Normalización de un ELISA de captura para la detección de anticuerpos de tipo IgM al virus de la parotiditis / Standardization of a capture ELISA for detection of IgM antibodies to parotiditis virus

Introducción: la parotiditis es una enfermedad contagiosa aguda, que afecta fundamentalmente a los niños en edad escolar entre 5 y 14 años y requiere de técnicas rápidas para su diagnóstico. Objetivos: se normalizó un ELISA de captura para la detección de anticuerpos de tipo IgM al virus de la parotiditis y se comparó con la inhibición de la hemaglutinación. Métodos: se estudiaron 177 monosueros y 285 pares de suero que procedían de la vigilancia seroepidemiológica al virus de la parotiditis, enviados por las diferentes provincias del país en el período comprendido entre enero 2004-diciembre 2006. Fueron analizados con la técnica de inhibición de la hemaglutinación y se emplearon en la normalización del sistema. Se determinó la precisión del ensayo y se realizó el estudio de la reactividad cruzada a otros agentes virales. Resultados: al evaluar el sistema, se obtuvieron valores de sensibilidad de 98,9 por ciento, especificidad 98,5 por ciento y concordancia 98,7 por ciento; se encontró una buena relación en los valores del coeficiente de variación intraensayo e interensayo en todos los casos estudiados. No se observó reactividad cruzada con otros agentes infecciosos. Conclusiones: este sistema demostró ser de gran utilidad para el diagnóstico temprano de la parotiditis, resultó ser más sensible y rápido que la inhibición de la hemaglutinación.

Background: parotiditis is an acute contagious disease that mainly affects children aged 5-14 years and requires rapid diagnostic techniques. Objectives: a capture ELISA was standardized to detect IgM antibodies to parotiditis virus and this method was compared with hemagglutination inhibition. Methods: one hundred and seventy seven monosera and 285 serum pairs sent by the different provinces from January 2004 to December 2006, as part of the seroepidemiological surveillance of the parotiditis virus, were studied. They were analyzed by the hemagglutination inhibition technique and used for the system standardization. Accuracy of the test was determined and the cross reactivity to other viral agents was also studied. RESULTS: the system evaluation yielded 98.9 percent sensitivity, 98.5 percent specificity and 98.7 percent concordance; good relation was found in the variation coefficient values intra-assays and inter-assay for all the studied cases. No cross reactivity was observed with other infectious agents. Conclusions: this system proved to be useful for the early diagnosis of parotiditis, more sensitive and rapid than the hemagglutination inhibition.

Antigenemia P24: correlación con algunos aspectos clínicos y epidemiológicos en 100 individuos cubanos infectados por VIH-1 / P-24 antigenemia: correlation with some clinical and epidemiological aspects in 100 HIV-infected Cuban subjects

A partir de 130 personas con infección por VIH-1 confirmada mediante serología se realizó una selección no probabilística de un grupo de 100 pacientes cubanos en diferentes estadios de la infección según la clasificación de los Centros para el Control de Enfermedades revisada en 1987. En cada caso se obtuvo información clínica y epidemiológica y se tomó muestra de sangre periférica para detección de antígeno p24 del VIH-1. Se correlacionó la frecuencia de detección y la concentración de la antigenemia p24 con los datos clínicos y epidemiológicos disponibles. Esta última resultó significativamente más frecuente en los pacientes con SIDA. No se observó diferencia, entre el tipo de enfermedades oportunistas diagnosticadas en el grupo de pacientes con antígeno p24 detectable y el grupo que resultó antígeno negativo; aunque en el grupo con antigenemia a concentraciones superiores a 100 pg/mL se diagnosticó con mayor frecuencia más de una enfermedad indicadora de SIDA simultáneamente. El antecedente de contacto sexual con varias personas antes infectadas con el VIH resultó significativamente más frecuente en el grupo de pacientes con antigenemia y se relacionó con menor intervalo de tiempo desde la fecha probable de contagio hasta la fecha de clasificación como enfermo de SIDA. Estos resultados se compararon con información de la literatura revisada

Inmunovaloración de anticuerpos IgM en muestras sospechosas de sarampión clínicamente

Se realiza el estudio de 60 sueros pareados sospechosos de Sarampión clínicamente llegados al Laboratorio Diagnóstico del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" entre enero y mayo de 1996, procedentes de la vigilancia seroepidemiológica de la vacuna triple viral (sarampion, rubéola y parotiditis), a los cuales se les realizó la detección de anticuerpos hemaglutinantes a sarampión y rubéola, así como de IgM, con el estuche diagnóstico Clark Laboratories INC Measles IgM ELISA. Los casos positivos se confirmaron por las técnicas de inmunofluorescencia indirecta-IgM y neutralización. Se obtuvieron por inhibición de la hemaglutinación, 3 casos positivos a sarampión y rubéola, los cuales negativos a IgM de sarampión y a los que se les determinaron anticuerpos a Epstein Barr, Citomegalovirus y al virus herpes simple mediante inmunifluorescencia indirecta (IFI) la capacidad de estos virus de inducir respuesta policlonal. Por medio del ELISA IgM Clark se detectaron 6 casos positivos los cuales resultaron negativos por IFI.

60 matched sera clinically syspicious of measles that were received at the Diagnostic Laboratory of the "Pedro Kourí" Tropical Medicine Institute between January and May, 1996, coming from the seroepidemiological surveillance of the MPR vaccine were studied. The detection of measles and rubella hemagglutinant antibodies, as well as of IgM, was carried out with the Clark Laboratories INC. Measles IgM ELISA diagnostic kit. The positive cases were confirmed by the IgM-indirect immunofluorescence and neutralization. 3 positive cases to measles and rubella, which were negative to measles IgM, were obtained by hemagglutination inhibition. Antibodies against Epstein Barr, cytomegalovirus and herpes simplex virus were also determined by indirect immunofluorescence (IIF) due to the capacity of these viruses to induces polyclonal responses. 6 positive cases, which were negative by IIF, were detected by means of the above mentioned diagnostic kit.

Toma de muestra en papel de filtro para la detección de anticuerpos IgM antivirus de la hepatitis A / Sample taking in filter paper for the detection of anti-HAV IgM antibodies

Se describe la utilidad de la toma de muestra total en papel de filtro para la detección de la IgM antivirus de la hepatitis A (VHA). Se compararon simultáneamente 168 muestras de suero y papel de filtro, en las 52 muestras que conformaron el grupo control, no se detectaron alteraciones en la especificidad del ELISA de captura de IgM, y en las 116 restantes, que procedían de pacientes con sospecha clínica de hepatitis viral aguda, se obtuvo una sensibilidad, una especificidad y una coincidencia de 100 porciento al comparar el papel de filtro con la dilución 1:500 y el suero. La correlación entre los valores de densidad óptica de los resultados positivos a la Igm anti-VHA entre el papel de filtro a la dilución 1:500 y el suero, fue de 0,895. Al aplicar este tipo de colecta de muestra en un grupo de enfermos hospitalizados, se obtuvo 100 porciento de coincidencia con la sospecha clínica; además, se demostró su utilidad en el diagnóstico de un brote de hepatitis viral. Nuestros resultados recomiendan la introducción de este tipo de recolección de muestras en el diagnóstico de la hepatitis A

Evaluacion de un Dot ELISA para la deteccion de antigeno de Rotavirus / Evaluation of a Dot Elisa for the detection of Rotavirus antigen

Se realizo la evaluacion de un Dot ELISA elaborado por el Centro de Ingenieria Genetica y Biotecnologia, para la deteccion de antigeno de Rotavirus. Se analizaron 100 muestras de heces fecales por esta tecnica y los resultados fueron comparados con los obtenidos con la electroforesis en gel de poliacrilamida, tecnica empleada en el diagnostico de Rotavirus. Se obtuvo una alta coincidencia, especificidad y sensibilidad entre estos

Diagnóstico serológico del VIH (1988-1989) / Serological diagnosis of HIV (1988-1989)

Realizamos la determinación de anticuerpos al virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), por la técnica de ELISA, a 27 652 muestras de suero de diferentes procedencias en el período comprendido entre los meses de enero de 1988 a noviembre de 1989. A las muestras 2 veces positivas se les efectuó la técnica de Western Blot. Encontramos 0,41 por ciento de positividad al virus en 1988 y 0,34 por ciento en 1989. La confirmación de los casos positivos por Western Blot fue estadísticamente significativa en 1989