Outbreak of bovine tick-borne disease on a riverside property in the Western Amazonia: Case report / Surto de tristeza parasitária bovina em propriedade ribeirinha na Amazônia Ocidental: Relato de caso

The objective was to report an outbreak of tick-borne disease (TBD) on riverside property in the Western Amazon. The death of 25 Nellore cattle was reported on a rural property on the banks of the Purus River, state of Acre. The producer observed animals with staggering walking, drop in productivity, weight loss and evolution to death in approximately 30 days. Fifteen animals from the same batch were selected for clinical evaluation and the ear tip was punctured for hemoparasite research, in addition to blood collection for hematological, biochemical and molecular evaluation. The main laboratory findings were leukocytosis, thrombocytopenia, hypoproteinemia, elevated creatine kinase and reduced urea, creatinine and albumin, as well as visualization of forms suggestive of Anaplasma spp. in 13.33% of the samples. Through PCR, 20% positivity was observed for Anaplasmamarginale and 53.33% for Babesia sp. Hematological and biochemical changes, although highly suggestive, may suffer changes from other factors not related to TBD. Therefore, the presumptive identification of the etiological agent in the blood or confirmatory by molecular methods is essential in the diagnosis. Depending on the stage of the disease, low parasitemia occurs, making it difficult to see hemoparasites in blood smears. The Babesia sp. was the main agent of the outbreak of TBD in the population evaluated, which, when associated with early clinical and laboratory diagnosis, results in adequate therapeutic direction and prophylactic measures, promoting a balance between host, agent and vector.

Objetivou-se relatar um surto de tristeza parasitária bovina (TPB) em propriedade ribeirinha na Amazônia Ocidental. Foi notificado o óbito de 25 bovinos da raça Nelore, em uma propriedade rural às margens do rio Purus, estado do Acre. O produtor observou animais com andar cambaleante, queda na produtividade, perda de peso e evolução ao óbito em aproximadamente 30 dias. Quinze animais do mesmo lote foram selecionados para avaliação clínica e foi procedida a punção a ponta de orelha para pesquisa de hemoparasitos, além da coleta de sangue para avaliação hematológica, bioquímica e molecular. Os principais achados laboratoriais foram anemia, leucocitose, trombocitopenia, hipoproteinemia, elevação da creatina quinase e redução de ureia, creatinina e albumina, além da visualização de formas sugestivas de Anaplasma spp. em 13,33% das amostras. Por meio da PCR, foi observado 20% de positividade para Anaplasma marginale e 53,33% para Babesia sp. As alterações hematológicas e bioquímicas, embora bastante sugestivas, podem sofrer alterações de outros fatores não relacionados à TPB. Por isso, a identificação presuntiva do agente etiológico no sangue ou confirmatória por métodos moleculares é essencial no diagnóstico. A depender da fase da doença, ocorre baixa parasitemia, dificultando a visualização de hemoparasitos em esfregaços sanguíneos. A Babesia sp. foi o principal agente do surto de TPB na população avaliada, que, quando associado ao diagnóstico clínico e laboratorial precoce, resulta no direcionamento terapêutico adequado e medidas profiláticas, promovendo uma relação de equilíbrio entre hospedeiro, agente e vetor.

Adenoid cystic carcinoma of the breast: case report

Adenoid cystic carcinoma (AdCC) of the breast is an uncommon invasive lobular neoplasm whose morphology is similar to the homonymous tumor of salivary glands and with a peculiar behavior toward the "triple-negative" (TN) profile. Tumors belonging to this family do not immunohistochemically express three of the main prognostic biomarkers and tend to show a more aggressive behavior. However, this rare histological pattern of breast cancer is generally associated with good prognosis. In this study, the authors describe the case of a 49-year-old woman diagnosed with this rare malignant tumor and who underwent breast-conserving surgery. Recent studies have aimed to understand the genes, genetic alterations, and etiological aspects related to the still obscure etiopathogenesis of AdCC. Thus, morphological and molecular aspects relevant to AdCC and reported in the literature will be discussed.

Molecular detection of Cercopithifilaria bainae and other tick-borne pathogens in Rhipicephalus sanguineus s.l. isolated from dogs in Midwest Brazil / Detecção molecular de Cercopithifilaria bainae e outros patógenos transmitidos por carrapatos em Rhipicephalus sanguineus s.l. isolados de cães no Centro-Oeste do Brasil

Abstract The aim of the present study was to detect Cercopithifilaria bainae and other tick-borne pathogens and to perform molecular characterization of the tick Rhipicephalus sanguineus s.l. collected from dogs. Ticks (n = 432, including 8 larvae, 59 nymphs, and 365 adults) were sampled from domiciled dogs (n = 73) living in Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Midwest Brazil). All ticks were morphologically identified as R. sanguineus. Genomic DNA was extracted in pools (three to five ticks per animal) and was used for definition of R. sanguineus haplotypes (based on 16S rRNA analysis) and pathogen identification (Cercopithifilaria sp., Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, Babesia vogeli and Rickettsia spp.). Rhipicephal us sanguineus specimens were identified as haplotypes A and B. DNA of Cercopithifilaria bainae (43.83%; 32/73), Ehrlichia canis (24.65%; 18/73), Anaplasma platys (19.17%; 14/73), and Hepatozoon canis (5.47%; 4/73) was detected. The identity of pathogens was confirmed by DNA sequence analysis. The present study confirms the presence of haplotypes A and B of R. sanguineus in the state of Mato Grosso do Sul and its importance as a vector of several pathogens of veterinary concern. Finally, this is the first report to identify C. bainae in ticks in the Midwestern region of Brazil.

Resumo O objetivo do presente estudo foi detectar Cercopithifilaria bainae e outros patógenos transmitidos por carrapatos e realizar a caracterização molecular do carrapato Rhipicephalus sanguineus s.l. coletado em cães. Carrapatos (n = 432, incluindo 8 larvas, 59 ninfas e 365 adultos) foram amostrados de cães domiciliados (n = 73) residentes no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (centro-oeste do Brasil). Todos os carrapatos foram identificados morfologicamente como R. sanguineus. O DNA genômico foi extraído em pools (três a cinco carrapatos por animal), seguido pela definição de haplótipos (com base no gene 16S rRNA) e pela investigação de patógenos (Cercopithifilaria sp., Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, Babesia vogeli e Rickettsia spp.). Os espécimes coletados foram identificados como haplótipos A e B de R. sanguineus. Foram detectados DNA de Cercopithifilaria bainae (43,83%; 32/73), Ehrlichia canis (24,65%; 18/73), Anaplasma platys (19,17%; 14/73) e Hepatozoon canis (5,47%; 4/73). A identidade dos patógenos foi confirmada por análise de sequência de DNA. O presente estudo confirma a circulação dos haplótipos A e B de R. sanguineus no estado de Mato Grosso do Sul e sua importância como vetor de vários patógenos de interesse veterinário. Finalmente, este é o primeiro relato de C. bainae em carrapatos na região centro-oeste do Brasil.

Clinical and therapeutic aspects of an outbreak of canine trypanosomiasis / Aspectos clínicos e terapêuticos de um surto de tripanossomíase canina

Abstract Trypanosomiasis caused by Trypanosoma evansi can seriously affect both domestic and wild animals. This article reports on an outbreak of canine trypanosomiasis on a farm in the Pantanal region of Brazil. The farm had 38 dogs, 20 of which died before receiving veterinary care. The remaining 18 dogs were underwent anamnesisn, clinical examination, hematological and biochemical evaluations. Blood smears and PCR analysis were performed for the diagnosis. The treatment protocols used according to the clinical recovery or parasitological cure of the dogs, using diminazene diaceturate, isometamidium chloride or quinapyramine sulfate. Post-treatment parasitological evaluation was performed by the microhematocrit technique. 7/18 dogs were PCR positive for T. evansi (confirmed by sequencing). There was clinical findings, which were consistent with both the acute and chronic stages of the disease in dogs. The infected dogs all exhibited at least one clinical sign of the disease. The hematological findings were compatible with trypanosomiasis, highlighting the hypochromic microcytic anemia as the main outcome. No treatment protocol was fully effective and the prolonged use of diminazene diaceturate caused the death of an animal. The trypanosomiasis can cause high rates of morbidity and mortality in dogs and difficulty in establishment an effective and safe therapeutic protocol.

Resumo A tripanossomíase causada por Trypanosoma evansi pode acometer gravemente os animais domésticos e selvagens. Este artigo relata um surto de tripanossomíase canina em uma fazenda na região do Pantanal, Brasil. Na fazenda havia 38 cães, 20 dos quais morreram antes de receber cuidados veterinários. Os 18 cães restantes foram submetidos a anamnese, exame clínico, avaliação hematológica e bioquímica. Esfregaços de sangue e análise da PCR foram realizados para o diagnóstico. Os protocolos de tratamento foram utilizados de acordo com a recuperação clínica ou cura parasitológica dos cães, utilizando diaceturato de diminazeno, cloreto de isometamídio ou sulfato de quinapiramina. A avaliação parasitológica pós-tratamento foi realizada pela técnica de microhematócrito. 7/18 cães foram PCR positivos para T. evansi (confirmado por sequenciamento). Os achados clínicos encontrados, foram consistentes com os estágios agudo e crônico da doença em cães. Todos os cães infectados exibiram pelo menos um sinal clínico da doença. Os achados hematológicos foram compatíveis com a tripanossomíase, destacando a anemia microcítica hipocrômica como principal consequência. Nenhum protocolo de tratamento foi totalmente eficaz e o uso prolongado de diaceturato de diminazeno causou a morte de um animal. A tripanossomíase pode causar altas taxas de morbidade e mortalidade em cães e dificultar o estabelecimento de um protocolo terapêutico eficaz e seguro.

Occurrence of zoonotic Enterocytozoon bieneusi in cats in Brazil / Ocorrência de Enterocytozoon bieneusi zoonótico em gatos no Brasil

Abstract Enterocytozoon bieneusi is an opportunistic intestinal pathogen that infects humans and a wide variety of animals worldwide. Our aim in this study was to investigate the occurrence of E. bieneusi in a domestic cat population in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil. Sixty fecal samples from diarrheic cats were subjected to polymerase chain reaction (PCR) and the amplicons were sequenced for identification. E. bieneusi was detected in two samples (3.3%), both identified as genotype D. This genotype has already been reported in animals and humans and is considered a zoonotic genotype. Our findings represent the first report of E. bieneusi in domestic cats in Brazil, reinforcing the importance of identifying this agent as a source of infection in animals and humans.

Resumo Enterocytozoon bieneusi é um patógeno intestinal oportunista que infecta humanos e uma variedade de animais em todo o mundo. O objetivo no presente estudo foi investigar a ocorrência de E. bieneusi em uma população de gatos domésticos em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil. Sessenta amostras fecais de gatos diarréicos foram submetidas a reação em cadeia da polimerase (PCR) e os produtos de amplificação foram sequenciados para identificação molecular. E. bieneusi foi detectado em duas amostras (3,3%), ambos identificados como genótipo D. Esse genótipo tem sido relatado em animais e humanos e é considerado um genótipo zoonótico. Nossos resultados representam a primeira descrição de E. bieneusi em gatos domésticos no Brasil, reforçando a importância desse agente como fonte de infecção para animais e humanos.

Análise comparativa entre isolamento microbiológico convencional e PCR para detecção de Salmonella spp. em produtos cárneos / Comparative analysis between conventional microbiological isolation and PCR for detection of Salmonella spp. in meat products

Salmonella spp. está entre os principais agentes causadores de doenças de origem alimentar no mundo, representando um sério problema para saúde pública, portanto, a fiscalização de alimentos deve contar com métodos sensíveis e eficientes para detecção deste micro-organismo. O objetivo do presente estudo foi realizar uma análise comparativa entre o isolamento microbiológico convencional e Reação em Cadeia Polimerase (PCR) para detecção de Salmonella spp. em produtos cárneos. Foram analisadas 22 amostras recebidas pela Agência Estadual de Defesa Sanitária Animal e Vegetal de Mato Grosso do Sul, sendo duas amostras de carne in natura resfriada, duas de charque, duas de mortadela, duas de salsichão e 14 de linguiça frescal. O cultivo microbiológico foi realizado conforme as normas vigentes no Brasil e para a PCR foram utilizados 1,5mL de solução salina peptonada tamponada a 1% e 1,5mL dos caldos Rappaport Vassiliadis (RSV) e Selenito Cistina (SC) de cada amostra. No método convencional não foram detectadas amostras positivas, enquanto na PCR, das 22 amostras, 13 foram positivas (59,1%). O caldo SC e solução salina permitiram melhor detecção do DNA de Salmonella spp., principalmente para as amostras de linguiça frescal, que apresentaram maior número de positivos. As duas amostras de salsichão e mortadela provenientes do caldo Rappaport Vassiliadis e uma de salsichão do caldo SC tiveram o DNA degradado, não sendo possível determinar se realmente estavam contaminadas pela bactéria. Não foi observada correlação entre a data de fabricação dos produtos e a data do início dos testes para detecção de Salmonella spp. De acordo com os resultados obtidos a PCR foi superior ao método microbiológico convencional para detecção de Salmonella spp. em produtos cárneos, apesar do protocolo de extração de DNA escolhido não ter sido eficiente para algumas amostras de salsichão e mortadela.

Salmonella spp. is one of the main agents causing foodborne diseases in the world and represents a serious problem for public health. Therefore, food control must have sensitive and efficient methods to detect this microorganism. The objective of the present study was to perform a comparative analysis between conventional microbiological isolation and PCR for the detection of Salmonella spp. in meat products. Twenty-two samples received from the State Agency for Animal and Plant Health Protection of Mato Grosso do Sul were analyzed, two samples of fresh meat, two of beef jerky, two of mortadella, two of sausage and 14 of fresh sausage. Microbiological culture was carried out according to the Brazilian norms, and 1.5mL of buffered peptone saline solution at 1% and 1.5mL of the Rappaport Vassiliadis (RVS) and Selenito Cistina (SC) broths of each sample were used for PCR. In the conventional method, no positive samples were detected, while for PCR, of the 22 samples, 13 were positive (59.1%). The SC broth and saline solution allowed a better detection of Salmonella spp. DNA, especially for the fresh sausage samples, which presented a higher number of positives. The two samples of sausage and mortadella from the RVS and one from SC had the DNA degraded and it was not possible to determine if these meat products were actually contaminated by the bacteria. No correlation was observed between the date of manufacture of the products and the start date of the tests for Salmonella spp. According to the results, PCR was superior to the conventional microbiological method for the detection of Salmonella spp. in meat products, although the chosen DNA extraction protocol was not efficient for some samples of sausage and mortadella.

Survey of verotoxin-producing Escherichia coli and faecal coliforms in beef carcasses destined for export at slaughterhouses in Brazil

Abstract This study investigated the presence of generic and verotoxin-producing E. coli as well as enumerated faecal coliforms in 30 beef carcasses in different parts of the slaughter process (after skinning, washing and cooling) at each of three slaughterhouses of the state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Among the total number of carcasses examined (n = 90), 39 (43.3%) had generic E. coli. Among the 270 samples analysed, 25 (9.3%) were positive after skinning, 14 (5.2%) were positive after washing and nine (3.3%) were positive after cooling. The majority of isolates of E. coli was collected from samples after skinning, which is considered a critical point of the microbial contamination of carcasses. However, the highest concentration of faecal coliforms was found after the washing step. The cooling step proved to be important to reducing the amount of hygiene-indicator microorganisms. The E. coli isolates had no stx1 or stx2 genes associated with virulence.

Comparación de aspectos de seguridad radiológica en odontopediatras con profesionales de distintas especialidades odontológicas de Lima ­ Perú

Objetivo: En los últimos años se viene realizando una labor de control y certificación de calidad en los temas relacionados a la radiación ionizante para obtener diversos objetivos; entre ellos, optimizar tratamientos, promover la salud ocupacional, etc. La presente investigación analiza el cumplimiento -por parte de profesionales en odontología- del uso de un protocolo de seguridad radiológica, creado a partir de leyes peruanas y recomendaciones internacionales. Metodología: Se elaboró una escala denominada "Protocolo de Seguridad Radiológica", integrada por 15 afirmaciones, cada uno con tres posibles respuestas y un puntaje, cuya suma representa el índice de cumplimiento de las normas de protección radiológica. Las afirmaciones y el protocolo en su conjunto pasaron por un análisis estadístico, con la finalidad de establecer la validez de confiabilidad de los mismos. La población de estudio abarcó profesionales de odontología de las especialidades de Endodoncia, Periodoncia, Odontopediatría; Rehabilitación Oral, Estética y Ortodoncia, de la Universidad Científica del Sur de Lima-Perú. De ella se seleccionó una muestra no probabilística de tipo intencional, integrada por 108 personas (34 hombres y 74 mujeres). Resultados: Se halló que los endodoncistas (puntaje promedio en la escala: 15.89, que representa el 52.97% del puntaje total de la misma) y odontopediatras (promedio 16.68, que representa el 55.6% del puntaje total) son los profesionales de las especialidades que menos se rigen en el "Protocolo de Seguridad Radiológica". Conclusiones: Se determinó que las prácticas o comportamientos de los diversos especialistas odontólogos, relacionados al cumplimiento del uso del "Protocolo de Seguridad Radiológica", no garantizan calidad en relación al mismo.

Detection and molecular characterization of Trypanosoma (Duttonella) vivax in dairy cattle in the state of Sergipe, northeastern Brazil / Detecção e caracterização molecular de Trypanosoma (Duttonella) vivax em gado leiteiro no estado de Sergipe, no Nordeste do Brasil

Abstract Trypanosoma (Duttonella) vivax is an important cause of economic losses among feedlot cattle. These losses are related to the morbidity, mortality, reproductive issues and decreased production. It is known that the clinical signs observed in infections by this protozoon are similar to other hemoparasitosis, which difficult the diagnosis. Therefore, the aim of this study was to detect and molecularly characterize an outbreak of trypanosomiasis caused by T. (D.) vivax in dairy cattle in the municipality of São Miguel Aleixo, state of Sergipe, Brazil. Blood samples from cattle (n = 15) presenting clinical signs compatible with trypanosomiasis were collected and parasitological and molecular evaluated. Among the samples analyzed, 34% (5/15) were positive from blood smears, 60% (9/15) from the buffy coat method and 80% (12/15) from the molecular method. The DNA sequence obtained (659 bp) showed 99% similarity to T. (D.) vivax sequences that are available in the GenBank database. The presence of this protozoon in cattle herds is a problem for producers. Diagnosing trypanosomiasis is problematic because its evolution is similar to that of other parasitic blood diseases. In addition, this is the first report of infection by T. (D.) vivax in cattle in the state of Sergipe, northeastern Brazil.

Resumo Trypanosoma (Duttonella) vivax é responsável por consideráveis perdas econômicas na bovinocultura. Estas perdas estão relacionados à morbidade, mortalidade, problemas reprodutivos e declínio na produção. Sabe-se que os sinais clínicos apresentados em infecções por este protozoário se assemelha a outras hemoparasitoses, dificultando muitas vezes o diagnóstico. Portanto, objetivou-se com este estudo detectar a ocorrência de T. (D.) vivax em bovinos leiteiros no município de São Miguel Aleixo, Estado de Sergipe, Brasil. Para tanto, amostras de sangue (n = 15) foram coletadas e avaliadas através de métodos parasitológicos e moleculares. Do total das amostras analisadas, 34% (5/15) foram positivas no esfregaço sanguíneo, 60% (9/15) pelo método do Buffy Coat, enquanto na biologia molecular 80% (12/15) amplificaram um fragmento de DNA (659 pb) compatível com T. (D.) vivax (GenBank). Em conclusão a presença de T. (D.) vivax nos rebanhos bovinos caracteriza-se como um problema para os pecuaristas, como também para o diagnóstico, uma vez que essa tripanossomíase apresenta evolução semelhante a outras hemoparasitoses. Ademais, este é o primeiro relato de infecção por T. (D.) vivax em bovinos do estado de Sergipe, nordeste do Brasil.

Molecular survey of Anaplasma platys and Ehrlichia canis in dogs from Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil

ABSTRACT This study investigated the frequency of infection by Anaplasma platys and Ehrlichia canis in dogs submitted to animal health centers in Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, Brazil. E. canis and A. platys showed infection frequencies of 55.75% and 16.96%, respectively. The identity of the two species was confirmed by DNA sequencing.

Correlation between chronic inflammation, immunostaining and parasite load in the genital system of female dogs naturally infected with Leishmania infantum / Correlação entre inflamação crônica, imunomarcação e carga parasitária no sistema genital de cadelas naturalmente infectadas com Leishmania infantum

ABSTRACT: The aim of the present study was to investigate the correlations among chronic inflammatory reaction, immunostaining and parasite load in the genital system of female dogs naturally infected with Leishmania infantum . Animals (n = 10) used in this study were from the Department of Vector Control and Animal Surveillance of the municipality of Caruaru, state of Pernambuco, Brazil. Fragments of the vulva, vagina, cervix, uterine body, uterine horns and ovaries were submitted to histopathological analysis, immunohistochemistry (IHC) and DNA detection of amastigotes by qPCR. Correlations were found between the IHC findings and chronic inflammatory infiltrate related to L. Infantum only in the vulva and vagina; whereas, the same inflammatory reactions without immunostaining were observed in all organs, except the ovaries. L. Infantum DNA was detected in all organs of genital system, with no difference in parasite load observed among the different organs. No correlation was reported between parasite load and inflammatory lesions in the organs evaluated, except for the uterine body, in which an inverse correlation was detected. In conclusion, the vulva and vagina were the major sites of lesions and immunostaining for L. Infantum amastigotes in the genital system of female dogs. Moreover, parasite load exerted no influence on the intensity of the lesions in the organs evaluated.

RESUMO: Considerando a falta de estudos sobre lesões nos órgãos genitais de cadelas naturalmente infectadas por Leishmania infantum , o objetivo do presente estudo foi investigar a correlação entre reação inflamatória crônica, imunomarcação e carga parasitária, no sistema genital. Dez animais foram fornecidos pelo Departamento de Controle de Vetores e Vigilância Animal do município de Caruaru, Estado de Pernambuco, Brasil. Fragmentos de vulva, vagina, cérvix, corpo do útero, corno do útero e ovários foram avaliados por descrição histopatológica, imuno-histoquímica (IHQ) e detecção de DNA de formas amastigotas por qPCR. A relação entre IHQ e infiltrado inflamatório crônico relacionado com L. infantum foi observada apenas na vulva e vagina, enquanto as mesmas reações sem imunomarcação foram observadas em todos os órgãos, exceto nos ovários. DNA de L. infantum foi detectado em todos os órgãos do sistema genital, porém, sem diferença de carga parasitária entre eles. Não houve correlação entre a carga parasitária e lesões inflamatórias nos órgãos avaliados, com exceção do corpo do útero, em que foi encontrada uma correlação inversa. Em conclusão, a vulva e a vagina foram os principais locais de lesões e imunomarcação para formas amastigotas L. infantum no sistema genital de cadelas. A carga parasitária não influenciou a intensidade das lesões nos órgãos avaliados.

Occurrence of Mycoplasma haemocanis in dogs infested by ticks in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil / Ocorrência de Mycoplasma haemocanis em cães infestados por carrapatos em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil

Abstract Hemotropic mycoplasmas in dogs, such as Mycoplasma haemocanis, have been described worldwide. Recently, these pathogens have been reported to be causative agent of zoonosis. It is known that its transmission may occur through the action of blood-sucking arthropods (e.g. ticks or fleas), through blood transfusion, contaminated fomites and/or transplacentally. In Brazil, M. haemocanis is present in practically all regions and the tick Rhipicephalus sanguineus sensu lato is suspected the main vector. In the municipality of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, there is little information about infection of dogs by M. haemocanis, or on the main epidemiological features associated with it. Thus, the aim of the present study was to determine the occurrence of M. haemocanis among dogs infested by ticks and to assess possible associations with some epidemiological factors. The polymerase chain reaction (PCR) and DNA sequencing were used to analyze dog blood samples (n = 94). DNA from M. haemocanis was detected in four samples. No significant associations were observed with any epidemiological parameter analyzed here. However, the results from this study confirm that this pathogen is circulating in this region and should be considered in the differential diagnosis of diseases among anemic dogs.

Resumo Micoplasmas hemotrópicos de cães, como Mycoplasma haemocanis, já foram descritos em todo o mundo. Recentemente, esses patógenos têm sido apontados como causadores de zoonoses. É sabido que a transmissão pode ocorrer devido à ação de artrópodes sugadores de sangue (carrapatos, pulgas), transfusão sanguínea e/ou fômites contaminados e por via transplacentária. No Brasil, Mycoplasma haemocanis está presente em praticamente todas as regiões, e o carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato é suspeito como principal vetor. No município de Campo Grande, Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil não existem muitas informações acerca de infecções de cães por M. haemocanis, assim como quais são os principais aspectos epidemiológicos associados a este patógeno. Assim, o objetivo, no presente estudo, foi determinar a ocorrência de M. haemocanis em cães infestados por carrapatos e analisar possíveis associações com alguns fatores epidemiológicos. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e o sequenciamento de DNA foram utilizados para analisar amostras de sangue de cães (n = 94). DNA de M. haemocanis foi identificado em quatro amostras. Não foram observadas associações significativas com qualquer parâmetro epidemiológico analisado. No entanto, os resultados deste estudo confirmam que esse patógeno está circulando na região e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de causas de anemia em cães.

Occurrence of Mycoplasma haemocanis in dogs infested by ticks in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil / Ocorrência de Mycoplasma haemocanis em cães infestados por carrapatos em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil

Abstract Hemotropic mycoplasmas in dogs, such as Mycoplasma haemocanis, have been described worldwide. Recently, these pathogens have been reported to be causative agent of zoonosis. It is known that its transmission may occur through the action of blood-sucking arthropods (e.g. ticks or fleas), through blood transfusion, contaminated fomites and/or transplacentally. In Brazil, M. haemocanis is present in practically all regions and the tick Rhipicephalus sanguineus sensu lato is suspected the main vector. In the municipality of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, there is little information about infection of dogs by M. haemocanis, or on the main epidemiological features associated with it. Thus, the aim of the present study was to determine the occurrence of M. haemocanis among dogs infested by ticks and to assess possible associations with some epidemiological factors. The polymerase chain reaction (PCR) and DNA sequencing were used to analyze dog blood samples (n = 94). DNA from M. haemocanis was detected in four samples. No significant associations were observed with any epidemiological parameter analyzed here. However, the results from this study confirm that this pathogen is circulating in this region and should be considered in the differential diagnosis of diseases among anemic dogs.

Resumo Micoplasmas hemotrópicos de cães, como Mycoplasma haemocanis, já foram descritos em todo o mundo. Recentemente, esses patógenos têm sido apontados como causadores de zoonoses. É sabido que a transmissão pode ocorrer devido à ação de artrópodes sugadores de sangue (carrapatos, pulgas), transfusão sanguínea e/ou fômites contaminados e por via transplacentária. No Brasil, Mycoplasma haemocanis está presente em praticamente todas as regiões, e o carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato é suspeito como principal vetor. No município de Campo Grande, Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil não existem muitas informações acerca de infecções de cães por M. haemocanis, assim como quais são os principais aspectos epidemiológicos associados a este patógeno. Assim, o objetivo, no presente estudo, foi determinar a ocorrência de M. haemocanis em cães infestados por carrapatos e analisar possíveis associações com alguns fatores epidemiológicos. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e o sequenciamento de DNA foram utilizados para analisar amostras de sangue de cães (n = 94). DNA de M. haemocanis foi identificado em quatro amostras. Não foram observadas associações significativas com qualquer parâmetro epidemiológico analisado. No entanto, os resultados deste estudo confirmam que esse patógeno está circulando na região e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de causas de anemia em cães.

Histopathological evaluation and parasite quantification (qPCR) in the male dog's genital system after natural infection with Leishmania infantum / Avaliação histopatológica e quantificação parasitária (qPCR) no sistema genital de cães machos após infecção natural com Leishmania infantum

ABSTRACT: Canine visceral leishmaniasisis an important disease caused by the protozoon Leishmania infantum which affects several organs and systems, including the genital tract. The L. infantum tropism to the male genital system and correlation among parasite load, immunohistochemistry detection and structural changes in these organs is controversy. Therefore, the aim of this study was to evaluate this correlation in the genital organs of the male dogs naturally infected with L. infantum. Samples from testicles, epididymis, prostate, glans penis, prepuce and scrotum were collected from 19 positive adult dogs. Structural changes were observed in the testicles (5.2%), epididymis (2.6%), prepuce (5.2%) and scrotum (5.2%) of the samples positive at immunohistochemistry examination. Conversely, similar structural changes were observed in all tissues negative at immunohistochemistry analysis. Moreover, L. infantum DNA was detected in all organs with the highest parasite load found in testicles, epididymis, and prostate gland. , Testicles had the highest parasite load but the lowest number of inflammatory lesions. These inflammatory lesions were observed in all organs of reproductive system of dogs; however, no correlation was observed between the parasite load and inflammatory lesions of dogs naturally infected with L. infantum.

RESUMO: A Leishmaniose Visceral Canina é uma importante enfermidade causada pelo protozoário Leishmania infantum que afeta diversos órgãos e sistemas, incluindo o trato genital. No entanto, o tropismo da L. infantum pelo sistema genital masculino e a correlação entre carga parasitária, detecção imunohistoquímica e alterações estruturais nesses órgãos ainda é uma questão controversa. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar essa correlação em órgãos genitais de cães naturalmente infectados por L. infantum. Para tal, amostras de testículos, epidídimos, próstata, glande, prepúcio e escroto foram coletadas de 19 cães adultos positivos. Lesões microscópicas associadas com imunomarcação de formas amastigotas do parasito foram observadas nos testículos (5,2%), epidídimos (2,6%), prepúcio (5,2%) e escroto (5,2%). Por outro lado, alterações estruturais sem imunomarcação foram observadas em todos os órgãos. Além disso, o DNA de L. infantum foi encontrado em todos os órgãos com maior carga parasitária nos testículos, epidídimos e próstata. Curiosamente, os testículos apresentaram a maior carga parasitária, porém apresentaram o menor grau de lesões inflamatórias. Essas lesões inflamatórias foram observadas em todos os órgãos do sistema reprodutor de cães com L. infantum. Entretanto, não houve correlação entre carga parasitária e lesões inflamatórias nestes órgãos.

Molecular identification of Hepatozoon canis in dogs from Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil / Identificação molecular de Hepatozoon canis em cães de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil

The aim of this study was to investigate the occurrence of Hepatozoon species infecting dogs in the municipality of Campo Grande, Mato Grosso do Sul (MS), Brazil, using blood samples (n = 165) drawn from dogs. The species Hepatozoon caniswas identified in 3.63% of the tested animals using molecular tools. Further studies are needed to determine the clinical relevance of this infection and the main arthropod vectors involved in its transmission.

O objetivo deste estudo foi identificar a frequência e espécies de Hepatozoon infectando cães no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil. Uma amostragem de 165 animais foi utilizada e, por meio do uso de ferramentas moleculares, a espécie Hepatozoon canis foi identificada em 3,63% dos animais. Mais estudos são necessários para identificar a relevância clínica e os principais vetores envolvidos na transmissão desse protozoário na região.

An In Vivo Study of Working Length Determination with a New Apex Locator

The success of an endodontic treatment relies on a correct working length determination. The canal terminus must be detected accurately and a precise control of the working length during the endodontic treatment must be maintained. The aim of this study was to investigate the working length determination in vivo with the Quill Apex Locator® for apical limit established at 1 mm short from the apical foramen (AF). Patients scheduled to dental extraction due to orthodontic or periodontal reasons were selected for this study, resulting in a sample of 24 root canals. Written informed consent was obtained from each patient before the treatment. After the administration of local anesthesia each tooth had its pulp cavity accessed. Next, the reading corresponding to the AF showed on the device's display was recorded and the file was removed. With the use of a digital caliper, 1 mm was subtracted from that first measurement. The file with the new measurement was introduced into to the root canal again then fixed with light curing flow composite and the tooth was extracted. Next, one of the apical third walls was worn out to visualize the instrument's point and the AF. The distance from the file tip to the AF was measured by scanning electron microscopy. The average of the measurements was 1.089±0.437 mm. The Bicaudal t-test showed no significant difference (p=0.338) between the experimental values and the hypothetical value tested at 1 mm. The present investigation confirmed that the Quill Apex Locator® was able to determine the working length with good reliability for the endodontic treatment, established at 1 mm short from the AF.

O sucesso do tratamento endodôntico depende da correta determinação do comprimento de trabalho. O término do canal deve ser detectado com precisão e o controle do comprimento de trabalho durante o tratamento deve ser mantido. A proposta dessa investigação foi avaliar a capacidade do localizador foraminal Quill® determinar o comprimento de trabalho, a partir da localização do forame apical, estabelecido no presente estudo em 1 mm aquém do forame apical. Pacientes com indicação para extração dental por motivos ortodônticos ou periodontais foram selecionados, resultando em uma amostra de 24 canais. O termo de consentimento livre e esclarecido foi obtido de cada paciente antes dos tratamentos. Após a administração de anestesia local, a cavidade pulpar foi acessada. Em sequência, as leituras correspondentes ao forame apical mostradas no display do aparelho foram registradas e a lima removida. Com o uso de paquímetro digital, 1 mm foi subtraído da primeira medida. A lima com a nova medida foi introduzida no canal radicular novamente, fixada com resina flow e então o dente foi extraído. Após, uma das paredes do terço apical foi desgastada para vizualização da ponta do instrumento e forame apical. A distância da ponta da lima ao forame apical foi mensurada no MEV. A média das medidas foi de 1,089mm (±0,437mm). O teste t Bicaudal mostrou não haver diferenças significantes (p=0,338) entre os valores experimentais e um valor hipotético testado de 1 mm. O localizador foraminal Quill® foi capaz de determinar um satisfatório comprimento de trabalho para o tratamento endodôntico, estabelecido em 1 mm aquém do forame apical.

Evaluación in vivo de la actividad analgésica y antinflamatoria y formulación de un gel del extracto de Capraria biflora (perulera) en el periodo noviembre-mayo 2014 / In vivo evaluation of the analgesic and anti-inflammatory activity and formulation of a gel of the extract of Capraria biflora (perulera) in the period November-May 2014

El presente estudio trata sobre la evaluación de la actividad analgésica, antinflamatoria y formulación de un gel del extracto hojas de Capraria biflora , asi como, determinar in vivo la actividad analgésica del extracto de Capraria biflora utilizando el modelo del plato caliente (hot plate) en ratones de variedad BALB/C. Evalúa también in vivo la actividad antiinflamatoria de extracto de Capraria biflora mediante el método de edema de pata inducido por formalina en ratones de variedad BALB/C. Finalmente establece el diseño y formulación de un gel natural conteniendo extracto de Capraria biflora.

Weight gain and control of endo- and ectoparasites of beef heifers treated with allopathic, herbal and homeopathic drugs / Ganho de peso e controle de endo e ectoparasitas de novilhas de corte tratadas com medicamentos alopáticos, fitoterápicos e homeopáticos

The aim of this study was to evaluate the efficacy of herbal, homeopathic and allopathic treatments for parasites in beef heifers during two experimental cycles of 318 and 313 days. Treatments: NC - negative control (untreated); HH - treated with homeopathic preparation Homeo bovis Parasitário®; PC - (positive control) - treated with 10% moxidectina® and an acaricide formulation of cypermethrin, chlorpyrifos and piperonyl butoxide®; HF ­ treated with homeopathic preparation Fator C&MC®; and FN - treated with neem cake (torta de neem®) and with neem oil (óleo de neem®). Parasite egg count (EPG), horn fly (Haematobia irritans) and tick (Rhipicephalus (Boophilus) microplus) assessment and animal weighting were performed at 28-day intervals. Blood samples were collected at the first cycle to assess the immune response. Horn fly infestation was not affected by any treatment (P>0.05). The mean number of ticks, which was low in both cycles, was lower (P<0.05) in the first cycle in animals that received PC treatment. In both experimental cycles, the mean EPG of the PC-treated animals was lower (P<0.05) than the animals receiving other treatments. Treatments had no effect on the immune response (P>0.05). The animals treated with allopathic drugs were 22 to 30 kg heavier (P<0.05) than untreated animals or animals treated with alternative drugs.

O objetivo do trabalho foi avaliar a eficácia de tratamentos fitoterápicos, homeopáticos e alopáticos contra ecto e endoparasitas na recria de novilhas, em dois ciclos experimentais subsequentes de 318 e 313 dias. Tratamentos: CN - controle negativo - não tratado; tratamento HH - tratado com homeopático Homeo bovis Parasitário®; tratamento CP ­ controle positivo ­ tratado com moxidectina 10%® e uma formulação acaricida contendo cypermetrina, clorpirifós e butóxido de piperonila®; tratamento HF - tratado com homeopático Fator C&MC® e tratamento FN - tratados com torta de neem® e com óleo de neem®. A contagem de ovos nas fezes (OPG), a infestação por Haematobia irritans, Rhipicephalus (Boophilus) microplus e pesagem dos animais foram realizadas em intervalos de 28 dias. No primeiro ciclo foi coletado sangue para avaliar a resposta imume. A infestação por mosca-dos-chifres não foi influenciada por nenhum dos tratamentos (P>0,05). Nos dois ciclos o número médio de carrapatos foi baixo e apenas no primeiro foi menor (P>0.05) no tratamento CP em relação aos demais. A média de OPG no tratamento CP foi mais baixa que nos demais tratamentos nos dois ciclos experimentais (P<0,05). Não houve efeito de tratamentos na resposta imune. Os animais do tratamento CP ganharam entre 22 a 30 kg de peso vivo a mais (P<0,05) que os não tratados ou tratados com medicamentos alternativos.

Quantification of Leishmania infantum DNA in the bone marrow, lymph node and spleen of dogs / Quantificação de DNA de Leishmania infantum em medula óssea, linfonodo e baço de cães

The aim of the present study was to quantify the parasite load of Leishmania infantum in dogs using real-time PCR (qPCR). Bone marrow, lymph node and spleen samples were taken from 24 dogs serologically positive for L. infantum that had been put down by the official epidemiological surveillance service. According to the clinical signs the dogs were classified as asymptomatic or symptomatic. After DNA extraction, the samples were subjected to qPCR to detect and quantify L. infantum DNA. Out of the 24 dogs, 12.5% (3/24) were classified as asymptomatic and 87.5% (21/24) as symptomatic. Real-time PCR detected L. infantum DNA in all the animals, in at least one biological sample. In particular, 100% of bone marrow and lymph node scored positive, whereas in spleen, the presence of DNA was detected in 95.9% (23/24). In addition, out of 24 animals, 15 were microscopically positive to amastigote forms of L. infantum in bone marrow. No statistical significant difference was found in the overall mean quantity of DNA among the different biological samples (P = 0.518). Considering each organ separately, there was 100% positivity in bone marrow and lymph nodes, while among the spleen samples, 95.9% (23/24) were positive. Regarding the different clinical groups, the overall mean parasite load varied significantly (P = 0.022). According to the results obtained, it was not possible determine which biological sample was most suitable tissue for the diagnosis, based only on the parasite load. Therefore, other characteristics such as convenience and easily of obtaining samples should be taken into consideration.

O objetivo do presente estudo foi quantificar a carga parasitária de Leishmania infantum em cães pela técnica de PCR em tempo-real (qPCR). Amostras de medula óssea, linfonodo e baço foram obtidos de 24 cães sorologicamente positivos para L. infantum que foram submetidos à eutanásia pelo serviço de vigilância oficial. Segundo os sinais clínicos, os animais foram classificados em assintomáticos ou sintomáticos. Após extração de DNA, as amostras foram submetidas à qPCR para detecção e quantificação de DNA de L. infantum. Dos 24 cães, 12,5% (3/24) foram classificados como assintomáticos e 87,5% (21/24) como sintomáticos. A PCR em tempo real detectou DNA de L. infantum em 100% dos animais, em pelo menos uma amostra biológica. Considerando cada órgão isoladamente, foi observada uma positividade de 100% em medula óssea e linfonodo, já nas amostras de baço 95,9% (23/24) foram positivas. Não foi observada diferença estatística entre a quantidade média geral de DNA entre as diferentes amostras biológicas (P = 0,518). Considerando os diferentes grupos clínicos, a carga parasitária média geral variou significantemente (P = 0,022). De acordo com os resultados obtidos não foi possível eleger a mais apropriada amostra biológica para o diagnóstico, baseado apenas na carga parasitária. Portanto, outras características como a conveniência e a facilidade de obtenção da amostra devem ser consideradas.

Precisão e confiabilidade de um novo localizador foraminal eletrônico: estudo in vivo / Accuracy and reliability of a new electronic apex locator: an in-vivo study

Objetivo: Verificar in vivo a precisão e confiabilidade de leitura do localizador foraminal eletrônico Joypex 5® utilizando o microscópio eletrônico de varredura na aferição das medidas obtidas pelo aparelho. Método: Foram triados pacientes com indicação para extração por motivos ortodônticos e periodontais, o que resultou em amostra de 14 canais. Os dentes foram previamente radiografados com a intenção de detectar perfurações, tratamentos endodônticos prévios e calcificações. Realizadas as aberturas coronárias, os terços cervical e médio foram preparados e procederam-se as leituras no ponto correspondente no display do aparelho ao forame apical. Após a obtenção da medida a lima foi removida e subtraiu-se 1mm do comprimento lido em paquímetro digital para, então, fixar o instrumento e realizar a exodontia. Na seqüência foi realizado um desgaste em uma das paredes da região apical, objetivando visualizar a ponta do instrumento e a continuidade do canal até a real saída do forame apical. A distância entre a ponta da lima e a real saída foraminal foi medida com o auxílio de microscopia eletrônica de varredura. Resultados: A média das medidas foi 0,87 mm (DP 0,42mm). O teste T para amostras independentes revelou que os dados mostraram-se semelhantes (p > 0,05) entre os valores experimentais encontrados (da ponta do instrumento ao forame apical) e o valor hipotético testado de 1 mm. Conclusões: O estudo concluiu que o localizador foraminal eletrônico Joypex 5® demonstrou ser preciso e confiável na determinação de um comprimento de trabalho eficiente e seguro para o tratamento endodôntico. de trabalho eficiente e seguro para o tratamento endodôntico.

Objective: To evaluate in vivo the measurement accuracy and reliability of the electronic apex locator Joypex 5® using a scanning electron microscope to assess the measurements obtained with the tested device. Method: Patients with indication for tooth extraction for orthodontic and periodontal reasons were screened, providing a sample of 14 root canals. The teeth were first radiographed for detecting perforations, previous endodontic treatments and calcifications. After preparation of access cavities, the coronal and middle thirds were prepared and the electronic measurements were made on the point corresponding to the apical foramen of the apex locator's display. After the electronic reading, the file was removed from the canal, 1 mm was subtracted from the measurement obtained using a digital caliper, and the apex locator was fixed for extraction of the tooth. Next, grinding was performed on an apical wall in order to visualize the tip of the file and canal integrity up to the actual apical foramen opening. The distance between the file tip and the actual apical foramen opening was measured by scanning electron microscopy. Results: The mean of the obtained measurements was 0.87 mm (DP 0.42 mm). The t test for independent samples revealed statistical similarity (p>0.05) among the obtained values (from the file tip to actual apical foramen) and the hypothetical 1 mm value. Conclusion: The Joypex 5® electronic apex locator was found to be accurate and reliable for determination of an efficient and safe working length for endodontic treatment.