Pancreatic islet isolation by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and dextran discontinuous density gradient purification: experimental study in dogs

The prospects for allotransplantation of pancreatic islets in man depend on the development of methods that provide sufficient quantities of pancreatic islets from a single donor, which are capable, when transplanted, of achieve the normalization of carbohydrate metabolism. Objective: Evaluate the efficacy of the isolation of Langerhans islets from dogs, by means of mechanical-enzymatic separation technique with stationary digestion using collagenase, and purification with a discontinuous dextran density gradient. Methods: The counting of islet numbers and evaluation of their sizes was accomplished by staining with diphenylthiocarbazone and using stereoscopic microscopes equipped with eyepiece reticule for the measurement of average diameters of stained islets. Results: The results disclosed that the average number of islets isolated was 81032.20 ñ 24736.79 and the average number of islets isolated per kg of body weight was 6938.70 1392.43. The average number of islets isolated per kg of body weight showed significant correlation with body weight and weight of the pancreas resected. Conclusion: The number of islets isolated, of a single donor, by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and discontinuous dextran density gradient purification can be sufficient to success of pancreatic islets transplant in dogs.

Análise quantitativa das ondas fisiológicas do intestino delgado apósplicatura parcial e ordenada do íleo em ratos / Quantitative analysis of physiological waves of small intestine after ordered and partial plication of ileum in rats

O presente estudo experimental analisou os movimentos intestinais espontâneos do jejuno proximal e íleo distal, em ratos, após plicatura ordenada no íleo. Foram utilizados 31 ratos albinos distribuídos em três grupos submetidos ao mesmo experimento: grupo A - animais reoperados no 10§ pós-operatório da plicatura ileal ordenada; grupo B - animais reoperados no 20§ pós-operatório; grupo C - animais reoperados no 60§ pós-operatório. Realizou-se plicatura ordenada do íleo, em quatro segmentos intestinais com 2cm de extensão cada. Na reoperaçäo procedeu-se à secçäo, em peça única, dos segmentos intestinais plicados, do segmento jejunal pré-plicatura e do segmento ileal pós-plicatura. Utilizou-se dois quimógrafos para registro simultâneo das ondas intestinais espontâneas. Foram analisadas as freqüências das ondas fisiológicas do tipo I, II e III nos segmentos do jejuno proximal e do íleo distal nos grupos A, B e C, separadamente e em conjunto. O estudo estatístico foi realizado pelos métodos näo paramétricos de Kruskal-Wallis, Friedman e Wilcoxon. Os resultados do presente experimento permitiram concluir que a plicatura ileal parcial ordenada näo interferiu de maneira definitiva nos movimentos intestinais espontâneos representados pelas ondas tipos I, II e III no segmento jejunal pré plicatura e no segmento ileal pós plicatura após dois meses do procedimento.

Pericárdio bovino utilizado como remendo no sistema cardiovascular / Bovine pericardium used as a cardiovascular patch

O comportamento do pericárdio bovino, preservado em glutaraldeído, na confecçäo de prótese valvulares é bem conhecido. Embora amplamente empregado na forma de retalho, foi pouco estudado neste sentido. Com esta finalidade, 21 caes foram submetidos ao implante cirúrgico de um retalho padronizado de pericárdio bovino substituindo, parcialmente, as paredes da aorta, do átrio esquerdo e do pericárdio. Os cäes foram, casualmente, separados em três grupos, segundo o tempo de reoperaçäo. O Grupo 1 com 6 cäes reoperados entre 33 e 43 dias; o Grupo 2 com 7 cäes reoperados entre 120 e 165 dias e Grupo 3 com 8 cäes reoperados entre 225 e 305 dias. Os exames micro e macroscópico evideciaram: 1) a superfície rugosa do retalho do pericárdio bovino aderiu às estruturas vizinhas, enquanto a superfície lisa pouco aderiu ao epicárdio; 2) o retalho de pericárdio bovino näo sofreu alteraçäo estrutural, independentemente da localizaçäo de implante; 3) a área final de remendo atrial esquerdo foi significantemente menor do que a dos remendos aórtico e pericárdico, para os caes dos Grupos 2 e 3; 4) a área do remendo atrial diminuiu significantemente, enquanto da aorta e do pericárdio näo sofreram alteraçäo com o tempo; 5) a espessura do remendo do pericárdio foi significantemente menor do que a dos remendos da aorta e átrio esquerdo, para cäes do Grupo 3; 6) ocorreu a formaçäo de uma camada de tecido conjuntivo fibroso na superfície lisa dos retalhos implantados no átrio esquerdo e na aorta. A espessura do tecido de aposiçäo interna foi significantemente maior no átrio esquerdo do que na aorta, nos Grupos 1 e 2; 7) o tecido de aposiçäo interna dos remendos atrial e aórtico sofreu calcificaçäo nos caes dos Grupos 2 e 3; 8) o tecido de aposiçäo interna dos remendos atrial e aórtico sofreu neoformaçäo de fibras elásticas que aumentou nitidamente com o tempo de implante. Diante do achado, concluímos que o comportamento do pericárdio bovino preservado em glutaraldeído, na forma de retalho, para a confecçäo de remendo, em cirurgia cardiovascular depende: 1) da superfície de contato; 2) da tensäo a que é submetido; 3) do contato com a corrente sangüínea.