Suscetibilidade da linhagem de células Vero a cepas vacinais do vírus do sarampo / Susceptibility of Vero cell line to vaccine strains of the measles vírus

A suscetibilidade da linhagem de células Vero ao vírus do sarampo é bem conhecida e sua utilizaçäo no controle da potência da vacina contra o sarampo é amplamente difundida. Com o objetivo de comparar a suscetibilidade de células Vero empregadas em titulaçöes, amostras provenientes de dois laboratórios controladores (Vero IB e Vero INCQS), foram testadas frente a três cepas vacinais: Moraten Schwarz e Biken CAM-70. Foram titulados 72 lotes de vacinas contra o sarampo, sendo 25 produzidos com a cepa Moraten, 24 com a cepa Schwarz e 23 com a cepa Biken CAM-70. A análise estatística dos resultados obtidos nas titulaçöes, feita através dos testes Limites para uma Média e "t" de Student, mostrou que para as cepas Moraten e Biken CAM-70, as diferenças de títulos näo foram estatisticamente significantes, o mesmo näo ocorrendo com a cepa Schwarz, para a qual as células Vero IB se mostraram mais sensíveis

Identificaçäo de micoplasmas pela inibiçäo de crescimento de amostras isoladas de culturas celulares / Identification of mycoplasthe growth inhibition of samples isolated from cell cultures

As culturas celulares devem ser continuamente monitoradas quanto à presença de micoplasmas, pois, embora às vezes eles passem despercebidos, podem causar alteraçöes cromossômicas, interferir na replicaçäo viral, na produçäo de anticorpos e interferon. A Organizaçäo Internacional em Micoplasmologia (IOM) recomenda o isolamento e a identificaçäo de micoplasmas, visando detectar as prováveis origens da infecçäo e melhorar a qualidade das culturas. Assim, foram analisadas pela inibiçäo de crescimento, 37 amostras pertencentes a 27 linhagens celulares contaminadas por micoplasmas. Em nenhuma amostra foi observada a ocorrência de duas espécies. Foram identificados 18 (48,65%) Mycoplasma arginini, 15 (40,55%) Acholeplasma laidlawii, dois (5,40%) Mycoplasma orale, sendo que duas amostras (5,40%) näo foram identificadas. Considerando as espécies caracterizadas na pesquisa, os autores sugerem: a) a adoçäo do teste de isolamento de micoplasmas em caráter de rotina; b) o aprimoramento das técnicas de assepsia e desinfecçao; c) a eliminaçäo da pipetagem bucal; d) a utilizaçäo de soros e de outros componentes de meios de cultura de qualidade certificada; e) o questionamento da presença de micoplasmas quando linhagens celulares säo permutadas pelas instituiçöes; f) a avaliaçäo cautelosa de resultados obtidos quando se utilizam culturas infectadas por esse microrganismo

Fotossensibilidade e termoestabilidade de vacinas contra o sarampo (CEPA BIKEN CAM-70) liofilizadas e/ou reconstituídas para administraçäo / Photosensitivity and stability of freeze-dried and reconstituted measles vaccines (Biken CAM-70 strain)

Três lotes de vacinas contra o sarampo, produzidos com a cepa de vírus Biken CAM-70, sob as formas liofilizada e reconstituída, pertencentes ao estoque da rede de vacinaçäo da Secretaria de Estado da Saúde de Säo Paulo, Brasil, foram submetidos a testes de sensibilidade a luz, a temperatura de 2 a 8§C, e de termoestabilidade (protegidos da luz) as temperaturas de 28, 36,5 e 45§C, objetivando verificar por quanto tempo retinham sua potência, isto é, a concentraçäo ideal recomendada para a cepa de vírus presente. A análise de retas de regressäo ajustadas demonstrou que, de modo geral, tanto os lotes de vacinas liofilizados como de potência no decorrer do experimento, a qual foi mais acentuada para vacinas expostas a luz. Reconstituídos e mantidos a 2 a 8§C, os lotes näo apresentaram homogeneidade no referente a sensibilidade a luz. Quando a fotossensibilidade de lotes de vacinas liofilizadas foi testada a 2 a 8§C eles mostraram-se mais sensíveis a degradaçäo térmica quando expostos a luz do que quando protegidos dela. Entretanto, expostos ou protegidos, a potência foi inferior a mínima aceita para a cepa Bikien CAM-70. As demais temperaturas, mesmo ao abrigo da luz, os dois lotes näo retiveram potência mínima. Quanto as vacinas do lote 3, conservadas a 2 a 8§C, mantiveram-se de acordo com os requerimentos mínimos de potência durante 60 dias quando protegidas da luz, e durante 40 dias quando expostas a ela. A degradaçäo térmica as demais temperaturas foi mais acentuada (28§C: 5 dias...

Caracterizaçäo bioquímica de soros de bezerros utilizados na manutençäo de culturas celulares usadas em virologia / Biochemical characterization of calf sera used for the growth of cell cultures used in virology

Oito lotes de soros de bezerros com idade maior ou menor de seis meses, usados para suplementar meios de cultivo de linhagens de células de uso difundido em virologia, foram testados quanto à sua capacidade promotora de crescimento (CPC) e classificados como bons promotores ou promotores pobres. Foram pesquisados parâmetros relacionados com macronutrientes para estabelecer o perfil bioquímico daqueles lotes. Os resultados obtidos podem ser considerados valores normais para animais aparentemente sadios. As variaçöes que ocorreram para um mesmo parâmetro bioquímico, entre os resultados da pesquisa e os de alguns estudos existentes na literatura, podem ser atribuídas à metodologia utilizada, à raça e idade dos animais, ou mesmo à própria dieta regional. A análise estatística, realizada pela aplicaçäo do teste "t" de Student aos valores das médias e dos desvios padräo, demonstrou que, com relaçäo às fraçöes séricas, näo ocorreram diferenças significantes entre soros de CPC celular boa ou pobre, considerando-se Tc=2,45, enquanto que, para soros animais maiores ou menores de seis meses, apenas os resultados relativos às fraçöes alfa e beta (t=2,68 e 2,61, respectivamente) apresentaram significância, sendo superiores ao t crítico. Ficou evidenciado que a avaliaçäo do conjunto de parâmetros bioquímicos pesquisados näo permite diferenciar soros pertencentes aos dois grupos de animais, isto é, identificar soros de boa ou de pobre CPC, ou soros de bezerros maiores ou menores de seis meses de idade

Micoplasma como contaminante de culturas celulares mantidas em laboratòrios de instituiçöes particulares e oficiais / Mycoplasma contamination of cell cultures maintained in laboratories of private, government and college institutions

Foi realizado estudo sobre a incidência de contaminaçäo por micoplasma em 29 tipos de linhagens celulares pertencentes a sete laboratòrios de instituiçöes particulares, oficiais e de ensino superior. Utilizando o método de cultivo direto e oito passagens seriadas em meios específicos, líquido e sòlido, verificou-se que, do total de 106 amostras, 48 apresentaram-se contaminadas por micoplasma (45,28%), o que constitui elevado índice de contaminaçäo. O fato indica que testes periòdicos para a determinaçäo da presença de micoplasma nas culturas em utilizaçäo é recomendável e que as culturas contaminadas devem ser eliminadas para evitar a disseminaçäo do microorganismo. Outras medidas preventivas devem ser adotadas, como a eliminaçäo da pipetagem bucal, execuçäo de técnicas assépticas mais estritas no manuseio das células, controle dos soros de origem animal, da tripsina e de outros componentes dos meios de cultura utilizados em cultura celular. O estudo mostrou que, ao invés das oito passagens seriadas propostas inicialmente, cinco foram suficientes para a detecçäo dos micoplasmas, o que representa economia de tempo e de materiais de custo elevado, reduzindo de 848 para 530 o número de passagens e a duraçäo do teste, de oito para cinco semanas .

Identificaçäo da microbiota fúngica de ambientes considerados assépticos / Identification of the fungic microbiota isolated in areas considered aseptic

Objetivou-se isolar e identificar a microbiota fúngica em ambientes considerados assépticos, através de exposiçöes com meios de cultivo adequados, em três épocas distintas do ano, antes e imediatamente após as manobras técnicas realizadas em três áreas de trabalho: ambiente aberto, ambiente fechado sem filtraçäo de ar e ambiente fechado com filtraçäo de ar, utilizadas em produçäo de imunobiológicos. Os meios ágar-Sabouraud e ágar-soja, enriquecidos com 0,2

Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis: estudo de possíveis efeitos sobre o vírus da vacina viva, atenuada contra o sarampo / Disposable vs. reusable hypodermic syringes: study of feasible effects upon the virus of the live, attenuated measles vaccine

Objetivou-se verificar entre seringas hipodérmicas descartáveis e reutilizáveis qual interfere mais com o vírus vivo presente na vacina contra o sarampo. Vacinas pertencentes a dois lotes foram reconstituídas com os dois tipos de seringas, de modo a formarem dois pools distintos, mantidos à temperatura de +2 a+8-C e protegidos da luz. De cada lote foram realizadas, no mínimo, seis titulaçöes em paralelo, com amostragem a cada hora, de zero a seis horas após reconstituiçäo. A análise estatística dos resultados obtidos nas titulaçöes, feita pelo sistema de retas de regressäo demonstrou que embora as vacinas manipuladas com ambos os tipos de seringas apresentassem um decréscimo de título estatisticamente significativo com o decorrer das horas, ele foi bem mais acentuado para as vacinas reconstituídas com seringas reutilizáveis. A menor interferência das descartáveis no título da vacina viva, atenuada contra o sarampo, demonstrou que a preconizaçäo e uso desse tipo de seringas pela Secretaria de Estado da Saúde de Säo Paulo é o ideal e recomendável, por preservar mais a vacina desde a reconstituiçäo até sua administraçäo e, conseqüentemente, a sua eficácia na prevençäo dessa infecçäo

Avaliaçäo das condiçöes de estocagem de vacinas vivas, atenuadas contra o sarampo, em postos de vacinaçäo credenciados e em centros de saúde do Estado de Säo Paulo (Brasil) / Evaluation of storage conditions of live, attenuated vaccines against measles, in authorized vaccination centers and health services of the State of Säo Paulo (Brazil)

Para avaliar as condiçöes de estocagem de vacinas vivas, atenuadas contra o sarampo, da rede de vacinaçäo do Estado de Säo Paulo (Brasil), foram visitados 71 Postos de Vacinaçäo Credenciados particulares (PVC), assim como 117 Centros de Saúde oficiais (CS), sobre os quais interessava saber a respeito da qualidade da estocagem a frio. Os parâmetros adotados foram: a) temperatura das geladeiras de uso (+2 a +8-C) e de estoque (< +8-C); b) validade do produto; c) título das vacinas conservadas nestas geladeiras, avaliado pela inoculaçäo de diluiçöes das amostras de vacinas em células Vero; d) proteçäo à luz. dos CS pesquisados, 85,33% apresentaram geladeiras com temperatura de acordo com a recomendada e 100% das vacinas neles estocadas com título e validade satisfatórios. Nos PVC foram encontrados, com maior frequência, lotes de vacina fora do prazo de validade (14,49%), com títulos abaixo do mínimo requerido (3,53%) e geladeiras de uso e de estoque com temperaturas inadequadas (33,80%). Necessário se faz que as condiçöes de estocagem das vacinas contra o sarampo (temperatura e proteçäo à luz), prevalentes no momento, sejam melhoradas e que as bulas passem a acompanhar o produto a eles entregue, para que os responsáveis pela vacinaçäo obedeçam as recomendaçöes do laboratório producto com relaçäo às condiçöes de estocagem, validade e administraçäo do imunobiológico, uma vez que a pesquisa revelou que estas näo säo observadas com o rigor necessário

Estudo comparativo de meios de cultura recomendados para testes de esterilidade de produtos biológicos / Comparative study of culture media recommended for sterility tests of biologic products

A sensibilidade do caldo de caseína-soja foi comparada à dos meios líquidos de tioglicolato de Sabouraud, usualmente recomendados para testes de esterilidade de produtos biológicos. Os resultados demonstraram que o caldo de caseína-soja foi täo efetivo quanto o tioglicolato líquido na detecçäo de bactérias aeróbicas. Com relaçäo aos bolores e leveduras, o caldo de caseína-soja apresentou a mesma eficiência do meio de Sabouraud líquido. O caldo de caseína-soja, usado em paralelo aos meios tioglicolato e Sabouraud, proporciona maior confiabilidade aos testes de esterilidade de meios de cultura usados em cultura celular, vacinas virais e de imunológicos em geral

Reaçöes locais e níveis de antitoxina circulante decorrentes de administraçäo do toxóide tetânico: estudo comparativo entre ped-o-jet e seringa hipodérmica / Local reactions and antitoxin circulating levels induced by the administration of tetanus toxoid: comparative study between ped-o-jet and hypodermic syringe

Com o objetivo de comparar reaçöes locais e conversäo sorológica apresentadas por adultos que receberam o toxóide tetânico através de Ped-o-Jet (via subcutânea) ou de seringa hipodérmica (via intramuscular), o toxóide foi administrado a 472 recrutas do Exército. Em observaçöes realizadas 4 a 24 horas após a vacinaçäo verificou-se que as reaçöes locais dos indivíduos vacinados com Ped-o-Jet eram significativamente mais frequentes e mais intensas do que aquelas dos vacinados com seringa hipodérmica, näo tendo ocorrido, entretanto, reaçöes graves. A conversäo sorológica dos näo imunes vacinados com Ped-oJet ocorreu numa frequencia maior do que nos indivíduos vacinados com seringa hipodérmica. Conclui-se portanto, que o Ped-o-Jet pode ser utilizado em campanhas de vacinaçäo em massa contra o tétano, embora a via de administraçäo preferencial, até o momento, seja a intramuscular