Diagnosis of arboviruses using indirect sandwich IgG ELISA in horses from the Brazilian Amazon

The Amazon as a whole is the largest reservoir of arboviruses worldwide, while the Brazilian Amazon hosts the largest variety of arboviruses isolated to date. In this study, the results of an indirect sandwich IgG ELISA, standardized for 19 arbovirustypes circulating among horses in Brazilian Amazon, were compared to results of the hemagglutination inhibition test. A screening test assessed the conditional probability distribution and a Pearson linear correlation test determined the correlation strength among the absorbance values recorded for viruses from the same family.

Diagnosis of arboviruses using indirect sandwich IgG ELISA in horses from the Brazilian Amazon

The Amazon as a whole is the largest reservoir of arboviruses worldwide, while the Brazilian Amazon hosts the largest variety of arboviruses isolated to date. In this study, the results of an indirect sandwich IgG ELISA, standardized for 19 arbovirustypes circulating among horses in Brazilian Amazon, were compared to results of the hemagglutination inhibition test. A screening test assessed the conditional probability distribution and a Pearson linear correlation test determined the correlation strength among the absorbance values recorded for viruses from the same family.

Detection of arboviruses of public health interest in free-living New World primates (Sapajus spp.; Alouatta caraya) captured in Mato Grosso do Sul, Brazil

Introduction A sero-epidemiological survey was undertaken to detect the circulation of arboviruses in free-living non-human primates. Methods Blood samples were obtained from 16 non-human primates (13 Sapajus spp. and three Alouatta caraya) that were captured using terrestrial traps and anesthetic darts in woodland regions in the municipalities of Campo Grande, Aquidauana, Jardim, Miranda and Corumbá in the State of Mato Grosso do Sul, Brazil. The samples were sent to the Instituto Evandro Chagas (IEC) in Ananindeua, Pará, Brazil, to detect antibodies against 19 species of arboviruses using a hemagglutination inhibition test (HI). Results Of the 16 primates investigated in the present study, five (31.2%) were serologically positive for an arbovirus. Of these five, two (12.5%) exhibited antibodies to the Flavivirus genus, one (6.2%) exhibited a monotypic reaction to Cacipacoré virus, one (6.2%) was associated with Mayaro virus, and one (6.2%) was positive for Oropouche virus. Conclusions Based on the positive serology observed in the present study, it was possible to conclude that arboviruses circulate among free-living primates. The viruses in the areas studied might have been introduced by infected humans or by primates from endemic or enzootic areas. Studies of this nature, as well as efficient and continuous surveillance programs, are needed to monitor viral activities in endemic and enzootic regions. .

Vigilância sorológica para arbovírus em Juruti, Pará, Brasil / Serological survey for arboviruses in Juruti, Pará State, Brazil

O objetivo foi avaliar a prevalência de anticorpos para arbovírus na área de influência do Projeto Juruti antes da exploração mineral local. Foram examinados 1.597 soros humanos e 85 de animais silvestres. A pesquisa de anticorpos foi realizada pelo teste de inibição da hemaglutinação contra antígenos dos arbovírus mais prevalentes na Amazônia brasileira e IgM-ELISA para dengue e febre amarela. Soros humanos inibidores da hemaglutinação positivos para Mayaro e Oropouche foram também testados por IgM-ELISA. Anticorpos inibidores da hemaglutinação para alfavírus, orthobunyavirus e/ou flavivírus foram detectados, sendo 28,7 por cento reações monotípicas. Infecções recentes para Oropouche (n = 23), Mayaro (n = 5), e dengue (n = 20) foram confirmadas por IgM-ELISA. A prevalência de anticorpos inibidores da hemaglutinação em soros de animais silvestres foi de 8,2 por cento para flavivírus. Os resultados obtidos mostram que houve circulação ativa dos vírus Mayaro, Oropouche e dengue no período do estudo em humanos em Juruti, Pará, Brasil, e de diversos arbovírus em animais silvestres, indicando presença desses vírus em áreas do Município de Juruti.

This study aimed to measure the prevalence of antibodies to arboviruses in the area affected by the Juruti Project before local mining operations. A total of 1,597 human and 85 wild animal sera were examined, using the hemagglutination inhibition test against 19 antigens from the most prevalent arboviruses in the Brazilian Amazon and IgM-ELISA for dengue and yellow fever. Positive sera for Mayaro and Oropouche viruses were also tested by IgM-ELISA. Prevalence of hemagglutination inhibition antibodies to alphaviruses, flaviviruses, and orthobunyaviruses in humans was 28.7 percent, while for wild animals it was 8.2 percent for flaviviruses. Recent infections based on presence of IgM was confirmed for Mayaro (n = 5), Oropouche (n = 23), and dengue (n = 20). The results showed active circulation of the dengue, Mayaro, and Oropouche viruses in Juruti, as well as flaviviruses in wild animals, suggesting the circulation of these viruses in the Municipality of Juruti.

Dengue virus type 3 in Boa Vista, Northern Brazil

Casos de doença febril aguda ocorridos em Boa Vista, estado de Roraima, Brasil foram investigados em julho de 2005. Amostras de sangue (n igual a 142) foram obtidas de pacientes clinicamente suspeitos de febre do dengue (FD). A tentativa de isolamento viral foi realizada em células C6/36 para pacientes com menos de cinco dias de doença (n igual a 96). As cepas isoladas foram identificadas pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI) utilizando anticorpos monoclonais, bem como pela técnica de RT-PCR. Amostras de soro foram testadas pelo método de inibição da hemaglutinação (IH) e confirmadas pelo IgM-ELISA. O vírus dengue 3 (VDEN-3) foi isolado e detectado po RT-PCR em 41 pacientes. A região E de sete cepas foi sequenciada, sendo as mesmas identificadas como pertencentes ao genótipo III. Pelo teste de IH, 98 amostras de soros foram positivas para anticorpos IH para o vírus da Dengue, sendo os resultados confirmados pela detecção de anticorpos IgM para dengue. Clinicamente, todos os pacientes mostraram quadro de FD, sendo todas as faixas etárias afetadas independentes do sexo. A epidemia de dengue ocorrida em Roraima foi causada pelo VDEN-3, genótipo III, genótipo este que circula nas Américas desde 1994.

The Acre Project: the epidemiology of malaria and arthropod-borne virus infections in a rural Amazonian population

The authors describe the baseline malaria prevalence and arbovirus seroprevalence among 467 subjects in an ongoing cohort study in rural Amazonia. Most subjects (72.2 percent) reported one or more previous episodes of malaria, and 15.6 percent had been hospitalized for malaria, but only 3.6 percent of individuals five years or older had malaria parasites detected by microscopy (10 with Plasmodium vivax and 4 with P. falciparum). Antibodies to Alphavirus, Orthobunyavirus, and/or Flavivirus were detected by hemagglutination inhibition (HI) in 42.6 percent of subjects aged five years or older, with a higher seropositivity rate among males (49.2 percent) than females (36.2 percent). Since 98.9 percent of subjects had been immunized for yellow fever, the presence of cross-reactive antibodies to dengue and other Flaviviruses cannot be ruled out, but at least 12 subjects (3.3 percent) with IgM antibodies to dengue virus detected by ELISA had a putative recent exposure to this virus.

Pesquisa de anticorpos contra arbovírus e o vírus vacinal da febre amarela em uma amostra da populaçäo de Rio Branco, antes e três meses após a vacina 17D / Serologic survey for yellow fever and other arboviruses among inhabitants of Rio Branco, Brazil, before and three months after receiving the yellow fever 17D vaccine

Em amostra da populaçäo da cidade de Rio Branco (Acre), foi pesquisada a freqüência de portadores de anticorpos contra os arbovírus, mais prevalentes na regiäo amazônica, e o vírus vacinal da febre amarela, antes e após a imunizaçäo com a vacina 17D. Das 390 pessoas incluídas na primeira fase do estudo (agosto de 1999), somente 190 compareceram em janeiro de 2000, três meses após a aplicaçäo da vacina 17D (outubro de 1999). Nas amostras da primeira fase, as freqüências de soropositivos (IH) para os vírus estudados foram: 17D (27,2 por cento); Dengue-1 (0,3 por cento); Dengue-2 (4,1 por cento); Dengue-3 (0 por cento); Dengue-4 (0 por cento), entre outros 8 vírus. Nas amostras séricas de janeiro (2000), a soroconversäo para o 17D foi de 89,7 por cento (130/145) e 3,2 por cento (6/190) passaram a ter anticorpos contra o sorotipo 3 (DEN-3). Em conclusäo, por conta da elevada taxa de cobertura vacinal e de soroconversäo há reduçäo significativa do risco de urbanizaçäo do vírus da febre amarela na cidade de Rio Branco, apesar de näo ser desprezível a possibilidade de uma nova epidemia de dengue, pelo DEN-3, a semelhança da registrada em 2000 e 2001 pelos sorotipos 1 e 2.

Yellow fever virus isolated from a fatal post vaccination event: an experimental comparative study with the 17DD vaccine strain in the Syrian hamster (Mesocricetus auratus) / Vírus da febre amarela isolado de acidente pós-vacinal fatal: estudo experimental comparativo com a amostra vacinal 17DD em Syrian hamsters (Mesocricetus auratus)

In order to investigate the pathogenicity of the virus strain GOI 4191 that was isolated from a fatal adverse event after yellow fever virus (YFV) vaccination, an experimental assay using hamsters (Mesocricetus auratus) as animal model and YFV 17DD vaccine strain as virus reference was accomplished. The two virus strains were inoculated by intracerebral, intrahepatic and subcutaneous routes. The levels of viremia, antibody response, and aminotransferases were determined in sera; while virus, antigen and histopathological changes were determined in the viscera. No viremia was detected for either strain following infection; the immune response was demonstrated to be more effective to strain GOI 4191; and no significant aminotransferase levels alterations were detected. Strain GOI 4191 was recovered only from the brain of animals inoculated by the IC route. Viral antigens were detected in liver and brain by immunohistochemical assay. Histothological changes in the viscera were characterized by inflammatory infiltrate, hepatocellular necrosis, and viral encephalitis. Histological alterations and detection of viral antigen were observed in the liver of animals inoculated by the intrahepatic route. These findings were similar for both strains used in the experiment; however, significant differences were observed from those results previously reported for wild type YFV strains.

Visando investigar a possível patogenicidade do vírus isolado (GOI 4191) de um evento adverso fatal pela vacinação antiamarílica, realizou-se um ensaio experimental em Syrian hamsters (Mesocricetus auratus), usando-se a cepa vacinal 17DD como parâmetro. As amostras virais foram inoculadas por via intracerebral, intra-hepática e subcutânea. Nos soros foram determinados níveis de viremia, resposta imune e aminotransferases, e nas vísceras a presença de vírus, antígeno e lesões teciduais. Não se detectou viremia para as duas amostras, a resposta imune foi maior para GOI 4191, e as aminotransferases não apresentaram alterações compatíveis com danos hepáticos. Nos animais inoculados por via intracerebral o vírus foi recuperado somente a partir do cérebro, sendo o antígeno viral detectado, por imuno-histoquímica, no cérebro e fígado. Infiltrado inflamatório e corpúsculos acidófilos foram observados no fígado e lesões tipo encefalite viral no sistema nervoso central. Alterações histológicas e antígeno viral foram observados, também, no fígado dos animais infectados por via intra-hepática, e ausentes naqueles inoculados por via subcutânea. Os resultados foram similares para as duas amostras testadas, entretanto distintos daqueles relatados na literatura para cepas silvestres do vírus amarílico.

Estudo comparattivo dos resultados obtidos pelos métodos de imunocromatografia e o ELISA para detecçao de anticorpos IgM e IgG antivírus dengue / Comparative study of the results obtained by immunocromatografic methods and Elisa IgM and IgG antibodies detection anti dengue virus

O dengue constitui serio problema de saúde pública do mundo, especialmente na maioria dos paises tropicais. No Brasil, o diagnóstico sorológico é realizado peolo ensaio inmunoenzimático para captura de IgM (MAC-ELISA) e IgG (ELISA) IgG) anti-dengue, entranto inúmeros Kits estao disponíveis no mercado. Nesse estudo o Kit Dengue-Teste Rápido em Tira (KD-TRT) é comparado com as técnicas padroes. Foram utilizadas 72 soro, incluindo soros de pacientes com infeccao confirmada ou presuntiva por dengue, com infeccao por febre amarela e rubéola...

Estudo comparativo dos resultados obtidos pelos métodos de imunocromatografia e o ELISA para detecção de anticorpos IgM e IgG anti-vírus dengue / Comparative study of the results obtained by immunocromatography methods and ELISA IgM and IgG antibodies detection antidengue virus

O dengue constitui sério problema de saúde pública no mundo, especialmente na maioria dos países tropicais. No Brasil, o diagnóstico sorológico é realizado pelo ensaio imunoenzimático para captura de IgM (MAC-ELISA) e IgG (ELISA IgG) anti-dengue, entretanto, inúmeros kits estão disponíveis no mercado. Nesse estudo, o Kit Dengue - Teste Rápido em Tira (KD-TRT) é comparado com as técnicas padrões. Foram utilizadas 72 soros, incluindo soros de pacientes com infecção confirmada ou presuntiva por dengue, com infecção por febre amarela e rubéola, bem como, de pacientes com sorologia dengue negativa. O KD-TRT apresentou sensibilidade de 54,2 porcento e especificidade de 100 porcento mediante análise dos soros de pacientes com ou sem dengue. Quando incluídas as amostras de febre amarela e rubéola, o KD-TRT apresentou os índices de 54,2 porcento e 91,2 porcento de sensibilidade e especificidade, respectivamente. Os resultados da detecção de anticorpos IgG do KD-TRT foram correlacionados com os resultados do ELISA IgG. O ELISA IgG detectou 20 (38,5 porcento) reações primárias, 17 (32,7 porcento) reações secundárias e 15 (28,8 porcento) reações negativas, enquanto que o KD-TRT detectou 11 (21,2 porcento), 7 (13,5 porcento) e 34 (65,3 porcento), respectivamente. O KD-TRT apresentou menor sensibilidade e especificidade em relação ao MAC-ELISA e baixa correlação de resultados com ELISA IgG.

Diagnóstico sorológico de infecções por dengue e febre amarela em casos suspeitos no Estado do Pará, Brasil, 1999 / Serological diagnosis of dengue and yellow fever infections in suspected cases from Pará State, Brazil, 1999

De junho a dezembro de 1999, foram coletadas 785 amostras de soro de pacientes com suspeita clínica de dengue e/ou febre amarela. Os pacientes foram atendidos nas unidades de saúde distribuídas pelas seis mesorregiöes do Estado do Pará, Brasil. As amostras de soro foram testadas pelo método de inibiçäo da hemaglutinaçäo para detecçäo de anticorpos para Flavivirus e pelo ensaio imunoenzimático para detecçäo de imunoglobulina M para dengue e febre amarela. Das amostras coletadas, 563 (71,7 por cento) foram positivas pelo IH, e dentre estas 150 (26,6 por cento) foram positivas pelo ELISA-IgM. O vírus dengue foi responsável pela maioria das infecçöes recentes em todas as mesorregiöes e os casos de febre amarela detectados neste estudo foram restritos às mesorregiöes Marajó e Sudeste

Arboviroses no Estado do Amazonas - uma visäo histórica / Arboviruses in the State of Amazonas - a historical view

Aborda, com enfoque histórico, episódios causados por arbovírus associados com doença no homem e decorrentes de projetos de desenvolvimento realizados em Manaus e alguns municípios do Estado do Amazonas.

Infeccao humana adquirida em laboratorio causada pelo virus SPH 114202 (Arenavirus: familia Arenaviridae): aspectos clinicos e laboratoriais / Laboratory acquired infection by the virus SP H 114202 (Arenavirus : Arenaviridae) : clinical and laboratory findings

Sao descritos os achados clinico-laboratoriais da infeccao acidental pelo virus SP H 114202 (Arenavirus, familia Arenaviridae), um virus novo causador de febre hemorragica humana. O paciente, tecnico de laboratorio, apresentou quadro febril por 13 dias. A doenca cursou com febre elevada (39ºC) diaria, cefaleia, calefrios e mialgias por 8 dias. A partir do 3§ dia surgiram nauseas, vomitos alimentares e anorexia e no 10§ dia, epigastralgia, diarreia e gengivorragia....