Morfometria nuclear como técnica complementar na graduação citológica do carcinoma de mama / Nuclear morphometry with complementary technique in cytological grading of breast tumors cells

Introdução: A análise morfométrica dos parâmetros nucleares, tamanho, forma e aspectos da cromatina, mostra-se útil para diagnosticar tumores malignos. O aspirado citológico coletado por agulha fina produz esfregaços suficientemente delgados para a determinação de dimensões nucleares facilmente. Objetivo: Comparar os aspectos morfométricos dos núcleos das células do aspirado proveniente de nódulos de mama. Método: Esfregaços do aspirado provenientes de 71 biópsias de nódulos de mama e determinados como benignos ou malignos, coletados por agulha fina, foram submetidos à coloração de Feulgen e as suas imagens digitais analisadas utilizando-se a Imagilab® 2,3 (Softium Informatica Ltda.), ambientado no sistema operacional WindowsTM 98 SE. Resultados: Dentre os nódulos estudados, 20 foram diagnosticados como benignos e 51 como malignos (8 GI, 23 GII e 20 GIII de acordo com o Sistema de Classificação de Guilford e Robinson). A análise morfométrica da coloração de Feulgen determinou um valor médio para os nódulos benignos de 101,6 e valor médio de 114,3 para os nódulos malignos, respectivamente. A análise morfométrica da coloração de Papanicolaou determinou um valor médio de 103,5 para GI, 131,7 para GII e 98,4 para GIII, respectivamente. Houve uma diferença estatisticamente significante entre o valor médio morfométrico de nódulos benignos e malignos e valor médio entre GI e GII, GII e GIII, mas não entre GI e GIII. Conclusões: A análise morfométrica nuclear dos aspirados de nódulo de mama é um método simples, confiável e complementar, que permitiu distinguir as lesões benignas das lesões malignas da mama.

Introduction: The morphometrical analysis of nuclear parameters, such as size, shape and chromatin features, has shown to be useful for diagnosing malignant tumors. Cytological aspirate collected with fine needle, in turn, provides smears thin enough for easily determining nuclear dimensions. Objective: Compare morphometrical features of cell nuclei in aspirate from breast nodules. Method: Fine needle aspiration smears from 71 breast nodules were analyzed and determined as benign or malignant. They were then Feulgen-stained and had their digital images analyzed using the Imagilab® software package (Softium Informatica Ltda.) run on Windows? 98SE. Results: Among the nodules studied, 20 were diagnosed as benign and 51 as malignant (8 GI, 23 GII and 20 GIII according to Guilford and Robinson Classification System). The morphometrical analysis of the Feulgen-stained material digital images determined an average value for benign nodules of 101.6 and an average value of 114.3 for malignant nodules. The Papanicolaou stain morphometrical analysis determined an average value of 103.5 for GI, 131.7 for GII and 98.4 for GIII. There was a statistically significant difference between the morphometrical average values for benign and malignant nodules, and between GI and GII, and GII and GIII, but not GI and GIII average values. Conclusion: The nuclear morphometry of breast nodule aspirate is a simple, reliable and complementary method that allowed distinguishing benign from malignant injuries of the breast.

Study on the vaginal smear of rats submitted to autologous ovarian transplant: impact of remote ischemic preconditioning / Estudo do esfregaço vaginal de ratas submetidas a transplante autólogo de ovário: impacto do precondicionamento isquêmico remoto

PURPOSE: To evaluate the remote ischemic preconditioning (R-IPC) impact on the quality of the ovarian graft by means of vaginal smear of transplanted rats. METHODS: Sixty rats were used divided in six groups: Control; Fresh transplant (TxF); Cryopreserved transplant (TxC); R-IPC; R-IPC + fresh transplant (TxF+R-IPC); R-IPC + cryopreserved transplant (TxC+R-IPC). R-IPC was performed in the common iliac artery. Autologous ovarian tissue was implanted integrally in the retro peritoneum. On the first PO day, vaginal smear collection was daily initiated. After 30 days, the PO day when the estrous cycle was re-initiated was considered for analysis as well as the estrous days and the number of estrous cycles. RESULTS: R-IPC showed a tendency to an early estrus re-initiation (p>0.05) as well as increase the number of cycles in the fresh transplanted group while in the cryopreserved transplant the number of cycles was similar, regardless of the stimulus R-IPC (p>0.05). The animals which had undergone fresh grafts had a longer estrous period than the ones which had undergone cryopreserved grafts, with or without R-IPC (p<0.05). CONCLUSION: R-IPC promoted earlier re-initiation of ovarian activity in the PO and greater estrous frequency, with more consistent results in the fresh grafts than in the cryopreserved ones.

OBJETIVO: Avaliar o impacto do precondicionamento isquêmico remoto (PCI-R) na qualidade do enxerto ovariano através dos esfregaços vaginais dos animais transplantados. MÉTODOS: Foram utilizadas 60 ratas, distribuídas em seis grupos de estudo: Controle; Transplante fresco; Transplante criopreservado; PCI-R; PCI-R + Transplante fresco; PCI-R + Transplante criopreservado. O PCI-R foi realizado na artéria ilíaca comum. O tecido ovariano foi implantado íntegro no retroperiônio. No 1º dia de pós-operatório (PO) foram coletados esfregaços vaginais diariamente. Após 30 dias foram considerados para análise o dia de PO de retorno do estro, assim como o número de dias em estro e de ciclos estrais. RESULTADOS: PCI-R mostrou tendência em reinício mais precoce do cilo estral (p>0,05), assim como aumento no número de cilcos estrais nos grupos com transplante fresco enquanto que no criopreservado o número de ciclos foi semelhante, independente do PCI-R (p>0,05). Os animais que receberam enxertos frescos apresentaram mais dias na fase estro do que os criopreservados, com ou sem PCI-R. CONCLUSÃO: O PCI-R promoveu retorno mais precoce da atividade ovariana no PO e maior freqüência de estro, sendo os resultados mais consistentes nos enxertos frescos do que nos criopreservados.

Indirect evaluation of estrogenic activity post heterotopic ovarian autograft in rats / Avaliação indireta da atividade estrogênica após transplante heterotópico de ovário em ratas

PURPOSE: To morphologically evaluate the estrogenic effect on the uterus and vagina of rats submitted to ovarian autografts. METHODS: Twenty Wistar EPM-1 adult rats were bilaterally ovariectomized, followed by ovarian transplants in retroperitoneal regions. The animals were divided in four groups of five animals, according to the day of euthanasia: G4, G7, G14 and G21, corresponding to the 4th, 7th, 14th and 21st day after surgery, respectively. Vaginal smears were collected from the first day of surgery until euthanasia day. After that, the vagina and uterus were removed, fixed in 10 percent formaldehyde and submitted to histological analysis and stained with hematoxiline and eosine. RESULTS: All animals showed estrous cycle changes during the experiment. In 4th day, the uterus showed low action of estrogen with small number of mitosis and eosinophils as well as poor development. On the 7th day, the endometrium was atrophic without mitotic signals and presented a small number of eosinophils. On the 14th and 21th days the histological findings were similar, with the presence of mitosis in the endometrial glands and intense leucocyte infiltration with a large number of eosinophils. Morphometric results showed that the endometrial and myometrial thickness as well as the number of eosinophils presented the highest values during the 14th and 21th days of the evaluation. The 7th day group also presented the lowest eosinophil numbers. Vaginal epithelium features were: 4th and 7th day groups presented non-keratinized stratified epithelium with 5 and 2 cell layers, respectively. The 14th and 21st day groups presented non-keratinized stratified epithelium with 14 and 15 cell layers. CONCLUSION: Experimental ovarian autografts in the evaluated organs presented maximum estrogen activity after the 21st day of surgery, according to morphological and morphometric data.

OBJETIVO: Avaliar morfologicamente a atividade estrogênica no útero e vagina de ratas submetidas a transplante autólogo de ovário. MÉTODOS: Foram utilizadas 20 ratas adultas, Wistar EPM-1, submetidas à ooforectomia bilateral seguida de transplante de ovário em retroperitônio, distribuídas em grupos, conforme a data pré-estabelecida para eutanásia, com cinco animais cada: G4, G7, G14 e G21 - eutanásia no 4º, 7º, 14º e 21º dia de pós-operatório, respectivamente. No 1º dia após a cirurgia foi iniciada coleta de esfregaço vaginal diariamente até o dia pré-estabelecido para eutanásia. Após a eutanásia foi realizada exérese em bloco da vagina e útero, que foram fixados em formol 10 por cento para processamento histológico e coloração pela Hematoxilina-Eosina. RESULTADOS: Todos os animais mostraram alterações do ciclo estral no decorrer dos dias do experimento. No 4º dia, o útero mostrava sinais de baixa atividade estrogênica, o endométrio apresentava poucas figuras de mitose, pouco desenvolvimento e pequena quantidade de eosinófilos. Já no 7º dia, o endométrio encontrava-se atrofiado, sem atividade mitótica e com raros eosinófilos. No 14º e 21º dias os achados foram semelhantes, com presença de mitose nas glândulas endometriais e intenso infiltrado leucocitário, com predomínio de eosinófilos. Os resultados da morfometria mostraram que tanto as espessuras endometrial e miometrial quanto o número de eosinófilos foram maiores no 14º e 21º dias de avaliação, com menores valores no 7º dia. As características do epitélio vaginal foram: epitélio pavimentoso não queratinizado no 4º e 7º (com cerca de cinco e duas camadas celulares, respectivamente) e pavimentoso queratinizado em no 14º e 21º dias (com cerca de 14 e 15 camadas celulares, respectivamente) CONCLUSÃO: O transplante experimental autólogo de ovário manteve a atividade estrogênica nos órgãos avaliados, com atividade estrogênica máxima ao final de 21 dias, conforme parâmetros morfológicos...