ABSTRACT
Debido al alto grado de contaminación por plaguicidas de productos agrícolas y al alto costo que implica su detección se consideró importante optimizar el método de escrutinio de inhibición de colinesterasas humanas en presencia de extractos vegetales. Se demostró que las suspensiones de glóbulos rojos y plasma son estables al menos por tres meses si se mantienen entre 4 y 8 °C. El reactivo de color es estable por al menos dos años y medio en refrigeración y los sustratos de ambas colinesterasas son estables congelados al menos por dos años. La mezcla del extracto vegetal y los glóbulos rojos o plasma debe incubarse 90 minutos a 37 °C para determinar los porcentajes de inhibición enzimática. Se determinó que los porcentajes de inhibición superiores a 16% en la plasmática y a 21% en la eritrocítica indican presencia de plaguicida en los vegetales. Este método de screening optimizado para detectar la presencia de carbamatos y organofosforados tiene ventaja sobre otros por su bajo costo, facilidad y rapidez de análisis sin requerir de equipo costoso y poco versátil. Esta metodología no cuantifica ni identifica el plaguicida presente pero permite diferenciar entre organofosforados y carbamatos si el periodo de incubación del vegetal con eritrocitos o plasma se prolonga por 24 horas a 20-25 °C.
Optimization of the screening method of inhibition of human cholinesterases is considered important because of the high contamination rate of agricultural products with pesticides and its high detection cost. It has been demonstrated that erythrocytes and plasma are stable at least for three months at 4-8 °C. The colour reaction reagent is stable for at least two and a half years at 4-8 °C and the substrate for both cholinesterases is stable when frozen, at least for two years. The solution of vegetable extract and erythrocytes or plasma must be incubated 90 minutes at 37 °C in order to determine the percentages of enzymatic inhibition. It was established that inhibition percentages higher than 16% for the plasmatic solution, and 21% for the erythrocytic solution mean that pesticide is present in vegetables. The advantages of this optimized screening method for the detection of carbamates and organophosphates in vegetables are its low cost and its easy and quick analysis without the need of expensive equipment. This method does not quantify or identify the pesticide, but rather it differentiates organophosphates from carbamates if the incubation time of the vegetable extract with erythrocytes or plasma is maintained at 20- 25 °C for 24 hours.