Hiperexpressão e mutação do gene p53 em biópsias endoscópicas de pacientes com megaesôfago chagásico / Overexpression and mutation of gene p53 in endoscopic biopsies of patients with Chagas megaesophagus

O câncer do esôfago é mais prevalente em pacientes com megaesôfago chagáscio do que na população normal. Marcadores desse maior risco não são conhecidos. Objetivos: Correlacionar as alterações do p53 (gene supressor de tumor) e do PCNA (antígeno nuclear de células em proliferação) com as alterações histólogiacas da mucosa em pacientes com megaesôfago avançado. Métodos:Quatro carcinomas epidermóides do esôfago e áreas adjacentes correspondentes, provenietes de pacientes com megaesôfago, foram analisados através de imuno-histoquimica para p53 e PCNA. Concomitantemente, 128 biópsias, de diferentes níveis do esôfago, de 16 pacientes com megaesôfago avançado (sem tumor) foram prospectivamente coletados e avaliadas quanto ao grau de inflamação, hiperplasia, displasia e imuno-histoquímica para p53 e PCNA. Todos os tecidos positivos para o p53 foram submetidos à análise gênica topográfica através de microdissecção, amplicifacção por PCR e direito sequenciamento dos exons 5 a 8. Resultados: Reatividade forte e difusa para o p53 foi observada em 2/4 tumores (exon 7,238 CH e exon 5, 146WC). Em um paciente, a área adjacente ao tumor apresentou forte positividade para o p53. Na mucosa adjacente, as mesmas áreas mostrando hiperexpressão do p53 também apresentaram maior positividade ao PCNA. No grupo prospectivo, 7/16 (43,7por cento) pacientes ou 53/128(41,4por cento) biópsias expressaram o p53. Hiperplasia foi diagnosticada em 4/16pacientes ou em 10 biópsias e associada a hiperexpressão do p53 em todos os casos . Displasia não esteve presente nesse grupo. Foi observada positividade ao p53 em 15,4por cento das biópsias sem inflamação em 31,4por cento com inflamação leve, 78,3por cento com moderada e 88,9poe cento com intensa (p<0,00001). A expressão do PCNA foi detectada na camada basal da mucosa e aumento da positividade foi associada à hiperexpressão da p53 (p=0,00018). A genotipagem revelou mutação em exon 5 códon 213 RG, em um paciente (1/16, 6,2por cento). Conclusão: 1) A expressão e mutação do p53 em biópsias de pacientes de alto risco indicam que este gene representa um evento inicial no desenvolvimento do câncer esôfago: 2)A inflamação frequentemente observada nesses pacientes parece estar associada às alterações da proteína p53; 3) A expressão do gene supressor de tumor está aumentada em áreas mostrando proliferação celular

Análise das alteraçöes do óxido nítrico em pacientes com megacólon chagásico / Analysis of the alterations of nitric oxide in the patient with megacolon in Chaga's disease

A fisiopatologia da Doença de Chagas ainda näo está completamente esclarecida. O óxido nítrico (NO) tem sido citado como neurotransmissor responsável pelo relaxamento do esfíncter interno do ânus no indivíduo normal. Neuronal nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato (NADPH) diaforase pode ser usado como marcador neuronal do NO. Objetivos: Examinar as alteraçöes nos neurônios produtores de NO do cólon de pacientes submetidos à ressecçäo por megacólon avançado e comparar com o intestino delgado dos mesmos pacientes e com controles. Métodos: Espécimes obtidos da ressecçäo do reto e biópsias extramucosas do intestino delgado de 11 pacientes chagásicos foram comparadas a 10 pacientes controles com câncer de cólon. Os tecidos foram fixados em soluçäo de Zamboni e submetidos à histoquímica para neurônios contendo NADPH diaforase. A reatividade foi avaliada utilizando-se uma escala de 0 a 4 nas diversas camadas da parede intestinal: musculatura lisa longitudinal (ML), plexo mioentérico (PM), musculatura lisa circular (MC), plexo submucoso (PSM), e mucosa (M). Resultados: Os casos controles mostraram os plexos mioentérico e submucoso bem corados e uma rica rede de terminaçöes nervosas nas camadas musculares. Os espécimes provenientes de doentes chagásicos revelaram uma diminuiçäo da reatividade e da coloraçäo em todas as camadas do intestino. De maneira geral, houve uma diminuiçäo estatisticamente significante nos neurônios contendo NADPH diaforase. O intestino delgado clinicamente näo envolvido também demonstrou diminuiçäo da reatividade, porém em menor grau. Conclusöes: A atividade da NADPH diaforase está diminuída em pacientes com megacólon avançado, especialmente no plexo mioentérico e na camada muscular lisa; 2. Houve também uma diminuiçäo da atividade neuronal do NO no jejuno clinicamente näo envolvido pela doença, mas em menor grau