Effect of sperm selection techniques in frozen/thawed cat spermatozoa on sperm motility analyzed by CASA system / Efecto de técnicas de selección espermática en espermatozoides congelados/descongelados de gato sobre la motilidad espermática analizada mediante sistema CASA

SUMMARY: Freeze/thawing process reduces sperm survival and fertilizing ability of cat spermatozoa, with sperm motility being the most sensitive sperm parameter altered, due to cryo-damage. In this context, swim-up and density gradient processing methods can help to recover high motile and normal spermatozoa. Maximizing the use of frozen semen sample is essential, especially in endangered felids or high value cats in which sample size, number of samples or access to semen collection is reduced. To our knowledge, there is no previous report describing an in depth analysis of sperm motility improvement, after sperm selection techniques in frozen cat semen. Accordingly, we evaluated the effect of percoll gradient (PG) and swim up (SU) sperm selection techniques on sperm motility parameters and sperm recovery rate in frozen/thawed spermatozoa of domestic cat. Next, we evaluated the individual effect of the cat over sperm motility after PG sperm selection of frozen/thawed spermatozoa. SU and PG improved significantly all sperm motility parameters of frozen/thawed cat spermatozoa compared to simple washing. However, PG allows better sperm recovery from the original frozen sample and works mostly homogeneously among individual cats. This new information could help to maximize the use of frozen semen in endangered felids or high value domestic cats for its subsequent application on in vitro fertilization and artificial insemination.

RESUMEN: El proceso de congelación/descongelación reduce la sobrevivencia espermática y la habilidad para fertilizar en los espermatozoides de gato, siendo la motilidad espermática el parámetro más sensiblemente alterado debido al daño por frío. En este contexto, los métodos de procesamiento de swim-up y gradiente de densidad pueden ayudar a recuperar los espermatozoides normales y de alta motilidad. Maximizar el uso de una muestra de semen congelado es esencial, especialmente en felinos amenazados o en gatos de alto valor en los cuales el tamaño de muestra, número de muestras o el acceso a la colecta de semen son reducidos. Para nuestro conocimiento, no hay reportes previos que describan un análisis profundo del mejoramiento de la motilidad luego de técnicas de selección espermática en semen congelado de gato. De acuerdo a esto, evaluamos el efecto de las técnicas de selección espermática gradiente de percoll (PG) y swim up (SU) sobre los parámetros de motilidad y porcentaje de recuperación de espermatozoides congelados/descongelados de gato doméstico. Luego, evaluamos el efecto individual del gato sobre la motilidad espermática luego de la selección espermática con PG en espermatozoides congelados/descongelados. SU y PG mejoraron significativamente todos los parámetros de motilidad espermática de los espermatozoides congelados/descongelados comparado con el lavado simple. Sin embargo, PG permitió una mejor recuperación de espermatozoides desde la muestra congelada original y funcionó en su mayoría de manera homogénea entre los gatos individualmente. Esta nueva información puede ayudar a maximizar el uso del semen congelado en felinos amenazados o en gatos de alto valor para su posterior aplicación en fecundación in vitro e inseminación artificial.

Role of vitamin D in the development of obesity / Rol de la vitamina D en el desarrollo de la obesidad

SUMMARY: Antecedents in the literature suggest that vitamin D (VD) play a role in overweigh/obesity. The present study evaluated the effect of VD deficiency diet intake and fat hight on overweight/obesity about white adipose tissue (WAT) and body mass (BM) gain. Animals were divided into four experimental groups according to the lipid and VD content of their diets; G1: CVD+ (C: control diet with VD+; n=5), G2: CVD- (control diet without VD-; n=5), G3: HFVD+ (high fat diet, with VD+; n=5), G4: HFVD- (HF diet without VD-; n=5). The diets were administered for three months and BW was monitored weekly. At the end of this period all animals were euthanized. Epididymal (EFM), retroperitoneal (RFM) and subcutaneous (SFM) fat mass were removed, weighted. At 12 weeks the body mass of the animals that were fed without VD- diets; G2: 507.60±17.31 g, and G4: 528.50±13.50 g were significantly higher (p < 0.05), than the counterparts G1: 485.0±11.29 g and G3: 521.20±26.20 g respectively. Similarly, the animals fed with VDdiets had a greater EFM and SFM (p < 0.05) compared with the respective controls (VD+). Nevertheless, the animals fed with high fat diet had equal RFM (G3: 12.2±4.10 g, G4: 12.88±2.3 g, p > 0.05). The results demonstrate that the nutrition of rats with diet deficient in VD and high fat, promotes overweight by increasing fat deposits, suggestion a cause-effect relationship between VD deficiency and overweight. These results suggest that VD deficiency increases the risk of visceral fat obesity in males.

RESUMEN: Los antecedentes de la literatura sugieren una relación entre la vitamina D (VD) y el sobrepeso/obesidad, sin embargo, causalidad de la relación no está clara. El presente estudio evaluó el efecto de la ingesta dietética deficiente de VD y alta en grasa sobre el tejido adiposo (TA) y la masa corporal (MC). Los animales se dividieron en cuatro grupos experimentales de acuerdo con el contenido de VD y lípido en la dieta; G1: CVD+ (C: dieta control con VD+; n = 5), G2: CVD- (dieta control sin VD-; n = 5), G3: HFVD+ (dieta alta en grasa, con VD+; n = 5), G4: HFVD- (dieta HF sin VD-; n = 5). Las dietas se administraron durante tres meses y MC se controló semanalmente. Al final de este período, los animales fueron sacrificados. La masa grasa epididimaria (MGE), subcutánea abdominal (MGS) y retroperitoneal (MGR) fueron diseccionadas y pesadas individualmente. A las 12 semanas, la MC de los animales alimentados con dietas sin VD-; G2: 507,60 ± 17,31 g, y G4: 528,50 ± 13,50 g fue significativamente mayor (p < 0,05), que sus homólogos G1: 485,0 ± 11,29 g y G3: 521,20 ± 26,20 g respectivamente. De forma similar, los G2 y G4 tuvieron una mayor MGE y MGS (p < 0,05) en comparación con los controles respectivos (VD+). Sin embargo, los animales alimentados con dieta alta en grasas tuvieron igual MGR (G3: 12,2 ± 4,10 g; G4: 12,88 ± 2,3 g, p > 0,05). Los resultados demuestran que la nutrición de ratas con dieta deficiente en VD y alta en grasa, promueve el sobrepeso/obesidad al exacerbar la ganancia de masa grasa en los diferentes depósitos de grasa, sugiriendo una relación causa-efecto entre la deficiencia de VD y el sobrepeso/obesidad. Estos resultados sugieren que la deficiencia de VD aumenta el riesgo de obesidad de grasa visceral en machos.

Evidencias inmunocitoquímicas sobre la presencia de la serpina CBG-símil en el sistema reproductor de la hembra en bovinos / Inmunocytochemistry evidence on the presence of the serpina CBG-like in the reproductive system of the female bovine

La reacción acrosomal es un proceso esencial para la fecundación en mamíferos. Recientemente, ha sido demostrado que la globulina que une corticoides (CBG), asociada a progesterona, induce la reacción acrosómica en niveles fisiológicos, in vitro. En la búsqueda de un componente morfológico in situ, utilizando rastreo inmunocitoquímico, nuestro grupo ha demostrado su presencia en células secretoras de ciertas regiones del sistema reproductor femenino humano. Si esta molécula, a travéz de la reacción acrosomal, esta involucrada en los mecanismos que llevan finalmente a la fecundación en humanos, parece razonable suponer que tiene una participación similar en otras especies mamíferas con procesos reproductivos básicamente comparables. El objetivo del presente trabajo fue determinar, a travéz de la inmunocitoquímica (ICQ), la presencia y distribución de la CBG-símil en el sistema reproductor de bovinos hembras, en los distintos estadios del ciclo reproductivo. Muestras de ovarios, útero, tuba uterinay células epiteliales tubáricas en cultivo fueron procesadas para la ICQ. Para ello, se utilizaron anticuerpos policionales contra CBG humana (comercial y otro producto de laboratorio) capaz de reconocer determinantes antigénicos comunes. La ICQ demostró, a nivel ovárico una reacción positiva preferentemente en células de folículos en estadios superiores de desarrollo. A nivel de la tuba uterina la inmunotinción se presentó claramente en células no ciliadas del epitelio tubárico. En el endometrio la reacción se concentró en las células epiteliales de las glándulas endometriales, sin observarse inmunorreacción a nivel estromal. La inmunotinción fue muy intensa en los períodos de mayor actividad estrogénica para, prácticamente, desaparecer en vacas preñadas. Las células de cultivo oviductales revelaron una población con reacción intensamente positiva y otra claramente negativa. Nuestros resultados nos permiten sugerir que el bovino existe la presencia de CBG-símil, la cual se distribuye en áreas morfológicas similares a las observadas en humano, y su concentración depende del ciclo ovárico. Tales elementos permitirían sugerir que esta particular molécula juega un rol similar en la especie bovina