía oral, a una dosis única de 2 000 mg/kg de peso corporal de una decocción de la planta Azadirachta indica. Se efectuaron los estudios correspondientes de anatomía patológica, que evidenciaran toxicidad de la sustancia ensayada.Resultados: la sustancia en estudio no produjo signos clínicos que demostraran toxicidad, ni alteraciones en el peso corporal en el biomodelo animal empleado, ni muerte de ningún animal; macroscópicamente no se comprobaron alteraciones de valor diagnóstico. Conclusiones: el estudio demostró que la sustancia evaluada por vía oral, a dosis única, se enmarca como sin clasificar, en el modelo animal y nivel de dosis utilizado bajo las condiciones experimentales empleadas

Introduction: Neem tree, whose scientific name is Azadirachta indica, is a medicinal plant used by its antiseptic, antiviral, antipyretic, antimicrobial, and anti-inflammatory properties, among others. No acute toxicity studies are reported on this plant, just long-term toxicity studies. Objectives: to evaluate the acute oral toxicity by the class method using decoction of Azadirachta indica leaves and stems orally administered to Sprague Dawley rats. Methods: an acute oral toxicity test based on the class method was conducted. The Azadirachta indica plant decoction was administered in one dose of 2 000 mg/kg of body weight. Pathological anatomy studies were performed to analyze the toxicity in the tested substance. Results: the evaluated substance did not show any clinical signs of toxicity or animal deaths; no alterations in the body weight of the experimental models were found. There were no alterations of diagnostic value according to the macroscopic analysis. Conclusions: the tested decoction, orally administered at one dose, is regarded as unclassified for the animal model and the dosage used under the observed experimental conditions

Toxicidad aguda oral e irritabilidad de la mucosa oral con una formulación de tabletas de Tamarindus indica L / Acute oral toxicity and irritability of the oral mucosa with a tablet formulation of Tamarindus indica L

In this study, the possible preclinical toxic effects of the Tamarindus indica L tablets were evaluated by the acute oral toxicity (AOT) and oral mucosa irritation (OMI), adapting guideline OECD 423 and ISO 10993-10, respectively. The AOT was evaluated, using the Class Toxocity Method in Sprague Dawley females rats and the OMI was assessed in sirian hamsters, according to the acute exposure method. Any sign of toxicity were not observed in the study. No animal death was occurring and the body weight increase in the two experimental groups was not statistically different. Slight irritation of the oral mucosa of the animals was observed, but this fact didn't impede them to feed appropriately and they body weight increase normally during the assay. Tamarind tablets were framed as non toxic substance and they produce a “light irritability” of the oral mucosa.

En este trabajo se evaluó a nivel preclínico, los posibles efectos tóxicos de las tabletas de Tamarindus indica L. Se ensayó la toxicidad aguda oral, por el método de las clases de toxicidad, en ratas hembras de la línea Sprague Dawley y la irritabilidad de la mucosa oral en Hamster sirio, según las normas OECD 423 y ISO 10993-10, respectivamente. Durante el estudio de toxicidad aguda, no se observaron signos de toxicidad, ni muerte. El peso corporal en ambos grupos experimentales aumentó y no fue diferente estadísticamente. En el estudio de irritabilidad, se observó una ligera irritación en la mucosa de los biomodelos. Esto no les impidió alimentarse adecuadamente y se observó un incremento del peso corporal de ambos grupos experimentales. Se determinó que las tabletas producen una irritabilidad “leve” de la mucosa oral y no clasifican como tóxicas según las normas internacionales de referencia.

Efecto del adyuvante vacunal AFCo1 intranasal sobre la concentración plasmática de teofilina en ratas / Effect of intranasal vaccine adjuvant AFCo1 on plasma concentration of theophylline in rats

En este estudio se evaluó el efecto del adyuvante Finlay cocleato 1 (AFCo1), aplicado 4 veces por vía intranasal en 2 niveles de dosis (50 µg y 100 µg) sobre la concentración plasmática de teofilina, administrada a las 24 horas de la última aplicación (5 mg/kg, por vía intraperitoneal) en ratas Sprague-Dawley. Se empleó como control positivo de inflamación la aplicación de 2 dosis por vía subcutánea de adyuvante completo de Freund (ACF). Las ratas que recibieron AFCo1 no mostraron cambios significativos en la concentración sérica de teofilina; mientras que las tratadas con ACF desarrollaron inflamación local asociadas a signos de toxicidad a la teofilina y elevación de las cifras de inmunoglobulina G específica, de las concentraciones plasmáticas y el tiempo de vida media de teofilina en suero, en comparación con los grupos restantes. Estos resultados indican que la inmunoestimulación inducida por AFCo1 intranasal no incrementa los parámetros farmacocinéticos ni la toxicidad de la teofilina en el modelo empleado.

The effect of the adjuvant Finlay cochleate1 (AFCo1), applied intranasally 4 times in 2 dose levels (50 µg and 100 µg) on plasma concentration of theophylline administered 24 hours after the last application (5 mg/kg intraperitoneally) in Sprague-Dawley rats was evaluated in this study. Application subcutaneously of 2 doses of Freund's complete adjuvant (FCA) was used as positive control of inflammation. Rats receiving AFCo1 had no significant changes in serum theophylline concentration, while those treated with FCA developed local inflammation associated with signs of theophylline toxicity and increased specific G immunoglobulin, plasma concentrations and serum theophylline half-life as compared with the remaining groups. These results show that intranasal AFCo1-induced immunostimulation does not increase pharmacokinetic parameters and theophylline toxicity in the model used.

Aspergillus sp. y aflatoxinas en plantas medicinales y té comercial / Aspergillus sp. and aflatoxins in medicinal plants and commercial tea

The objective of this work is to determine the incidence of Aspergillus sp. (aflatoxins’s typesetters) fungus species in medicinal plants and bags for infusions, as well as to evaluate the relationship between the appearance of these fungi and their toxins in such substrata. A sample of 24 medicinal plants and 20 small bags of infusion used by the Cuban population were processed in order to determine the incidence of Aspergillus sp. (aflatoxins’s typesetters) fungus species, as well as aflatoxins's production. A microbiological test by means of Agar Malta for culture, and aflatoxins's determination by means of high precision thin layer chromatography were made. Out of the sample studied, Aspergillus ustus, A. flavus and A. parasiticus appeared in 48 percent, but the concentration of aflatoxins B1 detected did not exceed the maximum values of 10 parts per billion (ppb), already established worldwide. Taking into account the increasing use of medicinal plants and the results stated in this work, new regulations for the sake of controlling the appearance of these fungi and their toxins are required, although it becomes necessary to validate fast and specific analytical methods.

El objetivo de este trabajo es determinar la incidencia de especies de hongos del genero Aspergillus sp. (formadores de aflatoxinas) en plantas medicinales y bolsas para infusiones, así como evaluar la relación entre la aparición de estos hongos y sus toxinas en dichos sustratos. Se procesaron 24 muestras de plantas medicinales y 20 bolsitas de infusión utilizadas por la población cubana, para determinar la incidencia de especies de hongos del genero Aspergillus sp. así como la producción de aflatoxinas. Se realizó análisis microbiológico utilizando Agar- Malta como medio de cultivo, y se realizó la determinación de aflatoxinas por cromatografía de capa delgada de alta precisión. De las muestras estudiadas, aparecieron Aspergillus ustus, A. flavus, A. parasiticus en el 48 por ciento, pero la concentración de aflatoxina B1 detectada no excedió los valores máximos establecidos internacionalmente de 10 ppb. Teniendo en cuenta el creciente uso de las plantas medicinales y los resultados expuestos en este trabajo, se hace necesario establecer nuevas regulaciones en aras de controlar la aparición de estos hongos y sus toxinas en las mismas, aunque para ello se hace necesario validar métodos analíticos rápidos y específicos.

Toxicidad aguda oral de Solanum torvum Sw (prendejera) / Acute oral toxicity of Solanum torvum Sw (prendejera)

Introducción: Solanum torvum Sw, conocida popularmente como prendejera, es una planta medicinal empleada por la población como antimicrobiano, antiartrítico, entre otras propiedades. Esta planta no reporta estudios de toxicidad de tipo agudo, solo aparecen reportados estudios de toxicidad a largo plazo. Objetivos: evaluar la toxicidad aguda oral por el método de las clases de la decocción de hojas y tallos Solanum torvum por vía oral en ratas Sprague Dawley. Métodos: se realizó un ensayo de toxicidad aguda oral por el método de las clases. La administración se hizo por vía oral a una dosis única de 2 000 mg/kg de peso corporal de una decocción de la planta S torvum. Se efectuaron los estudios correspondientes de anatomía patológica, que evidenciaran toxicidad de la sustancia ensayada. Resultados: la sustancia evaluada no produjo signos clínicos que demostraran toxicidad, ni muerte animal, no se reportaron alteraciones en el peso corporal de los biomodelos; macroscópicamente no se comprobaron alteraciones de valor diagnóstico. Conclusiones: la sustancia ensayada por vía oral, a dosis única, se enmarca como sin clasificar, en el modelo animal y nivel de dosis utilizado bajo las condiciones experimentales observadas

Introduction: Solanum torvum Sw, traditionally known as prendejera, is a medicinal plant used by the population as antimicrobial and anti-inflammatory agent among other properties. No acute toxicity studies are reported on this plant, just long-term toxicity studies. Objectives: to evaluate the acute oral toxicity by the class method using decoction of Solanum torvum leaves and stems orally administered to Sprague Dawley rats. Methods: an acute oral toxicity test based on the class method was conducted. The S torvum plant decoction was administered in one dose of 2000 mg/kg of body weight. Pathological anatomy studies were performed to analyze the toxicity in the tested substance. Results: the evaluated substance did not show any clinical signs of toxicity or animal deaths; no alterations in the body weight of the experimental models were found. There were no alterations of diagnostic value according to the macroscopic analysis. Conclusions: the tested decoction, orally administered at one dose, is regarded as unclassified for the animal model and the dosage used under the observed experimental conditions

Efecto protector de Petiveria alliacea L. (Anamú) sobre la inmunosupresión inducida por 5-fluoruracilo en ratones Balb/c / Protecting effect of Petiveria Alliacea (Anamu) on the immunosuppression induced by 5-fluoruracil in Balb/c mice

A preclinical study was carried out to determinate the protective properties of Petiveria alliacea Linn on 5-Fluoruracilo (5-FU)-immunosuppressed animals, a cytostatic drug often used in cancer treatment. Were use five groups of female Balb/c mice (5 mice/group).Two groups were treated with 400 and 1200 mg/kg of P. alliacea leaves and stems powder respectively, and a third group was treated with carboxymethyl cellulose as vehicle. Two additional control groups were set up: a 5-FU treated group, as immunosuppression control, and a NaCl solution (0.9 percent treated group. Animals were treated daily for five days and then a unique dose of 150 mg/kg of 5-FU was administered and the treatment continued for another four days. At termination blood and tissue samples were collected for leukocyte total count, analysis of bone marrow cellularity, thymus weight and total IgG antibody forming cells. Our results show that the group treated with the highest dose of P. alliacea, was less affected by 5-FU-induced immunosupresion compared with the other treated groups. The results derived from this study suggest that P. alliacea, a medicinal plant product, could be used in patients under antineoplasic regimens to avoid the deleterious adverse effects of the immunosuppressive drugs.

Se realizó un estudio preclínico para la determinación de las propiedades protectoras de la planta Petiveria alliacea Linn sobre la inmunosupresión inducida por la droga citostática 5- Fluoruracilo (5-FU), la cual se utiliza muy frecuentemente en la terapia contra el cáncer. Se utilizaron cinco grupos de ratones hembras Balb/c (5 ratones por grupo) que incluyeron dos grupos de tratamiento con dos niveles de dosis del polvo de las hojas y tallos de la planta: 400 y 1200 mg/kg, así como grupos controles con solución de NACl y con el vehículo (solución de carboximetil celulosa) por vía oral, aplicados durante 5 días, luego una administración única de 150 mg/kg de 5-FU y la continuación del tratamiento en los restantes 5 días. En las variables: conteo global y diferencial de leucocitos, celularidad de la médula ósea, peso del timo y Células Formadoras de Anticuerpos (CFA) IgG totales, se pudo observar que el grupo de mayor dosis de P. alliacea tuvo una menor afectación por la inmunosupresión inducida por 5-FU, en comparación con el resto de los grupos tratados. Estos resultados apoyan el uso de formulaciones de esta planta en pacientes que reciben tratamientos antineoplásicos para la protección contra la inmunosupresión.

Toxicidad a dosis repetida de la decocción de Solanum torvum Sw (prendejera) en ratas / Toxicity by repeated doses of Solanum torvum Sw. decoction (prendejera) in rats

INTRODUCCIÓN: Solanum torvum Sw, comúnmente conocida en la zona oriental de Cuba como prendejera, pertenece a la familia Solanaceae y es muy empleada por sus propiedades medicinales tradicionales como antimicrobianas, antiartríticas y antiinflamatorias. OBJETIVOS: evaluar la toxicidad a dosis repetidas por 28 d de la decocción de hojas y tallos S torvum por vía oral en ratas. MÉTODOS: se realizó un ensayo de toxicidad a dosis repetida por el método de test límite por espacio de 28 d a una decocción de la planta S torvum a una dosis de 1 000 mg/kg, administrada por vía oral, de ratas Sprague Dawley. Se efectuaron exámenes de hematología, bioquímica sanguínea y análisis anatomopatológico e histopatológico correspondiente. RESULTADOS: no se observaron signos de toxicidad en los animales. No se reportaron afectaciones en el peso corporal. Los resultados del análisis histopatológico arrojaron ausencia de daños orgánicos ocasionados por la decocción evaluada y corroboraron los resultados antes expuestos. CONCLUSIONES: en las condiciones del ensayo, la decocción de hojas y tallos de S torvum no reportó reacciones tóxicas imputables a la sustancia ensayada

INTRODUCTION: Solanum torvum Sw, commonly known in Cuban eastern zone as prendejera, belongs to Solanaceae family and is very used due to its traditional medicinal properties as antimicrobial, antiarthritic and anti-inflammatory. OBJECTIVE: to assess the toxicity level by repeated doses for 28 days of leaves and stems decoction of S torvum by oral route in rats. METHODS: a toxicity trial was made in repeated doses by limit test method for 28 days in a decoction of S torvum in a 1 000 mg/kg dose, administered by oral route to Sprague Dawley rats. Hematology, blood Biochemistry examinations and anatomical and pathological and histopathological corresponding analyses were made. RESULTS: there were not toxicity signs in animals and no affectations in body weight. The results of histopathological analysis demonstrated the lack of organic damages provoked by the assessed decoction and corroborated the above results. CONCLUSIONS: in trial conditions, the decoction of leaves and stems of S. torvum there were not toxic reactions attributable to essayed substance

Evaluación de la toxicidad aguda oral e irritación sobre mucosa bucal de la solución CM-95 tratada magnéticamente / Oral acute toxicity and irritation on buccal mucosa evaluation of the CM-95 solution magnetically treated

La Solución CM-95 tratada magnéticamente es un producto en desarrollo que mostró propiedades inmunoestimulantes en ensayos preclínicos, característica que la hacen adecuada como candidata a inmunopotenciador. En este trabajo se evaluaron los posibles efectos tóxicos preclínicos de la Solución CM-95 tratada magnéticamente, por el método de las Clases de Toxicidad Aguda y el de irritación de la mucosa oral, adaptando las normas OECD 423 y la ISO 10993-10, respectivamente. En el método de las Clases de Toxicidad Aguda se utilizó el ensayo límite, en ratas Sprague Dawley hembras, en el cual la dosis estuvo relacionada con el nivel de inducción magnética, en este caso 0,16 T, aplicado a la Solución CM-95; y el volumen a administrar de la misma, calculado sobre la base de 2 ml de la solución por 100 g de peso corporal. La determinación de la irritación de la mucosa oral se llevó a cabo en hámster Sirios Dorados hembras mediante un ensayo a dosis repetidas durante7 días de tratamiento en la bolsa gular derecha, con pellet de algodón impregnado con 0,5 ml de la solución tratada magnéticamente con la misma inducción. No se encontró mortalidad ni evidencias de signos tóxicos para el ensayo de toxicidad aguda, y se obtuvo un índice de irritación sobre mucosa oral de 0, por lo que la sustancia estudiada se enmarcó como “No clasificada”y “No irritante” según la metodología empleada. Estos resultados complementarán otros estudios toxicológicos para avalar la seguridad de esta Solución para su uso futuro como fármaco por vía oral.

CM-95 solution magnetically treated is a product which showed immunologic properties in preliminary tests, characteristic that makes it adequate as inmunopotentiator candidate. In this study the possible preclinical toxic effects of CM-95 Solution magnetically treated were evaluated, by the Acute Toxicity Class method and oral mucosa irritation test, adapting guideline OECD423 and ISO 10993-10. In Acute Toxicity Class method was used the Limit Test, in Sprague Dawley females rats, where the dose was related to the magnetic induction level, in this case 0.16 T, applied to CM-95 Solution; and the administration volume of aqueous solution was calculated on base 2 ml per 100 g body weight. Determination of oral mucosa irritation was carried out in female golden Syrian hamsters by means of a repeated doses test during 7 days of treatment in right gular bag, with a cotton pellet impregnated with 0.5 ml of CM-95 Solution magnetically treated with the same induction. Neither mortality nor evidences of toxic signs were observed for the test of acute toxicity, and an irritation index of 0 was obtained on oral mucosa irritation test, reason why the studied substance was framed as “not classified” and “non irritating” according to the applied methodology. These results will complement other toxicological studies to guarantee the safety of this Solution for its future use as a drug by oral route.